肿瘤转移抑制蛋白MTss1在小脑浦肯野神经元发育中表达受到调控, 然而功能并不清楚。拟通过RNAi的方法降低内源MTss1的表达, 为MTss1在神经元中的功能研究建立基础。针对小鼠MTss1基因(Mtss1)的mRNA序列, 设计合成三对shRNA序列, 克隆到pSuper-Retro-Puro质粒中, 瞬间转染GFP-Mtss 1持续表达的NIH 3T3细胞株, western blot结果表明三对shRNA 序列均可有效抑制MTss1的表达。进一步从pSuper质粒上酶切含shRNA的片段, 克隆到慢病毒载体pLVTHM中并与包装质粒和衣壳质粒共转293T细胞, 收集含病毒的上清液, 测定感染效率。结果表明成功构建抑制MTss1基因表达的shRNA慢病毒载体, 为内源MTss1的功能研究提供基础。

PMF方法由于具有高灵敏度、高通量和容易自动化等优点,在蛋白质组学鉴定中占有重要的地位.然而,许多样品(比如:小分子蛋白,混合物等)仅仅通过PMF方法不能明确鉴定.在这种情况下,在测定PMF的同一个样品上,选择一个酶解片段峰进行PSD测序,并把这些序列信息输入MS-Tag软件进行搜索,结合PMF方法,表观分子量等电点等参数,能够对胶上的点进行明确的鉴定.本文先用PSD方法对胶上的三个标准蛋白进行鉴定,都得到了非常准确的结果,同时鉴定了胶上的几个未知点.

硬脊膜外腔及椎管内用药是目前临床镇痛和麻醉药物的常用施药途径,在镇痛麻醉药物临床前研究中需要对动物施以硬脊膜外与椎管内置管手术以便进行药效与毒性研究.本研究室建立了一种实用于兔、犬、猴等较大动物的硬脊膜外及蛛网膜下腔的短期(数天)和长期(数月)置管方法.该方法结合临床穿刺和造影术定位,并根据动物的不同种类和差异进行适配和改进.上述置管法应用于虎纹镇痛肽(HWAP-I)的临床前药效和毒理研究,经200多例次兔、犬和猴动物实验证明,这是一种定位准确稳定可靠的置管法.