1 北京理工大学工程光学系, 北京 100081
2 中国科学院生物物理研究所, 北京 100101
研制了一种可探测细胞微弱荧光图像的数字化高灵敏度荧光显微镜,采用视频数字化增强型CCD系统作为高灵敏度的接收系统,像增强器亮度增益为41,000,因而这种荧光显微镜可探测到普通荧光显微镜不能观察的微弱荧光图像,并可减少荧光物质的浓度和激发光的强度,减少对细胞自然生理环境的影响。数字化高灵敏度荧光显微镜在给出细胞微弱荧光图像的同时,并可给出图像上每一像元的发光强度和细胞平均发光强度。使用此仪器已首次直接得到了:1)光敏竹红菌甲素(HA)在HeLa细胞(人体宫颈癌细胞)中的分布,证实HA主要分布在HeLa的细胞膜中;2)HeLa细胞在有HA存在时受强光照射后的光损伤现象;3)加入三种细胞抗氧化剂维生素E、丁羧基甲苯(SF)和阿魏酸钠(BHT)后获得不同程度保护的细胞状态;4)一定浓度的HA在HeLa细胞随时间的摄取曲线;5)不同HA浓度一定时间内在HeLa细胞中被吸收量的曲线。
荧光显微镜 像增强器 光敏损伤 细胞抗氧化剂
将表面增强激光拉曼技术(SERS)作为探针引入光敏损伤的研究。利用这种新的光谱方法研究了新光敏剂铝酞菁对几种核酸碱基分子的光敏损伤过程,发现G(乌嘌呤)对光敏化的敏感性最强,A(腺嘌呤)其次,C(胞嘧啶)和U(尿嘧啶)则不敏感。实验证实,是铝酞菁的光动力反应产物单线态氧,在核酸碱基的光敏损伤中起主要作用。
表面增强拉曼散射 光敏损伤 单线态氧