光子学报, 2008, 37 (3): 543, 网络出版: 2008-07-08   

DNA分析仪的灵敏度分析

Detection Limit of DNA Analyzer
作者单位
1 浙江大学,国家光学仪器工程技术研究中心,杭州,310027
2 广东技术师范学院,电子与信息学院,广州,510665
3 福建师范大学,物理与光电子技术学院,福州,350007
摘要
设计了DNA分析仪,采用激光诱导荧光对样品的毛细管电泳结果进行检测,对仪器的灵敏度进行了理论分析和实验测试.分析表明:荧光的探测灵敏度取决于入射到光探测器(PMT或CCD)上的荧光强度及光探测器自身的探测能力.结合设计参量,计算得到DNA分析仪针对染料TO(thiazole orange)作为荧光标记的探测灵敏度为0.127 fluor/μm3个荧光分子.和实验结果相比,双链DNA样品pGEM-3Zf(+)/Hae III Markers加TO进行毛细管电泳实验,得到实际的探测灵敏度为0.145 4 fluor/μm3荧光分子.研究表明:提高探测灵敏度的措施是制备性能良好的毛细管涂层和合理使用筛分介质,合理增大激光功率、尽可能增大物镜的数值孔径、提高光电倍增管的探测下限.
Abstract
参考文献

[1] ZHANG J Z,CHEN D Y,WU S,et al.High-sensitivity laser-induced fluorescence detection for capillary electrophoresis[J].Clinical Chemistry,1991,37(9):1492-1496.

[2] FU Jing-lin,FANG Qun,ZHANG Ting,et al.Laser-induced fluorescence detection system for microfluidic chips based on an orthogonal optical arrangement[J].Anal Chem,2006,78:3827-3834.

[3] SWINNEY K,BORNHOP D J.Detection in capillary electrophoresis[J].Electrophoresis,2000,21:1239-1250.

[4] PICKETT S C.Understanding and evaluating fluorescent microarray imaging instruments[J].IVD technology,2003,9(4):45-49.

[5] WANG Li-qiang,NI Xu-xiang,LU Zu-kang,et al.Research on laser confocal biochip scanner[J].Journal of Zhejiang University:Engineering Science,2005,32(4):565-568.王立强,倪旭翔,陆祖康,等.激光共聚焦生物芯片扫描仪的研究[J].浙江大学学报(工学版),2005,32(4):565-568.

[6] WANG Li-qiang,LU Zu-kang,NI Xu-xiang,et al.Auto gain control of the PMT used in confocal biochip scanner[J].Acta Photonica Sinica,2004,33(3):314-317.王立强,陆祖康,倪旭翔,等.共聚焦生物芯片扫描仪中PMT电流增益的自动控制[J].光子学报,2004,33(3):314-317.

[7] XU Guo-xiong,HUANG Zhen,NI Xu-xiang,et al.Analysis of fluorescence signal intensity and system sensitivity of biochip detection system[J].Acta Photonica Sinica,2004,33(10):1192-1195.徐国雄,黄震,倪旭翔,等.生物芯片检测系统中荧光信号强度及系统灵敏度分析[J].光子学报,2004,33(10):1192-1195.

[8] YU Zhen-yu,XIONG Bo,WANG Wei,et al.The optical design and optimization of laser based multimode detector for capillary electrophoresis[J].Acta Photonica Sinica,2006,35(8):1248-1253.余振宇,熊博,王玮,等.激光多模式毛细管电泳检测器的光学设计及优化[J].光子学报,2006,35(8):1248-1253.

[9] PRIVAT E,MELVIN T,MROLA F,et al.Fluorescent properties of oligonucleotide -conjugated thiazole orange probes[J].Photochemistry and Photobiology,2002,75(3):201-210.

[10] VISSCHER K,BRAKENHOFF G J,VISSER T D.Fluorescence saturation in confocal microscopy[J].J Microsc,1994,175(2):162-165.

[11] VAN G den Engh,FARMER C.Photo-bleaching and photon saturation in flow cytometry[J].Cytometry,1992,13(7):669-677.

[12] RACHLIN D J.Optimized approach for microarray scanning[C].SPIE,2002,4623:13-26.

汪洁, 王立强, 石岩, 郑华, 陆祖康. DNA分析仪的灵敏度分析[J]. 光子学报, 2008, 37(3): 543. 汪洁, 王立强, 石岩, 郑华, 陆祖康. Detection Limit of DNA Analyzer[J]. ACTA PHOTONICA SINICA, 2008, 37(3): 543.

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