辛露 1,*肖文 1刘雅坤 1张焕芝 2[ ... ]潘锋 1
作者单位
摘要
1 北京航空航天大学 仪器科学与光电工程学院,北京 100191
2 北京大学人民医院 妇产科,北京 100044
化疗药物敏感性测试中药物诱导的癌细胞凋亡的检测,对于实现更有效的个性化治疗具有重要意义。数字全息显微成像为癌细胞凋亡过程的检测提供了一种非侵入性的活细胞定量相位成像方法,能够满足细胞无标记、长时间成像以及药物作用下的细胞形态和动力学参数的评估。采用数字全息技术在无标记条件下对癌细胞加入药物后细胞凋亡过程进行动态连续成像记录,并对癌细胞相位图像进行数值再现,提取了细胞相位均值及细胞干重参数对癌细胞凋亡过程定量表征。实现结果表明,在癌细胞凋亡过程中,细胞相位值有不断增大的趋势,细胞面积减小,但细胞干重基本保持不变。而在细胞死亡破裂时,细胞相位值与细胞干重急剧减小,这可能是由于细胞膜破裂,细胞内物质流出导致的。这一结果也表明,数字全息显微成像能够为体外化疗药物敏感性检测提供了一种新的思路。
细胞凋亡 形态变化 数字全息成像 相位再现 细胞干重 Cancer cell apoptosis Morphological change Digital holography Phase reconstruction Cell dry mass 
光子学报
2022, 51(10): 1017001
作者单位
摘要
哈尔滨医科大学医学微生物学教研室, 哈尔滨医科大学伍连德研究所, 哈尔滨 150081
类风湿关节炎(RA)是一类以滑膜增生、滑膜关节损害、活动功能不全为主要特点的慢性全身性自我免疫炎症性病变。目前, 对于RA的治疗包括药物治疗、外科手术治疗和物理疗法。物理疗法中光疗法由于其无侵袭力、无痛等优势, 被用作辅助治疗手段普遍应用于临床。为此, 本研究通过630 nm LED红光探讨了光生物调节法通过促进成纤维样滑膜细胞凋亡, 从而治愈类风湿性关节炎的机理。JC-1染色试验表明, 630 nm LED光照后线粒体膜电位去极化增强, 膜电位降低; 使用CASP3活性检测试剂盒和CASP9活性检测试剂盒进行试验, 证明630?nm LED可以促进MH7A细胞中CASP3和CASP9酶的活性; 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)试验显示, 630?nm LED可以促进瞬时受体电位香草素1(TRPV1)的表达; 蛋白质免疫印迹试验(Western blot)证明, 经过630 nm LED红光照射可以促进MH7A细胞TRPV1蛋白的表达; CCK-8试验表明, 630 nm LED可以显著性抑制MH7A细胞活力, 但不能降低TNF-α刺激下TRPV1拮抗剂处理的MH7A细胞活性; TUNEL试验证实, 630 nm LED照射诱导MH7A细胞凋亡, 但不能诱导TNF-α刺激下TRPV1拮抗剂处理的MH7A细胞凋亡。综上所述, 630 nm LED红光在类风湿性关节炎中通过调控TRPV1促进TNF-α诱导的MH7A细胞凋亡, 这对辅助缓解RA滑膜炎症有一定作用。
发光二极管 类风湿关节炎 细胞凋亡 成纤维样滑膜细胞 LED rheumatoid arthritis apoptosis fibroblast-like synovial cells transient receptor potential vanilloid 1 TRPV1 
激光生物学报
2022, 31(3): 224
作者单位
摘要
华南师范大学物理与电信工程学院, 广州 510006
通过化学气相沉积法制备了g-C3N4@C-TiO2纳米颗粒, 利用X射线衍射(XRD)、荧光光谱(FS)、透射电子显微镜(TEM)、紫外-可见吸收光谱(UV-Vis)、能谱(EDS)等对纳米颗粒进行表征。分别研究了暗室条件及光照条件下g-C3N4@C-TiO2纳米颗粒对HL60细胞的作用效果。采用CCK-8法探究了一系列质量浓度梯度的纳米颗粒处理HL60细胞后的存活率, 并且通过荧光探针标记技术检测细胞内活性氧水平。试验结果表明, 在C-TiO2表面包裹g-C3N4, 可将TiO2可吸收的光波长范围拓展至可见光波段。制备的g-C3N4@C-TiO2粒径在10~20 nm, 满足其进入细胞的尺寸要求。暗毒性试验表明g-C3N4@C-TiO2纳米颗粒在暗室条件下对细胞的毒性较小, 证明了其具有良好的生物相容性。同时, 与TiO2和C-TiO2纳米颗粒处理组相比, g-C3N4@C-TiO2处理组的光动力灭活效率高达(76.5±1.9)%, 表明其可能成为治疗白血病的潜在光敏剂。
光动力治疗 光敏剂 HL60细胞 肿瘤细胞凋亡 photodynamic therapy g-C3N4@C-TiO2 g-C3N4@C-TiO2 photosensitizer HL60 cells apoptosis of tumor cells 
激光生物学报
2021, 30(1): 43
作者单位
摘要
1 太原师范学院生物系, 晋中 030619
2 山西瑞象生物药业有限公司, 太原 030032
本试验以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)为材料, 研究玫瑰花提取物(RE)对砷胁迫下酵母细胞生长和凋亡的影响。试验以抗坏血酸(Vc)溶液为标准抗氧化对照物, 1.0 mmol/L亚砷酸钠(As)为酵母胁迫浓度, 分别设置了酵母对照组、酵母+RE(1.5 g/L)培养组、酵母+Vc(0.1 g/L)培养组、酵母+As(1.0 mmol/L)培养组、酵母+As+RE培养组和酵母+As+Vc培养组。酵母细胞培养24 h后, 利用噻唑兰(MTT)细胞增殖法、平板点样法、荧光素二乙酸/碘化丙锭(FDA/PI)染色法、4', 6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)细胞核染色法和Annexin V-FITC/PI细胞凋亡流式检测法测定了酵母细胞的生长增殖与凋亡。试验结果显示, RE有效地缓解了砷对酵母细胞的损伤, 极显著提高了砷胁迫下酵母细胞的生长率和存活率(P<0.01), 极显著抑制了砷胁迫下酵母细胞的凋亡(P<0.01)。结果证实, RE对砷胁迫酵母细胞的凋亡有显著抑制作用, 在50%的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)清除率下, 其对砷胁迫下酵母细胞的凋亡抑制率显著高于Vc(P<0.05)。因此, RE作为天然植物提取物, 因其绿色、无毒的作用机制, 将在对抗重金属污染、提高机体抗氧化力、缓解氧化损伤等方面有着更广阔的应用前景。
玫瑰花提取物 抗坏血酸  酵母细胞 细胞凋亡 rose extract ascorbic acid arsenic yeast cell cell apoptosis 
激光生物学报
2020, 29(4): 325
作者单位
摘要
1 宁波大学海洋学院, 应用海洋生物技术教育部重点实验室, 浙江 宁波 315211
2 宁波大学理学院, 光学与光电子技术研究所, 浙江 宁波 315211
3 宁波大学医学院附属医院, 浙江 宁波 315211
根据细胞的生物吞噬特性,通过研究人肝癌细胞(HepG2)内吞Si纳米粒子的拉曼成像特性,提出了一种新的细胞凋亡检测方法。首先,在Si纳米粒子与细胞共培养过程中,对HepG2细胞施加不同浓度的凋亡诱导剂——黄连素,然后对细胞内吞的Si纳米粒子在520 cm-1处的特征拉曼峰检测成像,通过分析细胞区域拉曼像图像素的平均信号强度,表征细胞内吞Si纳米粒子的能力,再对照流式细胞术的检测结果从而获得在不同浓度细胞凋亡诱导剂作用下的细胞凋亡率。结果表明,随着黄连素浓度的增加,细胞区域拉曼像图的平均信号强度逐渐减弱,说明在HepG2细胞凋亡过程中线粒体的活性不断减弱,能量代谢受阻,造成细胞对Si纳米粒子的内吞能力减弱。特别地,在高浓度(150 μM)黄连素作用下,细胞区域内520 cm-1的特征拉曼峰十分微弱,说明此时HepG2细胞基本丧失内吞Si纳米粒子的能力。因此,基于细胞内吞Si纳米粒子拉曼成像方法,可以对不同环境下的体外细胞进行凋亡检测,将在细胞毒理研究和药效评价方面具有潜在应用。
Si纳米粒子 特征拉曼峰 拉曼成像 细胞凋亡 细胞摄取 Si nanoparticles characteristic Raman peak Raman mapping cell apoptosis cellular uptake 
光学与光电技术
2018, 16(4): 37
作者单位
摘要
上海交通大学医学院附属仁济医院血液科, 上海 200127
目的:研究探讨5-氨基乙酰丙酸介导的光动力疗法(ALA-PDT)对白血病细胞株HL-60的作用机制。方法: 以白血病细胞株HL-60为实验模型。实验分为2组, 对照组(未处理组)及ALA+PDT组。利用人全基因组基因表达谱芯片技术研究ALA-PDT后HL-60细胞基因改变情况。 结果: 人全基因组芯片共检测了48 000个基因, 用RT-PCR的方法验证了数据的可靠性, 对芯片结果产生的数据分析发现:ALA-PDT影响了细胞的多种生命进程, 如转录调控, 抑制翻译过程;促进一系列应激反应;上调促凋亡基因的表达, 抑制抗凋亡基因的表达, 促进凋亡的发生。结论: ALA-PDT通过诱导凋亡的方式杀伤HL-60细胞。多种调控机制参与凋亡的发生:c-Abl和PML基因是上调基因网络中的主导基因, 共同参与了凋亡的发生。线粒体途径和TNF途径激活, DEDD2及CDC2L2介导的凋亡通路也占了一定的地位。ERN1、Bcl2、及c-Jun等基因参与其中促进凋亡的发生。
5-氨基乙酰丙酸 光动力学治疗 细胞凋亡 基因表达谱芯片技术 5-ALA photodynamic therapy HL-60 HL-60 cell apoptosis DNA microarray 
应用激光
2016, 36(2): 233
李艳梅 1,2,3,4,*陈志亮 5赵明一 6彭忠禄 7[ ... ]齐绪峰 1,2,3,4
作者单位
摘要
1 暨南大学再生医学教育部重点实验室,广东 广州 510632
2 科技部及广东省科技厅“国际科技合作基地”,广东 广州 510632
3 再生医学联合实验室(暨南大学-香港中文大学),广东 广州 510632
4 暨南大学发育与再生生物学系,广东 广州 510632
5 漳州片仔癀药业股份有限公司,福建 漳州 363000
6 中南大学湘雅三医院,湖南 长沙 410006
7 湘南学院文学化生系,湖南 郴州 423000
目的:探讨心舒宝对大鼠心肌梗死的保护作用及其药理机制,为临床用药提供理论依据。方法:0.25 g/mL心舒宝灌胃二周后诱导大鼠心肌梗死模型,二周后进行大鼠心肌组织的Masson’s Trichrome 染色实验;利用胰酶消化方法分离大鼠心脏原代内皮细胞,并培养于培养液。用0.005%,0.01%,0.05%的心舒宝处理细胞后,缺氧培养24 h、48 h,流式细胞仪分析其凋亡率。结果:心舒宝处理组的大鼠心肌梗死面积及其切面胶原明显小于对照组(P<0.01);0.005% 心舒宝处理的大鼠心脏原代内皮细胞在缺氧48 h后,其凋亡明显降低(P<0.01)。结论:心舒宝可能通过降低大鼠心脏原代内皮细胞的凋亡而发挥保护大鼠心肌梗死的作用。
心舒宝 心肌梗死 细胞凋亡 Xinshubao myocardial infarction apop tosis 
激光生物学报
2015, 24(5): 448
作者单位
摘要
1 安徽大学生命科学学院, 安徽省中药研究与开发重点实验室, 安徽 合肥 230601
2 德国海德堡大学曼海姆医学院, 德国, 曼海姆 68167
目的: 研究菟丝子总黄酮对内分泌衰退痴呆模型小鼠学习记忆功能的影响, 并探讨其可能的作用机制。方法: 将50只昆明种雌性小鼠随机分为模型组, 雌激素对照组(0.3 mg·kg-1), 菟丝子总黄酮低剂量组(35 mg·kg-1), 菟丝子总黄酮中剂量组(70 mg·kg-1)和菟丝子总黄酮高剂量组(140 mg·kg-1), 采用背部去卵巢法切除双侧卵巢, 另取10只小鼠作为假手术对照组, 建立内分泌衰退小鼠模型, 术后各治疗组进行灌胃给药治疗三个月, 假手术组和模型组均给予0.9%生理盐水。给药结束后采用Morris水迷宫观察小鼠行为学变化; 放射免疫法检测小鼠血液中雌激素的水平; HE染色光镜观察海马神经元病理形态; 流式细胞仪检测小鼠海马神经细胞凋亡率和免疫印迹法检测海马区神经细胞凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、Csapase-3)及Cyt-c蛋白的表达水平。结果: 与假手术组相比, 模型组小鼠学习记忆能力明显下降(P<0.01); 血液中雌激素水平显著降低(P<0.01); 海马神经细胞凋亡率显著增加(P<0.01); Cyt-c、Caspase-3、Bax蛋白表达水平大大增加(P<0.01), Bcl-2蛋白表达降低明显(P<0.01)。与模型组相比, TFSC各治疗组小鼠学习记忆能力显著增强(P<0.05, P<0.01, P<0.01); 血液中雌激素水平上升显著(P<0.05, P<0.01, P<0.01); 小鼠海马区神经细胞凋亡率明显下降(P<0.05, P<0.01, P<0.01); 同时Cyt-c、Caspase-3、Bax蛋白表达水平均大大降低, Bcl-2蛋白表达均明显增加(P<0.05, P<0.05, P<0.01)。结论: TFSC可上调脑细胞中Bcl-2蛋白的表达水平, 抑制Bax、Caspase-3和Cyt-c蛋白的表达量, 进而增强神经元的可塑性和营养性, 以防止神经细胞从内源性线粒体途径丢失或凋亡, 进一步改善内分泌衰退型痴呆小鼠的学习记忆能力。TFSC可能是通过促进或增强下丘脑-脑垂体-性腺轴功能, 从而达到增加雌激素水平和改善内分泌系统功能的目的。
菟丝子总黄酮 内分泌衰退痴呆模型 雌激素 学习记忆 细胞凋亡 Total flavonoids from semen cuscutae(TFSC) model of Alzheimer disease with hypoendocrinism estrogen learning and memory apoptosis 
激光生物学报
2014, 23(3): 218
作者单位
摘要
广州医科大学, 医学遗传学及细胞生物学教研室, 广东 广州 510182
目的: 探讨Varp蛋白对人宫颈癌Hela细胞增殖及凋亡的影响。方法: 构建稳定表达Varp蛋白的Hela细胞株, 通过氚标胸腺嘧啶核苷酸(3H-TdR)掺入法及碘化丙啶(PI)染色流式细胞术检测Varp蛋白对Hela细胞增殖、凋亡等方面的影响。结果: 稳定表达Varp蛋白的Hela细胞相对于对照细胞, 其增殖明显下降, 而凋亡明显增加。结论: Varp蛋白在Hela细胞中稳定过表达能够增加细胞凋亡, 抑制细胞增殖。
细胞增殖 细胞凋亡 Varp Varp Hela Hela Proliferation Apoptosis 
激光生物学报
2014, 23(2): 154
作者单位
摘要
1 中南大学湘雅二医院普外科, 湖南 长沙 410083
2 中南大学中南大学粉末冶金国家重点实验室, 湖南 长沙 410083
目的: 探讨空心纳米粒子光敏剂与普通光敏剂在不同实验条件下对人HepG2肝癌细胞增殖的抑制作用及其作用机制。方法: 应用体内外培养的HepG2肝癌细胞, 以纳米化的photosan及photosan为光敏剂, 半导体激光器(波长630 nm)为光源进行光照射, 在不同的浓度光敏剂经不同剂量的光照后, 用MTT法测定光动力治疗后肝癌细胞的残存率, 并用流式细胞分析检测光动力治疗对肝癌细胞凋亡的影响, 采取Western blot检测光动力治疗肝癌后凋亡相关蛋白caspase-3和caspase-9的表达情况, 并建立裸鼠动物模型, 比较纳米粒子光敏剂与普通光敏剂在动物体内对肝癌抑制作用。结果: 纳米粒子光敏剂介导的光动力治疗对肝癌有明显的抑制作用, 在一定范围条件下, 随着光敏剂浓度的增加和激光剂量的的增大, 肝癌细胞的的残存率明显下降, 且纳米粒子光敏剂在同等条件下要优于普通光敏剂, 流式细胞分析显示, 空心纳米粒子光敏剂光动力治疗肝癌出现了明显的凋亡, 且比普通光敏剂更显著。Western blot 检测结果显示, 两种光敏剂均引起凋亡蛋白caspase-3和caspase-9的表达, 在空心纳米粒子光敏剂光动力作用组该两种蛋白的表达水平要明显高于普通光敏剂组。体内实验显示: 用纳米粒子光敏剂与普通光敏剂分别对裸鼠肝癌模型干预, 在生存期, 瘤体的体积大小, 纳米粒子光敏剂组显然优越于普通光敏剂组。结论: 空心纳米粒子光敏剂对肝癌细胞在体内外具有明确的抑制作用, 这种抑制作用可能通过引起凋亡相关蛋白高水平的表达, 从而促发凋亡通路的开放, 引起癌细胞发生凋亡。
空心纳米化光敏剂 光动力疗法 肝癌 细胞凋亡 nanoscale photosensitize conventional photosensitizer photodynamic therapy hepatic carcinoma cell apoptosis 
激光生物学报
2014, 23(1): 16

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