采用正交试验优化GC-MS测定血清胆固醇及其标志物的样品前处理条件, 并对最优试验方案进行方法学评价。 采用L16（211）正交设计对影响GC-MS测定血清胆固醇及其标志物前处理的3个关键步骤共7个因素——皂化（KOH-乙醇浓度、 皂化温度和时间）、 萃取（正己烷用量）和衍生化（衍生化温度、 时间和用量）进行优化。 得到最优前处理条件组合如下： KOH-乙醇溶液浓度为1　mol·L-1； 皂化温度70　℃； 皂化时间60　min； 萃取剂用量2 mL； 衍生化温度70　℃； 衍生化时间60　min； 衍生化试剂用量100 μL。 所建方法准确性和精密性良好, 方法学评价指标优于文献报道。