目的: 体外构建符合人体生理环境的龋齿模型, 探讨光动力疗法(Photodynamic therapy, PDT)防龋过程中, PDT对口腔生物膜中致龋菌变形链球菌以及远缘链球菌的作用; 分析PDT防龋不同剂量的光敏剂以及激光能量对龋齿菌斑抑菌效果的影响, 为防龋的临床实践提供实验依据。方法: 通过体外远缘链球菌和变形链球菌体外抑菌实验, 选择合适的光敏剂和激光剂量; 选用变形链球菌以及远缘链球菌在体外构建符合人体生理环境的龋齿模型, 并对人工龋模型中口腔生物膜生长曲线进行检测, 以及釉质块表面显微硬度测定; 检测HMME-PDT对细菌生长活力以及产酸的影响, 采用显微硬度分析龋齿表面硬度变化, 探讨PDT防龋的作用机制。结果: 通过在体外对变形链球菌以及远缘链球菌的培养实验, 选定HMME-PDT防龋的最佳HMME剂量为50 μg/ml, 激光光照剂量为78 J/cm2; 将牙釉质与致龋菌的共培养成功构建人工龋模型, 人工龋齿组釉质表面显微硬度显著低于致龋前, 差异有统计学意义(P＜0.05); 口腔生物膜内致龋菌的生成曲线在第3天达到平台期; PDT防龋可有效的抑制人工龋口腔生物膜中远缘链球菌以及变形链球菌的生长活力和产酸能力, 相比于阴性对照组, 差异有统计学意义(P＜0.05), 从而维持人工龋釉质块表面显微硬度, 并显著高于其他组, 差异有统计学意义(P＜0.05); 在大鼠龋齿模型中, PDT治疗能够显著改善大鼠牙龈上皮组织, 骨组织等的异常。结论: 选择合适的光敏剂剂量以及最佳的激光光照剂量, 可有效的抑制人工龋口腔生物膜中远缘链球菌以及变形链球菌的生长活力, 抑制其产酸能力, 从而防止釉质的表面显微硬度进一步被破坏, HMME-PDT在龋齿的治疗中有着重要的临床价值。

近年来,5-氨基酮戊酸(5-aminolevulinic acid, ALA)介导的光动力学疗法(photodynamic therapy, PDT) 已经广泛用于尖锐湿疣、人乳头瘤病毒(human papilloma virus, HPV)感染性皮肤病、非黑素瘤型皮肤癌及癌前病变、中重度痤疮、皮肤光老化等多种皮肤疾病, 并且取得良好疗效, 有安全性、低复发性、选择性、有效性、可重复性、灵活实用性、微创性等优点。ALA-PDT在光敏剂、光源的改进、优化治疗参数的促进下, 在皮肤科领域有很大的应用前景。现在将近年国内外ALA光动力学疗法在皮肤病中的研究及临床应用进展, 进行分析和总结, 为临床医生的合理使用及治疗的选择上提供依据。

血管靶向光动力疗法(Vascular targeted photodynamic therapy, V-PDT)已成为临床治疗鲜红斑痣和老年黄斑变性等血管性疾病的重要方法。V-PDT通过主动或被动血管靶向的作用机制诱发系列生物响应以封闭病变血管。本文评述了V-PDT的作用机制和血管生物学响应, 重点讨论了用于评估V-PDT中血管损伤的光谱与成像技术, 并分析了这些技术的优点和局限性。最后展望了用于评估V-PDT血管损伤的光学技术发展及其应用前景。

介绍了光动力学疗法治疗肝胆肿瘤的实验室和临床研究现状, 提出了光动力学疗法在治疗肝胆肿瘤面临的问题, 并建议在腹腔镜手术中引入光动力学疗法, 认为随着新型光敏剂及光源的开发应用, PDT将会成为治疗肝胆肿瘤的切实可行方法。

通过聚二烯丙基二甲基胺盐酸盐和氯金酸制备阳离子纳米金, 将纳米金和5-氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinic acid, 5-ALA)通过静电吸附作用有效结合得到新型光敏剂。 应用共振瑞利散射光谱, 紫外-可见吸收光谱, 透射电镜和激光散射等方法对其进行了表征。 结果表明通过这种方法纳米金与5-ALA可以有效结合。 这种新型光敏剂对提高光动力学疗法临床疗效具有重要指导意义。

观察新型光敏剂5氨基乙酰丙酸（ALA）介导的光动力学疗法（PDT）治疗Fischer 344大鼠9L胶质瘤的效果并探讨其作用机制。20只雄性Fischer 344大鼠颅内种植9L脑胶质瘤细胞后，随机分为对照组、PDT治疗组（40 J/cm2组、80 J/cm2组和120 J/cm2组）。接种9L细胞7天后治疗组接受相应的ALA-PDT治疗。治疗后第7天处死所有动物，通过Hematoxylin-Eosin(H-E)染色法检测颅内肿瘤的生长情况；利用免疫组化法检测肿瘤细胞的增殖活性（Ki67）和TUNEL 法测定肿瘤细胞的凋亡。结果表明利用不同能量的ALA-PDT治疗后大鼠的生存状态明显改善，脑胶质瘤的体积减小，其治疗效果在一定范围内随着能量的增大而增强，但80 J/cm2和120 J/cm2的治疗效果基本相同。通过对肿瘤细胞增殖和凋亡的检测发现，ALA-PDT对细胞的增殖无影响，但可诱导肿瘤细胞的凋亡。ALA-PDT通过诱导肿瘤细胞的凋亡可有效治疗脑胶质瘤。

观察了低能量5-氨基乙酰丙酸介导的光动力学疗法(ALA-PDT)对脑组织新生血管形成和胶质瘤生长的影响。用10 J/cm2的ALA-PDT照射27只裸小鼠大脑皮层后第1、5、10天，利用二维、三维图像观察新生血管形成，western blot检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达。另将12只裸小鼠分为对照组(无特殊处理)和ALA-PDT预处置组(10 J/cm2)，ALA-PDT预处置后第10天，颅内接种U87胶质瘤细胞，21天检测肿瘤体积。结果发现，以照射区对侧大脑相应区域为对照，低能量ALA-PDT照射后第1和5天，血管形态无明显变化，第10天有新生血管形成；VEGF在照射后第5和10天显著增高；HIF-1α在照射后第1天即开始增高，随后越发明显。低能量ALA-PDT可通过HIF-1α诱导VEGF高表达和新生血管形成，这种微环境的改变有助于U87脑胶质瘤细胞的生长。

将自主研发的新型光敏剂叶绿酸f与T24细胞共同孵育后,以650 nm激光照射，通过MTT法检测光动力处理后T24细胞的生长抑制率，流式细胞术检测凋亡情况，同时利用激光共聚焦显微镜488 nm和405 nm双波长激发，应用线粒体探针,进行叶绿酸f的亚细胞定位。结果显示叶绿酸f为浓度2.5，5和10 μg/mL对T24细胞生长抑制率在光能量密度4 J/cm2下为17.68%，49.35%和84.42%，在1 J/cm2时为4.34%，37.42%和78.38%；流式细胞术显示T24细胞光动力处理后，凋亡率为(45.23±1.2)%，显著高于对照组；激光共聚焦显微镜显示504 nm激发叶绿酸f发出的红光与488 nm激发线粒体探针产生的绿光分布基本一致。实验证明叶绿酸f对T24细胞杀伤效果明显，主要是通过作用于线粒体，诱导细胞凋亡来完成的。

探讨贝伐单抗对低剂量5-氨基乙酰丙酸(5-Aminolevulinic acid, ALA)介导的光动力学疗法(photodynamic therapy, PDT)诱导的脑组织新生血管形成和U87脑胶质瘤生长的影响。通过将裸小鼠随机分为对照组、ALA-PDT预处置组(ALA: 2.3×10-3　mol/kg, 能量密度: 10 J/cm2)、贝伐单抗预处置组(1.6×10-5　mol/kg)和联合预处置组(ALA-PDT+贝伐单抗), 并接受相应处置。第10 d, 检测PDT照射及相应区域内新生血管形成和VEGF表达并种植U87脑胶质瘤细胞, 21 d后观察肿瘤体积。与对照组比较, 低剂量ALA-PDT预处置后新生血管增多、VEGF表达增高, 肿瘤体积增大, 这些变化在联合预处置组被抑制; 贝伐单抗预处置组的血管形态和VEGF表达虽无明显变化, 但肿瘤体积减小。研究结果表明低剂量ALA-PDT可通过刺激VEGF表达诱导照射区新生血管形成, 这种微环境的改变有利于U87胶质瘤细胞生长, 但这些作用可被贝伐单抗所抑制。

单态氧(1O2)是光动力学疗法(photodynamic therapy, PDT)过程中II型光化学反应的主要细胞毒性物质。通过直接测量1O2发光强度预测PDT疗效已成为PDT剂量学研究的前沿热点, 这种方法的最大优点在于能够克服现有其它剂量学方法中的光、光敏剂、氧分子, 以及组织光学特性等因素之间的复杂相互影响, 将PDT的疗效与1O2的产量直接关联起来。本文简述了PDT中1O2的产生机理、及其发光特性和检测技术, 比较和分析了1O2在不同溶剂体系中的寿命。重点总结了PDT-1O2剂量学在离体细胞、活体动物模型和临床前实验的最新研究进展, 并探讨了PDT-1O2剂量学所面临的主要技术挑战和今后的发展趋势。