1 湖南文理学院, 水产高效健康生产湖南省协同创新中心, 环洞庭水产健康养殖及加工湖南省重点实验室,动物学湖南省高校重点实验室, 湖南 常德 415000
2 湖南文理学院-大湖水殖股份有限公司教育部农科教合作人才培养基地, 湖南 常德 415000
3 淡水鱼类发育生物学国家重点实验室, 湖南 长沙 410081
为了给甲鱼病害防控的合理用药提供技术支持, 本研究自2018年4至5月采集了湖南常德某甲鱼养殖场急性死亡病样, 进行了病原分离、鉴定与药敏分析。试验采用无菌穿刺接种法从濒临死亡的病鳖肝脏中分离出1株病原菌, 命名为HTG。利用血琼脂平板对该病原菌进行毒力检测, 结合形态观察与16S rDNA序列分析法进行鉴定, 采用K-B纸片扩散法对病原菌进行药敏分析。毒力检测显示HTG在血琼脂平板上呈β溶血；16S rDNA序列分析表明HTG与Aeromonas hydrophila strain JCM 1027的16S rDNA基因的核苷酸序列同源, 相似性为100%, 结合形态特征将HTG鉴定为嗜水气单胞菌；药敏分析结果显示HTG对多西环素高度敏感(抑菌圈直径达30 mm)。根据药敏分析结果, 建议该养殖场采用内服多西环素,辅以保肝护肝渔药对该病进行防控。
甲鱼 急性死亡 病原菌 药敏分析 Trionyx sinensis acute death pathogenic bacteria 16S rDNA 16S rDNA drug sensitivity analysis
1 湖南文理学院, 水产高效健康生产湖南省协同创新中心, 环洞庭湖水产健康养殖及加工湖南省重点实验室, 动物学湖南省高校重点实验室, 湖南 常德 415000
2 湖南应用技术学院, 湖南 常德 415000
目的: 以珍珠健康养殖水体底泥为材料分离放线菌, 筛选对水产动物水霉病病原菌有抗菌活性的放线菌。方法: 采用稀释涂布法, 选用萘啶酮酸和放线菌酮双抗平板分离获得放线菌; 以黄颡鱼和湘云鲫鱼卵水霉病原菌为靶标菌, 采用琼脂块法测试所分离菌株抗水霉菌活性及其稳定性; 对拮抗活性强的放线菌采用形态观察和 16S rDNA 序列分析进行分类鉴定。结果: 从分离获得的27株放线菌中筛选出3株对水霉病原菌有拮抗活性的菌株QF1、DNC17和QHV2, 其中QHV2抗菌活性与稳定性最好; 形态学观察与 16S rDNA 序列分析结果表明QF1、DNC17和QHV2均属于链霉菌属（Streptomycete sp.）, 分别鉴定为Streptomyces diastatochromogenes、Streptomyces variabilis和Streptomyces collinus。结论: 3株放线菌对水霉病原菌具有较好的拮抗活性, 具有开发成抗水霉药物的潜在价值。
水霉 拮抗菌 放线菌 分离与筛选 分子鉴定 Saprolegnia antagonistic bacteria actinomycetes isolation and screening molecular identification.
1 湖南师范大学生命科学学院微生物分子生物学湖南省重点实验室, 湖南 长沙 410081
2 湖南省微生物研究所, 湖南 长沙 410009
将强启动子P43与透明颤菌血红蛋白基因(vgb)通过重叠延伸PCR进行融合, 克隆到芽孢杆菌整合表达载体pDG1730中, 重组表达载体pDG-P43vgb转化促生防病解淀粉芽孢杆菌FZB42, Wsetern-Blot和CO差光谱分析表明重组菌株FZB42-VHb表达了有活性的VHb蛋白, VHb的表达对重组菌株菌体的生长及抗菌脂肽的产生都有促进作用。在相同培养条件下, 重组菌最大菌体密度比原始菌株提高了14.49 %, 抗菌脂肽fengycin的产量提高了1.74倍, 抗菌脂肽surfactin的产量提高了3.14倍。
透明颤菌血红蛋白基因 解淀粉芽孢杆菌 抗菌脂肽 Vitreoscilla hemoglobin (VHb) gene Bacillus amyloliquefaciens antimicrobial lipopeptide
