淮北师范大学, 生命科学学院, 资源植物生物学安徽省重点实验室, 安徽 淮北 235000
为了解高温处理促进大豆幼胚萌发成苗的分子生物学机制, 采用经典的基因表达差异显示技术, 分析大豆品种日本晴高温处理的幼胚与对照组材料的差异表达基因。对其中一个差异表达基因K6进行了测序和比对分析, 结果表明该基因序列与大豆Williams 82 基因组中的Lea5基因相似度高达99%, 可以确定为Lea5基因。Blastp比对分析结果表明大豆Lea5蛋白为LEA-3亚家族成员。利用蛋白质分析软件分析了Lea5基因推测的蛋白质结构的特点, 结果表明该蛋白质由113个氨基酸组成, 相对分子量为12.283 kD, 等电点高达10.12。该蛋白质不形成典型的二级结构。RT-PCR分析表明该基因表达具有组成型特点, 在大豆幼胚发育过程中稳定表达, 在大豆的根、胚轴和叶片等器官中均有表达。
大豆幼胚 高温处理 差异显示技术 Lea5基因 逆转录PCR soybean young embryos treatment by high temperature DDRT-PCR Lea5 gene RT-PCR
1 湖南师范大学生命科学学院,中国湖南长沙410081
2 中山大学生命科学学院,中国广东广州
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从青鱼(Mylopharyngodon piceus)脑下垂体中提取总RNA,采用逆转录PCR法扩增出青鱼生长激素cDNA编码区,克隆到Pucm-T载体上.序列测定表明青鱼生长激素基因的开放阅读框含有630bp,其中包括22个氨基酸的信号肽和188个氨基酸的成熟肽,青鱼生长激素基因的克隆成功为该基因的功能及应用研究奠定了基础.
青鱼 逆转录-PCR 生长激素 同源性 Mylopharyngodon piceus RT-PCR growth hormone homology
