目的：探讨以甲苯胺蓝O(toluidine blue O, TBO)为光敏剂的光动力疗法(photodynamic therapy, PDT)抑制大鼠混合菌生物膜内主要致龋菌作用的影响。方法：以变形链球菌、血链球菌、嗜酸性乳杆菌和粘性放线菌为实验菌株, 建立牙菌斑生物膜模型。实验分为5组, 将40只大鼠随机分配, 8只大鼠为一组:A组用生理盐水处理, 作为阴性对照; B组用洗必泰处理, 作为阳性对照组; C组单纯激光组, 选择波长为630 nm, 应用输出强度为105 mW/cm2, 照射时间为9 min。D组单纯光敏剂组, 光敏剂浓度100 mg/L避光孵育5 min。E组TBO-PDT组, 光敏剂浓度为100 mg/L然后避光孵育5 min后, 应用波长为630 nm, 输出强度为105 mW/cm2进行激光照射。每只大鼠口腔分为4个区, 均选择每区内最后2个磨牙, 每只大鼠共计8个样本牙。平板菌落计数观察牙菌斑生物膜活性, 组织病理切片观察PDT对实验动物口腔软组织的影响。扫描电镜观察PDT作用前后牙齿表面形态的变化。结果: 与生理盐水处理组, 洗必泰处理组相比, TBO-PDT处理组牙菌斑内致龋菌存活的数量( CFU/mL)明显减少(P<0.05),其抑菌率为89.07%; 而C组与D组无明显抑菌效果。扫描电镜显示TBO-PDT组的磨牙表面比较光滑, 脱矿孔表浅。病理切片示TBO-PDT组牙周组织无明显损伤。结论：实验表明光动力疗法有明显的防龋效果, 且对牙体硬组织及牙周组织无明显损伤。

目的:体外观察不同光敏剂浓度和不同激光能量密度的TBO-PDT抑制离体牙根管内粪肠球菌的效果, 确定最佳光敏剂参数和激光参数, 并在此基础上探讨TBO-PDT在抑制离体牙根管内粪肠球菌上的作用优势, 为PDT应用于根管消毒的临床实践提供理论与实验依据。方法:对离体牙进行根管预备, 接种粪肠球菌, 厌氧培养21 d后建立粪肠球菌感染根管模型。将其随机分组:A组为阴性对照组, 以生理盐水冲洗根管;B组为阳性对照组, 以5.25%NaClO冲洗根管;其余组别根据光敏剂浓度的不同, 分为C1组80 μg/mL、D1组90 μg/mL、E1组100 μg/mL、F1组110 μg/mL、G1组120 μg/mL, 避光孵育5 min后用波长为630 nm功率密度为90 mW/cm2半导体激光在根管内上下提拉螺旋照射90 s;根据光照时间的不同, 分为C2组30 s、D2组60 s、E2组90 s、F2组120 s、G2组150 s, 光敏剂浓度为100 μg/mL避光孵育5 min后,用波长为630 nm功率密度为90 mW半导体激光在根管内上下提拉螺旋照射各实验组牙标本, 实验处理前后即刻取样, 厌氧培养24 h, 计数平板菌落, 明确实验处理前后根管内粪肠球菌的数量变化。结果:(1)不同光敏剂浓度下TBO-PDT对根管内粪肠球菌抑菌效果的影响。平板菌落计数结果显示:不同光敏剂浓度的各组抑菌率随光敏剂浓度的增加而增高。与阴性对照组相比, C1组、D1组、E1组、F1组和G1组的抑菌率显著提高, 而F1组和G1组两组间抑菌率没有明显差异。(2)不同光照时间对TBO-PDT抑制实验根管内以生物膜形式存在的粪肠球菌的抑菌效果。平板菌落计数结果显示:不同光照时间的各组抑菌率随光照时间延长而增高。与阴性对照组相比, 其中C2组、D2组、E2组、F2组和G2组的抑菌率明显升高, 而F2组和G2组两组间抑菌率没有明显差异。结论:TBO-PDT对以生物膜形式存在的粪肠球菌有明显的抑制作用, 实验证实TBO-PDT最佳光敏剂浓度为110 μg/mL, 最佳光照时间为120 s。

目的: 探讨细菌外排泵抑制剂(microbial efflux pump Inhibitor, EPI) ——维拉帕米对以甲苯胺蓝O(toluidine blue O, TBO)为光敏剂的光动力疗法(photodynamic therapy, PDT)抑制牙菌斑生物膜内主要致龋菌作用的影响。方法: 以变形链球菌、血链球菌、嗜酸性乳杆菌和粘性放线菌为实验菌株, 建立牙菌斑生物膜模型。以维拉帕米作为细菌外排泵抑制剂, 根据在PDT过程中加入维拉帕米和光敏剂的先后顺序, 实验分为5 组。A组: 生理盐水处理组。B组: 单纯PDT处理组。C组: 同时加入光敏剂和维拉帕米PDT处理组。D组: 先加入维拉帕米后加入光敏剂PDT处理组。E组: 先加入光敏剂后加入维拉帕米PDT处理组。平板菌落计数观察牙菌斑生物膜活性, 并运用激光共聚焦显微镜(Confocal laser scanning microscopy, CLSM)对处理后的牙菌斑生物膜进行断层扫描、分析。结果: 与生理盐水处理组相比, 单纯PDT处理组牙菌斑内致龋菌存活的数量( CFU/mL)明显减少(P＜0.05),其抑菌率为81.02%; 与单纯PDT处理组相比, 加入维拉帕米的PDT处理组内牙菌斑内致龋菌存活数量有下降趋势。其中先加入维拉帕米后加入光敏剂PDT处理组牙菌斑内致龋菌存活数量显著性下降(P＜0.05), 抑菌率高达93.60%; 激光共聚焦显微镜观察发现菌斑生物膜发生明显的变化。结论: 实验表明光动力疗法有明显的防龋效果, 且细菌外排泵抑制剂对PDT防龋效果有促进作用。