1 湖北文理学院 襄阳 441053
2 中国人民解放军海军特色医学中心 上海 200433
3 攀枝花市卫生健康委员会 攀枝花 617000
探讨由黄芪、刺五加、山药、葡萄籽及酸枣仁提取物混合组成的一种辐射防护中药组方（简称防辐组方）对辐射损伤小鼠脾脏的影响及保护作用。实验小鼠随机分为5组：对照组、模型组、防辐组方低，中，高剂量组（500 mg/kg、1 000 mg/kg、2 000 mg/kg）。6.5 Gy 60Co γ射线一次性全身照射建立辐射损伤模型。观察各组小鼠脾脏系数、脾脏组织病理学形态、Caspase-3，Caspase-9及细胞色素C活性、凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2及P53蛋白表达、脾脏T淋巴亚群CD4+、CD8+百分比、CD4+/CD8+比值及各组脾脏细胞DNA损伤程度等指标的变化情况。实验结果显示：与模型组比较，给药组小鼠的体重及脾脏系数均有所增高。其中，中剂量组和高剂量组增高最为显著（p<0.01或p<0.05）；给药组小鼠脾脏中的CD4+、CD8+百分比、CD4+/CD8+比值及Bcl-2的蛋白表达均上升显著，Caspase-3，Caspase-9，细胞色素C活性及Bax、P53的蛋白表达有显著性下降（p<0.01或p<0.05）；同时各给药组小鼠脾脏细胞的Tail DNA%、Tail Length及Olive尾距（OTM）均有显著性下降（p<0.01或p<0.05）。病理组织学观察发现，与模型组比较，给药组小鼠脾脏的红白髓区清晰，淋巴细胞坏死及中性粒细胞浸润均有明显下降。本研究提示，防辐组方对辐射损伤小鼠的脾脏具有一定的保护作用。推测其保护作用机制，可能与抑制细胞凋亡和减少DNA损伤有关。
防辐组方 辐射损伤 小鼠 脾脏 Fangfu formulas Radiation injury Mice Spleen 辐射研究与辐射工艺学报
2023, 41(2): 020302
1 南京中医药大学附属医院 核医学科 南京 210029
2 东南大学 临床医学院 南京 210009
为了研究131I标记贝伐单抗偶联载紫杉醇超顺磁性氧化铁纳米粒（131I - Bevacizumab - Paclitaxel -Superparamagnetic Iron Oxide Nanoparticles，131I-BEV-PTX-SPIONs）的制备和生物学分布。将30只成瘤裸鼠分为单靶向组及双靶向组，再按时间点2 h、6 h、12 h、24 h及48 h分为5个亚组，每亚组各3只，尾静脉注射131I-BEV-PTX-SPIONs后，进行生物学分布及单光子发射计算机断层成像术（Single-Photon Emission Computed Tomography，SPECT）显像。131I-BEV-PTX-SPIONs的粒径约220 nm，分散性尚可；131I标记率为81.4%；放射性化学纯度（Radiochemical Purity，RCP）＞99%；在PB缓冲液中稳定性良好；在体外PTX（Paclitaxel）缓释性能良好；与A549细胞有较好的亲和力。体内生物学分布结果：随着时间的延长，肿瘤组织的放射性计数相对增高，12 h达高峰；T/NT（Target to Nontarget）比值逐渐升高，48 h达7.80±0.50。6 h、12 h、24 h、48 h时，双靶向组的肿瘤组织放射性计数及T/NT比值均高于单靶向组，差异均具有统计学意义（P<0.05），且差异性随着时间延长越来越显著。SPECT显像结果：2 h肿瘤部位即有放射性聚集，且随着时间的延长，放射性聚集增加并持续稳定，T/NT比值持续上升。初步研究结果显示，131I-BEV-PTX-SPIONs具有用于肺癌诊疗的潜质，值得进一步研究。
超顺磁性氧化铁纳米粒 紫杉醇 核素131I 贝伐抗体 荷瘤裸鼠 肺癌 Superparamagnetic iron oxide nanoparticles Paclitaxel 131I Bevacizumab Tumor bearing nude mice Lung cancer
空军军医大学军事预防医学系辐射防护医学教研室 西安 710032
为探讨5G手机射频辐射（Radiofrequency radiation，RFR）对成年雄性小鼠精子质量和性激素水平的影响，24只健康成年雄性C57BL/6小鼠随机分为假暴露组（Sham）和4.9 GHz暴露组（4.9 GHz RFR），每组12只。暴露组小鼠接受功率密度50 W/m2、频率为4.9 GHz的RFR全身暴露，每天1 h，连续暴露21 d。暴露结束后，通过检测精子数量和畸形率评估精子质量；通过苏木精-伊红（HE）染色观察睾丸组织形态；酶联免疫吸附试验（ELISA）测定睾酮（T）、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、促性腺激素释放激素（GnRH）、胶质源性神经营养因子（GDNF）和干细胞因子（SCF）的水平；蛋白免疫印迹（Western blot）检测睾丸组织中GDNF和SCF以及血睾屏障紧密连接相关蛋白（ZO-1和Occludin）的水平。与Sham组相比，4.9 GHz组睾丸形态、精子数量和畸形率无显著改变；血清中FSH和LH含量无明显改变；睾丸内GDNF、SCF、ZO-1和Occludin蛋白水平均无明显变化；但是血清中T和GnRH含量显著降低。结果表明，本实验条件下，4.9 GHz RFR对小鼠精子质量无明显影响，但可导致性激素水平紊乱。
手机射频辐射 小鼠 睾丸 精子 性激素 Mobile phone radio frequency radiation Mice Testes Sperm Sex hormones 辐射研究与辐射工艺学报
2023, 41(1): 010301
1 安徽医科大学基础医学院, 合肥 230032
2 军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所, 北京 100039
为观察3.74 μm远红外激光致角膜损伤的特点和损伤修复过程, 利用该激光在光斑直径为2 mm、照射时间为0.8 s、辐照量为23.2 J/cm2的条件下照射C57BL/6J小鼠角膜, 采用大体观察、裂隙灯显微镜、光学相干断层扫描(OCT)以及组织病理方法, 在角膜损伤后3 h、6 h、12 h、1 d、3 d、7 d、14 d和21 d进行观察。大体观察角膜损伤即刻可见灰白色损伤斑, 表面凹凸不平, 角膜混浊随时间逐渐加重, 1 d达到顶峰, 3～7 d混浊减轻, 14～21 d再次加重。裂隙灯下角膜损伤累及全层, 角膜厚度随时间先增大后逐渐恢复。OCT观察角膜损伤后明显外凸, 反射光带全层性增强, 3 h角膜显著增厚, 12 h达到最厚, 后逐渐恢复至正常。经组织切片观察: 上皮层损伤后3 h核固缩深染, 6～12 h核染色变淡消失, 1 d 时1～2层新生上皮完全覆盖损伤区, 3～7 d上皮细胞增至3～4 层, 14～21?d恢复正常; 基质层损伤后3～6 h核染色质大量脱失, 12 h出现浸润细胞, 后浸润细胞增多, 由基质深层向浅层迁移, 14～21 d浸润细胞减少, 纤维排列仍不规则; 内皮层损伤后3 h细胞脱落, 1 d出现少量新生细胞, 其后逐渐增多并趋向恢复。结果表明, 3.74 μm激光在23.2 J/cm2照射剂量下可致角膜全层损伤, 角膜损伤反应随时间先加重后逐渐恢复, 21 d时上皮和内皮层基本恢复正常, 但基质层并未恢复透明。本研究为红外激光角膜损伤危害评价和损伤治疗研究提供了试验依据。
3.74 μm激光 照射剂量 小鼠 角膜 损伤修复 3.74 μm laser radiation dose mice cornea wound healing
1 湖南南华爱斯普林生物技术有限公司, 长沙 410000
2 湖南师范大学医学院医学检验系, 长沙 410013
干细胞治疗作为某些难治性疾病的新型治疗手段, 在组织修复、自身免疫疾病和退行性疾病治疗中具有重要的临床价值。本研究以裸鼠为动物模型, 通过裸鼠皮下成瘤、克隆形成和端粒酶活性等试验, 评估人脐带间充质干细胞的安全性, 为干细胞用于临床治疗的安全性提供参考。裸鼠成瘤性试验结果显示, 阴性对照组和试验组成瘤数均为0, 阳性对照组成瘤数为12。克隆形成试验结果显示, 阴性对照组和试验组无克隆形成, 阳性对照组有克隆形成。端粒酶活性测定结果显示, 阴性对照组端粒酶相对活性为0.01, 阳性对照组端粒酶相对活性为4.33, 试验组 P6代细胞端粒酶相对活性为1.70。因此, 本研究的评估结果显示, 人脐带间充质干细胞在裸鼠中不致瘤, 克隆形成试验结果为阴性, 端粒酶活性测定结果正常, 具有良好的遗传稳定性。人脐带间充质干细胞在本试验中展现了良好的安全性, 具有较好的临床应用价值。
脐带间充质干细胞 端粒 裸鼠成瘤性 克隆形成试验 安全性 umbilical cord mesenchymal stem cells telomere tumorigenicity in nude mice clone formation experiment safety
1 山西农业大学 分子农业与生物能源研究所, 太谷 030800
2 山西农业大学 农学院, 太谷 030800
3 中国石油大学(华东)生物工程中心, 青岛 266580
功能性便秘是近几年比较常见的一种肠道疾病。越来越多的证据证明一些生物源功能活性物质对于治疗便秘有积极的疗效。螺旋藻富含多糖化合物, 且具有广泛的生理功能。本文分析不同剂量螺旋藻多糖(PSP)对地芬诺酯诱导便秘小鼠的治疗效果, 检测各组小鼠的体重、首次排便时间和数量、肠道酶活性, 菌群组成以及相关功能基因表达等。结果显示, PSP低、中、高剂量组小鼠六小时内排便数量都显著增加(P<0.05), 且首次排黑便时间缩短。同时, 小鼠的体重增长没有受到显著影响。PSP治疗后, 便秘小鼠肠道内木聚糖酶和蛋白酶活性恢复到正常组水平(P<0.05)。此外, PSP处理改变了便秘小鼠肠道主要微生物菌群组成, 上调了一些有益功能基因的丰度, 从而达到缓解便秘的效果。PSP处理上调KO0845(葡萄糖激酶)丰度水平, 能维持机体血糖平衡。这些发现表明, PSP饲喂处理可显著改善小鼠肠道微生态, 缓解小鼠便秘病症, 为解决慢性便秘提供一种有效的食疗方案。
螺旋藻多糖 便秘小鼠 肠道酶活性 菌群丰度 功能基因 Spirulina polysaccharide constipation mice enzyme activity bacterial abundance functional gene
1 长沙医学院临床医学系, 湖南 长沙 410000
2 广东省人民医院, 广东省医学科学院泌尿外科, 广东 广州 510080
3 长沙医学院病理生理学教研室, 湖南 长沙 410000
本研究旨在探索被动吸烟对小鼠肾草酸钙结石模型形成的影响。将55只小鼠随机分为正常对照组(A组) 、模型组1(B组)、模型组2(C组)、模型3组(D组)。A组正常对照组予以单纯生理盐水灌胃; B组诱石+被动吸烟组予以诱石剂灌胃(含0.75%乙二醇、0.75%氯化铵), 同时将小鼠放入吸烟染毒箱建立被动吸烟模型; C组单纯诱石灌胃组予以单纯诱石剂灌胃; D组单纯被动吸烟组予以等量生理盐水灌胃的同时将小鼠放入吸烟染毒箱建立被动吸烟模型。实验期间观察小鼠的进食进水情况、活动情况、生命体征及个体体毛等变化。分别于造模 7、14、21、28 d收集尿液进行尿草酸和尿钙含量的测定; 于造模结束后采集小鼠血清比较血肌酐浓度; 剖取肾脏称量并计算肾脏系数。造模3 d后, B、C两组小鼠出现爬行困难, 部分灌胃后出现深大呼吸, 活动减弱, 食欲减退, 体毛无光泽, B组小鼠较 C组小鼠表现更明显: 造模 7 d 后, B、C组开始出现不同数量的动物死亡, 且 B组死亡率明显高于 C组; 造模21天后, D组小鼠也开始出现死亡, 但A组小鼠实验中均未观察到死亡。不同时间点比较, B、C组小鼠尿草酸、尿钙、血肌酐浓度均高于 正常对照A组和单纯被动吸烟D组(P<0.05), 同时发现, B组(诱石灌胃+被动吸烟)尿草酸、尿钙浓度均明显高于 C组(诱石灌胃)(P<0.05)。与A组和D组比较, 模型组B、C组小鼠肾脏系数均明显增加, 差异具有统计学意义 (P<0.05)。结果表明, 被动吸烟可促进小鼠草酸钙型肾结石的形成。
被动吸烟 草酸钙型肾结石 乙二醇 小鼠 passive smoking calcium oxalate kidney stones ethylene glycol mice
1 安徽大学生命科学学院, 安徽省中药研究与开发重点实验室, 安徽 合肥 230601
2 安徽医科大学第一附属医院药剂科, 安徽 合肥 230022
目的: 探讨烧伤膏对烫伤小鼠皮肤创面修复的可能作用机制。方法: 将50只小鼠随机分为5组: 正常组、模型组, 烧伤膏高、中、低剂量组。除正常组和模型组外, 烧伤膏实验组小鼠每天外涂烧伤膏治疗, 连用15天。治疗结束后, 采用Masson染色技术检测各组小鼠皮肤厚度及细胞病理形态; 采用生化法检测皮肤中羟脯氨酸(Hyp)含量; 采用ELISA技术检测皮肤中的TNF-α, IL-1β、Collagen I、EGF和TGF-β1的含量。结果: 与正常组相比, 模型组小鼠皮肤烫伤创面可见表皮细胞脱落, 结构模糊, 细胞变性坏死, 表皮和真皮厚度明显减少, 胶原纤维变薄, 排列紊乱无序, 呈断裂状; 烧伤后创面局部组织中Hyp、TNF-α、IL-1β的含量显著升高(P<0.01, P<0.01, P<0.01), 而EGF、TGF-β1和Collagen I含量均明显减少(P<0.01, P<0.01, P<0.01), 而应用烧伤膏治疗15天后, 上述各项实验指标明显得到改善。结论: 烧伤膏抑制创面早期感染, 减少胶原蛋白的分解和促进后期创面修复的作用可能与抑制炎性细胞因子和增加皮肤相关生长因子表达的作用机制有关。
烧伤膏 烫伤小鼠模型 皮肤创面修复 细胞因子 生长因子 burn ointment scalded mice model skin wound repair cytokines growth factor
黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院，黑龙江 大庆 163319
目的:复合因素建立与临床症状相似的亚健康小鼠模型。方法:采用强迫游泳、睡眠剥夺、装管束缚、夹鼠尾应激建立亚健康小鼠模型，通过小鼠外观、行为学数据及病理检测鉴定模型是否成功。结果:造模结束后，模型组小鼠外观、体重、自主活动量、避暗次数、绝望时间、力竭游泳时间与对照组小鼠相比差异显著（P<0.05），病理结果显示模型组小鼠未见异常。结论:复合因素成功建立亚健康小鼠模型。
复合因素 亚健康模型 小鼠 compound factors sub-health model mice
广州医科大学附属第三医院生殖医学中心, 广东省生殖医学重点实验室, 广东省产科重大疾病重点实验室, 广东省普通高校生殖与遗传重点实验室, 广东 广州 510150
目的: 构建小鼠睾丸特异性基因Vad1.2重组蛋白, 制备多克隆抗体。方法: 将小鼠睾丸组织Vad1.2转录本行RT-PCR扩增, 通过DNA重组技术插入克隆载体pET15b, 进行酶切及DNA序列分析。将表达载体转化入大肠杆菌BL21(DE3)RIL感受态细胞, 10 mmol/L IPTG诱导表达重组蛋白, 通过10% SDS-PAGE、Western blotting及质谱分析进行鉴定。随后对重组Vad1.2蛋白进行纯化和进一步鉴定。最后, 制备兔抗小鼠Vad1.2多克隆抗体, 并通过Vad1.2-EGFP质粒转染GC-2spd(ts)细胞对其特异性进行验证。结果: 大肠杆菌BL21(DE3)RIL细胞中诱导表达并纯化的小鼠Vad1.2重组蛋白构建正确并经Western blotting和质谱分析得到证实。所制备的多克隆抗体可特异性识别GC-2spd(ts)细胞中过表达的Vad1.2-EGFP融合蛋白。结论: 成功构建小鼠Vad1.2重组蛋白, 并制备多克隆抗体, 为Vad1.2基因的进一步研究奠定了实验基础。
精子发生 重组蛋白 多克隆抗体 小鼠 spermatogenesis Vad1.2 Vad1.2 recombinant protein polyclonal antibody mice
