大连大学生命科学与技术学院, 辽宁 大连 116622
为研究动脉粥样硬化中单核细胞膜流动性的变化, 本实验选用20只新西兰白兔建立动物粥样硬化模型, 提取模型组与对照组兔外周血中单核细胞, 通过荧光漂白恢复技术检测单核细胞膜流动性, 并结合动脉粥样硬化动物模型病理切片揭示其与动脉粥样硬化相关性。结果显示动物动脉粥样硬化模型建立成功, 模型组单核细胞膜的荧光恢复率和扩散系数均低于对照组。本研究揭示了单核细胞细胞膜的流动性与动脉粥样硬化的发生有关, 为今后深入探究单核细胞与动脉粥样硬化关系提供实验基础。
动脉粥样硬化 细胞膜流动性 激光共聚焦显微镜 荧光漂白恢复技术 Atherosclerosis cell membrane fluidity laser scanning confocal microscope fluorescence recovery after photobleaching
1 大连大学生物工程学院, 辽宁 大连 116622
2 清华大学深圳研究生院生命科学与海洋生物学实验室, 广东 深圳 518055
3 大连大学附属新华医院检验科, 辽宁 大连 116021
细胞膜流动性是细胞的重要物理性质, 与细胞功能密切相关。为深入认识细胞膜与细胞功能的关系, 研究癌症机理及寻找预防治疗的方法提供新的视角和实验数据, 采用荧光漂白后恢复技术检测皮肤癌A431细胞和正常HACAT细胞的膜流动性, 同时测定蛋白激酶C的活性及mRNA的表达。通过激光扫描共聚焦显微镜的荧光恢复曲线计算得知A431细胞的荧光恢复率和扩散系数均低于HACAT细胞, 即A431细胞膜流动性低于HACAT细胞; 而蛋白激酶C活性、mRNA表达量却高于正常细胞。以上差异都有统计学意义(P<0.05)。由此推断癌细胞膜流动性与蛋白激酶C相互作用、相互影响, 彼此之间存在密切的关系。
细胞膜流动性 蛋白激酶化 癌症 membrane fluidity protein kinase C cancer
1 大连大学生物工程学院, 辽宁 大连 116622
2 大连大学附属医院病理科, 辽宁 大连 116021
利用共聚焦显微拉曼光谱系统, 检测了结直肠癌组织及邻近正常组织的拉曼光谱234例, 从分子水平探讨结直肠癌变的原因。 实验结果表明： 在900～2 100 cm-1频移范围内, 与正常组织比较, 归属于结直肠癌组织中脂类伸缩振动的1 067和1 133 cm-1 拉曼峰强度相对较弱, 扭转振动的1 299 cm-1与CH面内变形振动的1 264 cm-1拉曼峰的强度比值减少,应用SPSS16.0统计学软件进行平均值计算与比较, 正常组织中的1 299和1 264 cm-1的强度比值平均值为3.17, 癌变组织的为1.33； 二者的分界值为1.96, 以此判别结直肠癌组织和正常组织符合率为94%。 研究表明, 结直肠癌组织中脂类的链内纵向有序性下降, 不饱和度增加。 可推测结直肠癌组织中脂类的能量储存增加是引起这些变化的原因, 而这些变化将导致细胞膜的流动性增强, 从而改变细胞膜的物质运输、 能量传递和信号传导, 终将引起DNA 结构的变化。 因此, 脂类的能量分布变化可能是导致细胞癌变的原因之一。
显微拉曼光谱 不饱和度 脂类 结直肠组织 癌症 Micro-Raman spectroscopy Unsaturation Lipid Colorectal tissue
1 大连大学 生物工程学院,辽宁 大连 116622
2 大连大学 附属医院病理科,辽宁 大连 116021
3 大连大学 机械学院,辽宁 大连 116622
4 Institute for Chemical Process and Environmental Technology,National Research Council of Canada,Ottawa,Ontario,K1A 0R6,Canada
为了探索脂类分子结构的变化与细胞癌变的关系,应用共聚焦显微拉曼光谱系统,检测结直肠癌组织及邻近正常组织的拉曼光谱,得到归属于脂类CH2对称伸缩振动在2857 cm-1和反对称伸缩振动在2891 cm-1的拉曼峰以及归属于脂类和蛋白C-H伸缩振动在2938 cm-1的拉曼峰。实验结果显示,结直肠癌组织和邻近正常组织的拉曼光谱存在以下显著的差异:1) 与正常组织相比,结直肠癌组织中位于2857 cm-1和2891 cm-1的拉曼峰强度相对较弱,而2938 cm-1拉曼峰的强度相对较强。2) 结直肠癌组织中在2891 cm-1和2857cm-1的拉曼峰强度比值I2891/I2857小于正常组织的比值。用SPSS16.0统计学软件中平均值之间的比较功能计算出正常组织的I2891/I2857平均值为2.21,癌变组织的I2891/I2857平均值为1.69。研究结果表明,当正常细胞转变为癌细胞时,脂类分子的侧向堆积程度下降,细胞膜流动性增加,脂类与蛋白的相互作用增强,揭示了脂类分子伸缩振动的拉曼光谱与细胞癌变的关系。
光谱学 拉曼光谱 结直肠组织 脂类 癌症
1 大连大学生物工程学院,大连市,116622
2 大连理工大学物理系
目的 证明正常人与癌症患者血清拉曼光谱中频移为1 006、1 168和1 523 cm-1处的拉曼峰是由人体血清中β-胡萝卜素分子产生的;从能量角度,分子水平探讨细胞癌变的原因.方法 应用拉曼光谱技术检测β-胡萝卜素溶液样品.将β-胡萝卜素样品溶解在浓度为95%的CCl4分析纯溶剂中,配制成浓度为0.01 mg/ml(浓度大于人体血清中β-胡萝卜素的正常浓度值)的溶液,选择氩离子激光器输出波长为488.0 nm谱线作为激发光源,照射β-胡萝卜素溶液样品,经弱信号检测系统处理后,记录输出信号.结果 β-胡萝卜素溶液样品的3个拉曼频移值分别为1 003、1 164和1 524 cm-1;并发现β-胡萝卜素样品的拉曼峰随着照射时间的增加,其强度下降很快,发生了明显的光分解现象,而人体血清中β-胡萝卜素的拉曼峰随着照射时间的增加,其强度不下降,没有观察到光分解现象.结论 正常人与癌症患者血清拉曼光谱是由人体血清中β-胡萝卜素分子产生的;血清中可能存在着一种传能机制,且正常人和癌症患者血清中这种传能机制是不同的.
β-胡萝卜素 传能 拉曼光谱 癌症 血清
1 大连理工大学医院,大连市,116023
2 大连医科大学第一附属医院
3 大连医科大学病理中心
4 大连理工大学物理研究所
5 大连大学医学院
6 大连市第六人民医院
目的探讨用激光诱发自体荧光光谱( LIAF)技术对肝纤维化进行诊断的意义. 方法用 SD大鼠 100只,白蛋白、乙醇、四氯化碳和蛋白加贺普丁诱导造成肝纤维化模型.应用激光诱发自体荧光光谱检测正常大鼠血清与肝纤维化大鼠的血清. 结果肝纤维化大鼠血清的荧光平均主峰值出现了红移. 结论应用激光诱发自体荧光光谱技术,对肝纤维化大鼠的血清进行光谱分析,可找到一些有价值的数据,以用于肝纤维化的诊断,特别是早期诊断.
肝纤维化 诊断 激光荧光
