淮北师范大学, 生命科学学院, 资源植物生物学安徽省重点实验室, 安徽 淮北 235000
为了解高温处理促进大豆幼胚萌发成苗的分子生物学机制, 采用经典的基因表达差异显示技术, 分析大豆品种日本晴高温处理的幼胚与对照组材料的差异表达基因。对其中一个差异表达基因K6进行了测序和比对分析, 结果表明该基因序列与大豆Williams 82 基因组中的Lea5基因相似度高达99%, 可以确定为Lea5基因。Blastp比对分析结果表明大豆Lea5蛋白为LEA-3亚家族成员。利用蛋白质分析软件分析了Lea5基因推测的蛋白质结构的特点, 结果表明该蛋白质由113个氨基酸组成, 相对分子量为12.283 kD, 等电点高达10.12。该蛋白质不形成典型的二级结构。RT-PCR分析表明该基因表达具有组成型特点, 在大豆幼胚发育过程中稳定表达, 在大豆的根、胚轴和叶片等器官中均有表达。
大豆幼胚 高温处理 差异显示技术 Lea5基因 逆转录PCR soybean young embryos treatment by high temperature DDRT-PCR Lea5 gene RT-PCR