激光生物学报, 2006, 15 (5): 496, 网络出版: 2007-05-23
KCTD10基因的表达、抗体制备及其在常见细胞系中的表达
Expression and Preparation of Antiserum of Human KCTD10 and Its Expression Profile in the Cell Lines
摘要
人类KCTD10(channel tetramerisation domain-containing 10)基因属于PDIP1(polymerase delta-interacting protein 1)基因家族.最近的研究表明,小鼠KCTD10能同时和PCNA以及DNA聚合酶δ相互作用,并受肿瘤坏死因子α诱导;可能在诸如DNA修复、DNA复制、细胞周期调控以及人类的多种疾病中发挥重要作用,但对其确切功能和作用机制研究不多.克隆人的KCTD10基因到pQE-N3原核表达载体,在原核细胞株BL21(DE3)中表达并获得融合表达产物.获得的融合蛋白产物通过免疫新西兰大白兔获得兔抗KCTD10多克隆抗体.采用western印迹技术,用该抗体检测KCTD10基因的原核和真核表达产物,证明该抗体有较好的针对KCTD10蛋白的专一性,可用于对KCTD10的结构与功能研究.同时利用实时定量PCR的方法检测该基因在几种常见细胞系的表达情况,发现在NIH3T3细胞系中表达较高,而在HeLa、HepG2、SW480、PanC1、MCF7等癌细胞系中表达较低,由此推测KCTD10可能在癌症的发生中起到一定的作用.
Abstract
张文峰, 周爱东, 杨利平, 李红, 张健. KCTD10基因的表达、抗体制备及其在常见细胞系中的表达[J]. 激光生物学报, 2006, 15(5): 496. 张文峰, 周爱东, 杨利平, 李红, 张健. Expression and Preparation of Antiserum of Human KCTD10 and Its Expression Profile in the Cell Lines[J]. Acta Laser Biology Sinica, 2006, 15(5): 496.
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