目的: 研究TRAF4影响结直肠癌细胞增殖的分子机制。方法: MTS和软琼脂集落形成实验检测基因沉默TRAF4后对结直肠癌细胞生长及相关信号通路的影响, 检测TRAF4表达下调后结直肠癌细胞的糖酵解变化及己糖激酶II的表达和结直肠细胞对5-Fu的敏感性。结果: 基因沉默TRAF4抑制结直肠癌细胞的停泊依赖和停泊非依赖增殖, 抑制EGF诱导的Akt活化, 下调结直肠癌细胞糖酵解, 抑制己糖激酶II的表达, 增加结直肠癌细胞对5-Fu的敏感性。结论: TRAF4通过调控糖代谢影响结直肠癌细胞增殖。

主要利用太赫兹时域光谱技术对人体正常肠组织表面黏液与癌变肠组织表面黏液进行检测。分别获得了不同样品在0.2 THz～0.8 THz波段的吸收系数和折射率。研究发现，新鲜正常肠组织表面黏液的太赫兹吸收与水的吸收接近，这提示水的贡献是主要的。同时，癌变肠组织表面黏液在吸收系数和折射率强度上普遍比正常肠组织表面黏液样品高，这表明该技术在癌组织检测中具有潜在的应用。研究结果表明，太赫兹时域光谱技术在生物组织检测和临床医学如肿瘤疾病诊断方面具有广泛的应用前景。

探索红外光谱监测肿瘤细胞凋亡的可行性及初步分析。 采用结肠癌细胞系SW620作为诱导细胞模型, MTT法确定最优5-FU诱导浓度, 无血清饥饿培养协同细胞周期阻滞在G1和S期, 傅里叶显微红外光谱仪(FTIR) 联合流式细胞仪(FCM)对SW 620细胞和凋亡的SW 620细胞12 h、 早期凋亡(24 h)和晚期凋亡(48 h)的峰位、 相对峰强等指标进行比较分析。 光谱分析结果显示SW 620对比凋亡细胞有以下特征: (1)与脂类相关谱带1 740 cm-1相对峰强比I1 740/I1 460明显降低(p<0.05), 表明凋亡细胞中脂类相对含量增多。 (2)与氨基酸残基相关谱带1 410 cm-1, I1 460/I1 460在凋亡早期和晚期明显升高(p<0.05), 与丝、 苏氨基酸相关谱带1 120 cm-1 向高波数移动, I1 120/I1 460明显升高(p<0.05), 表明凋亡细胞中DNA双螺旋解链, 氨基酸残基增多。 (3)DNA的反对称伸缩1 240 cm-1向高波数移动, 表明凋亡细胞中核酸分子构象发生改变。 (4)与核酸多糖1 040 cm-1相关谱带在凋亡的24和48 h出现, 向高波数移动, I1 040/I1 460在凋亡晚期降低(p<0.05)。 初步研究结果表明傅里叶变换红外光谱分析可能成为实时无创监测肿瘤化疗的有效方法。

为了寻找结肠癌的病理发展规律在拉曼光谱属性上的体现, 采用共聚焦显微拉曼光谱仪对60例离体的正常结肠组织、腺瘤性息肉和腺癌组织的近红外拉曼光谱进行对比检测, 初步探讨了三类组织的拉曼光谱特征及其改变的规律。结果表明: 三类组织拉曼光谱的差异明显存在于830, 855, 1 032, 1 210, 1 323, 1 335, 1 445, 1 450, 1 655 cm-1处, 腺瘤性息肉的光谱大体位于正常组织与腺癌组织之间。以组织病理诊断为金标准, 主成分分析结合线性判别分析技术建立的诊断算法区分3类组织的灵敏度分别为96.9%、85.7%和97.3%, 特异性分别为82.8%、90%和92.3%。因此, 拉曼光谱有潜力在分子水平上区分正常结肠组织、腺瘤性息肉和腺癌组织, 有望成为结肠癌早期诊断的一种有效方法。

通过表面增强拉曼散射（SERS）标记抗体检测结肠癌组织切片上癌胚抗原（CEA）的表达，探讨SERS标记免疫检测技术用于临床分析结肠癌组织切片中蛋白质表达的可行性。采用种子生长法合成Ag壳Au核复合纳米粒子，将4-巯基苯甲酸（4-MBA）作为标记分子吸附于纳米粒子表面，制备出SERS探针；再将这种探针与CEA单克隆抗体相结合形成SERS免疫探针；最后通过SERS标记的抗体与结肠癌组织切片上相应的抗原发生特异性结合，对滴加探针的组织切片进行SERS检测和成像。结肠癌腺上皮出现很强的SERS信号，而除了少数非特异性吸附产生的信号之外，间质及正常上皮中几乎不出现SERS信号。通过SERS成像可以清晰地看到结肠癌腺上皮显示红色，表明结肠癌腺上皮高表达CEA，而间质及正常上皮几乎显示黑色和深蓝色，只有极个别点为红色，表明间质及正常上皮基本不表达CEA。研究表明，SERS标记抗体检测分析技术具有高灵敏度和高特异性，有望应用于结肠癌组织切片中蛋白质表达的分析，成为结肠癌辅助诊断的一种重要方法。