表面增强拉曼光谱(SERS)是一种超灵敏的生化分析技术, 已经被广泛运用于细胞、核酸、蛋白质等生物分子的检测, 在生物医学领域表现出了巨大的应用潜力。近年来, 将表面增强拉曼光谱技术应用于遗传物质DNA的精准检测, 引起了人们广泛的关注。本文简要叙述了表面增强拉曼光谱技术的基本原理及其在DNA检测中的优势, 主要介绍了非标记的DNA-SERS检测应用进展, 其中包括本项目组的相关工作。研究表明, 非标记DNA-SERS技术有望成为一种快速、准确的临床诊断方式。

Southern杂交作为黄金标准, 已广泛运用于DNA的检测上。 但是, 经典的southern杂交和近年来一些DNA检测方法存在放射性污染, 操作繁琐, 耗时, 对实验仪器设备要求高等问题。 本文利用异硫氰酸荧光素(FITC)标记的dUTP合成DNA探针建立了快速检测DNA的液相杂交方法。 该方法包括探针制备、 液相杂交、 电泳分离和信号检测四个步骤, 并在此基础上对FITC-双链和FITC-单链探针的杂交效果作了比较。 结果显示, 使用FITC标记的两种探针都能取得良好的实验结果, 但单链探针较双链的检测灵敏度高; 双链DNA探针可以检测出0.8 μg(3.64×10-13 mol)的质粒, 而单链DNA探针可以检测出0.38 μg(1.82×10-13 mol)的质粒DNA, 在检出效率上是前者的2.1倍。 整个检测过程操作简便, 可在3 h内完成, 可较好地解决了其他DNA检测方法存在的费时费力的问题。