目的: 通过靶向CTLA4 siRNA探讨CTLA4在T调节细胞诱导异种抗原免疫耐受中是否发挥功能及其作用机制。方法: 体外扩增培养利用磁珠分选出的T调节细胞, AO/PI染色计算活率并通过细胞计数作出生长曲线, 流式细胞仪检测扩增后细胞表型; 采用Alex488染料标记siRNA, 通过流式细胞仪检测siRNA的转染效率; 实时定量 PCR检测靶向CTLA4 siRNA的沉默效率; 流式细胞术检测CTLA4 在蛋白水平的变化; 混合淋巴实验检测CTLA4表达下调后, T调节细胞的功能变化。结果: 经过4周体外扩增, T调节细胞能够增长约1 200倍, 并具有高活率和高纯度; siRNA的转染效率为61.8%± 4.5%; Realtime PCR和流式细胞术检测CTLA4在mRNA水平和蛋白水平均有不同程度下降, 其结果与对照组相比差异显著 （P<0.05）; 混合淋巴实验结果显示T效应细胞在受到异种抗原刺激时会发生增殖, Treg细胞能够抑制这种增殖, 但是CTLA4表达下调后明显减弱了T调节细胞的抑制能力。进一步, 在DC细胞参与的混合淋巴实验中发现Treg能够通过DC抑制T效应细胞对异种抗原的应答, 而siCTLA4-Treg不能通过DC抑制T效应细胞增殖。结论: CTLA4在Treg介导的异种免疫应答中发挥着重要作用, 这种作用方式可能是通过直接作用于T效应细胞或者间接通过DC细胞作用于T效应细胞发挥作用。靶向CTLA4 siRNA能够下调Treg 细胞CTLA4的表达, 影响Treg细胞抑制异种抗原引起T效应细胞应答的能力。