作者单位
摘要
军事科学院防化研究院, 国民核生化灾害防护国家重点实验室, 北京 102205
采用F-4600荧光光谱仪, 对尿素和二甲基亚砜两种变性剂中烷基卤脱卤酶DhaA在氨基改性介孔泡沫固定化前后的荧光光谱特征进行测定。 运用荧光相图分析DhaA在两种变性剂中的去折叠过程, 并结合活性残留率进行了变性过程热力学参数计算, 比较固定化前后DhaA去折叠过程和热力学参数的区别。 实验结果表明, DhaA催化活性随变性剂浓度增加而降低。 相同变性剂浓度下, 固定化DhaA能够比游离态DhaA保持更高的催化活性, 在变性剂到达临界浓度之前(尿素浓度5.5 mol·L-1, DMSO浓度7 mol·L-1), 氨基改性介孔泡沫的稳定化作用显著。 DhaA在尿素诱导下的变性过程符合“二态模型”, 而在DMSO诱导下符合“三态模型”, DhaA中间态出现在浓度为5.6 mol·L-1。 氨基改性介孔泡沫固定化不改变DhaA变性过程, 但能够提高DhaA的去折叠热力学参数。 在尿素诱导下, 计算得到的DhaA初始吉布斯自由能变ΔG(H2O)为8.51 kcal·mol-1, 固定化后ΔG(H2O)提高为9.55 kcal·mol-1; 但由于尿素分子容易通过静电作用进入氨基介孔泡沫孔道, 固定化后DhaA的溶液可及面积m由3.69 kcal·(mol·mol·L-1)-1增大到4.00 kcal·(mol·mol·L-1)-1, 孔道内的氨基、 羟基能够通过氢键作用增强DhaA的刚性, 从而有效的降低了尿素可及面积增加带来的影响, 提高了DhaA的尿素耐受性。 在DMSO诱导下, 计算发现游离态与固定化DhaA在折叠态向中间态转变过程中的ΔG(H2O)均为12.12 kcal·mol-1, 由于孔道内的氨基、 羟基能够有效阻碍非极性DMSO分子的进入, 造成m从3.39 kcal·(mol·mol·L-1)-1降低为2.30 kcal·(mol·mol·L-1)-1; 当DhaA从中间态向去折叠态转化时, DhaA内部疏水基团暴露导致m增加, 由于孔道内极性微环境作用, 固定化DhaA的m值(4.40 kcal·(mol·mol·L-1)-1)仍然低于游离态DhaA(4.94 kcal·(mol·mol·L-1)-1)。 荧光光谱法研究固定化对DhaA去折叠过程及热力学参数的影响是深入研究DhaA稳定性的有效手段, 能够为其他生物酶的稳定化机理研究提供方法指导。
荧光光谱 稳定化机理 尿素 二甲基亚砜 DhaA DhaA Fluorescence spectroscopy Stabilization mechanism Urea DMSO 
光谱学与光谱分析
2019, 39(6): 1779
作者单位
摘要
华南师范大学生物光子学研究院, 激光生命科学教育部重点实验室和中医药与光子技术国家中医药管理局三级实验室, 广东 广州 510631
拉曼光谱技术作为鉴定生物分子种类最有力的分析工具之一, 具有快速、简单、无损、准确等优点。目前, 拉曼光谱已被国内外学者广泛开展了在人体组织的应用研究, 但由于生物组织具有高散射性, 因此限制了拉曼光谱对其的检测深度。本文主要采用光透明剂——二甲基亚砜对组织拉曼光谱的影响进行研究, 对离体猪皮组织的不同深度(100 μm, 200 μm, 300 μm, 400 μm)拉曼光谱强度随处理前、后不同时间(0 min, 10 min, 20 min, 30 min, 60 min)的变化进行对比。结果发现, 不管是经二甲基亚砜处理前还是后, 都出现随着距猪皮组织表面的深度加深, 其拉曼光谱强度都不断减少; 同时发现各层猪皮组织随着处理后时间的加长, 其特征峰的强度不断加强, 信噪比逐渐提高, 在处理后的60 min效果最好; 而且出现了在经二甲亚砜处理前看不见的峰(1 126 cm-1和1 426 cm-1)。结果表明: 5%DMSO对组织的处理能增强其拉曼光谱的强度, 同时也能使拉曼光谱仪的信噪比提高, 并且使组织谱图中特征峰也得到相应的增加。
显微共聚焦拉曼光谱仪 二甲基亚砜 光透明 raman microspectroscopy dimethyl sulfoxide(DMSO) optical clearing 
激光生物学报
2013, 22(6): 510
作者单位
摘要
1 中国工程物理研究院 激光聚变研究中心, 四川 绵阳 621900
2 电子科技大学 微电子与固体电子学院, 成都 610054
以三聚氰胺和多聚甲醛为原料,二甲基亚砜为溶剂制备三聚氰胺-甲醛(MF)气凝胶, 湿凝胶经超临界干燥, 制备出密度最低可达70 kg/m3的MF气凝胶。采用红外吸收光谱、场发射扫描电镜、N2吸附-脱吸附分析和热失重分析表征了MF气凝胶的组成、微结构以及热性能。结果表明:以二甲基亚砜为溶剂制备的MF气凝胶, 虽然其微观结构较以水为溶剂的气凝胶差, 比表面积及孔径分布均一性均降低, 但是其热稳定性有所提高。
三聚氰胺-甲醛气凝胶 二甲基亚砜 超临界干燥 溶胶-凝胶 melamine-formaldehyde aerogels Di methyl sulfoxide supercritical drying sol-gel 
强激光与粒子束
2010, 22(12): 2901

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