为了研究药物与胃蛋白酶(PEP)相互作用后对药效及胃部消化能力的影响, 在模拟生理条件下, 建立了光谱测定。本文通过荧光法、同步荧光法和分子对接模拟技术研究了在298, 310, 318 K时盐酸吡格列酮(PGH)和PEP之间的相互作用机理。结果表明, PGH与PEP之间通过静电引力及氢键作用以静态猝灭的方式形成了1∶1的稳定复合物; PEP的酪氨酸残基(Tyr)和色氨酸残基(Trp)均参与了反应; PGH-PEP的结合对后继配体存在正协同作用。通过估算得知：当患者服用PGH 15~45 mg时, 胃液中的药物结合率为0.0013%~0.0032%, 数值很小, 即PGH与PEP的结合对PGH药效几乎没有影响; PEP的结合率为69.76%~87.37%, 即服用PGH使得游离的PEP减少69.76%~87.37%, 表明服用PGH将使患者的消化功能受到影响。分子对接技术表明PGH与PEP的最佳结合位点位于PEP的催化活性中心处, 且两者的结合作用改变了PEP催化活性中心处氨基酸残基的微环境。

以同步荧光法研究了298, 310, 318 K下硝苯地平(NDP)与胃蛋白酶(PEP)的荧光基团酪氨酸残基(P-Tyr)、色氨酸残基(P-Trp)之间的相互作用。表明药物以动态猝灭的方式猝灭P-Tyr、P-Trp的荧光, 结合位点数n为1, 主要作用力是疏水作用。310 K时NDP与PEP氨基酸残基反应的荧光猝灭比率份数P-Trp 53.43%>P-Tyr 46.57%, 结合位置更靠近P-Trp, NDP与蛋白结合率P-Tyr: 69.43%~87.15%, P-Trp: 73.64%~90.60%, 分别建立了结合模型。且Hill系数nH约为1, 该结合与后继配体无协同作用。结合距离r都小于7 nm, 则NDP与P-Tyr、P-Trp之间都存在非辐射能量转移。

采用多种光谱法及计算机模拟技术研究了298, 303, 310 K温度下, 头孢他美酯(CFP)与胃蛋白酶(PEP)之间的结合机理。结果表明, CFP主要以非辐射能量转移的静态猝灭方式猝灭PEP的荧光, 两者主要通过静电作用力结合, 其结合率在310 K为74.73%~92.13%。采用同步荧光法和圆二色谱法研究CFP对PEP的反应, 结果表明两者的结合诱导了PEP的构象变化, 使PEP的内源荧光猝灭。采用计算机模拟CFP与PEP的对接, 结果表明CFP结合在PEP的催化活性位点处, 该结论与光谱法所得结果一致。利用CFP对PEP的荧光猝灭反应, 可以实现对实际药品中CFP含量的快速测定。