含PX结构域的丝氨酸/苏氨酸激酶基因(PXK)是一种多组织广谱表达的基因, 在免疫相关疾病中发挥了重要作用。本研究的目的是通过多个数据库中的多个生物信息学方法分析PXK与急性髓细胞样白血病(AML)发生发展的相关性。利用UALCAN 数据库在线分析 PXK 在 AML 不同亚型中的表达情况; 利用LinkedOmics网站分析PXK表达水平与AML临床病理特征的相关性; 利用Kaplan-Meier Plotter数据库分析PXK在AML中mRNA的表达情况, 并评估PXK在AML中对生存率的影响; 利用String和GEPIA数据库分析PXK互作蛋白网络及表达相关性; 利用quanTIseq算法分析PXK基因与肿瘤浸润免疫细胞相关性; 利用“xCell”R包分析PXK基因表达水平与多个免疫检查点表达相关性; 利用Metascape数据库对PXK及其共表达基因进行功能富集分析, 并预测其生物学功能。结果显示, PXK在多种癌症肿瘤组织中较正常组织高表达, 在AML中的表达水平显著上调, 并对AML患者的各临床病理特征、生存率及预后产生影响, 但高表达PXK的AML患者预后较好。PXK在AML组织中高表达, 并与AML的发生发展密切相关, 可能是AML诊断、治疗效果及预后评估的重要指标之一。

为了构建急性髓系白血病(AML)患者的预后风险模型，本研究通过IMMPORT数据库提取免疫基因，通过基因表达综合(GEO)数据库和AML相关转录组RNA测序数据集筛选差异表达的免疫基因，基于癌症基因组图谱(TCGA)数据库下载AML相关的表达谱数据集(TCGA-LAML)及临床数据，对差异表达的免疫基因进一步进行单因素COX回归分析和多因素COX回归分析，最终确定了关键免疫基因，随后根据免疫基因进行单基因预后分析以及免疫浸润分析。结果显示: 与正常对照组相比，在AML患者的骨髓样本中，有55个免疫基因显著上调或下调，其中由4个免疫基因(FGF13、GZMB、FLT3、CRLF3)构建的风险模型能预测AML患者的预后［曲线下面积(AUC)=0.741］; 高风险组和低风险组之间免疫细胞的含量存在显著差异，其中FGF13、CRLF3为低风险基因，GZMB、FLT3为高风险基因。这为4个免疫基因FGF13、GZMB、FLT3、CRLF3及其构建的风险模型用于监测AML患者的预后和免疫浸润情况提供了理论基础。

急性早幼粒细胞白血病(APL)属于急性髓系白血病（AML）, 是FAB分型中的M3亚型。 部分APL患者形成早幼粒细胞白血病/维甲酸受体融合基因, 即PML-RARα融合基因。 在内外界多种因素的共同作用下, 早幼粒细胞白血病发病。 胚胎干细胞(ESCs)具有多向分化的能力, 在一定诱导条件下, ESCs可以向造血系统分化。 早幼粒细胞位于ESCs分化下游, 为粒系分化阶段的一种细胞。 探索一种非标记的技术方法鉴别不同分化阶段造血细胞具有重要的科研和实践意义。 拉曼光谱技术可用于多种类型疾病的鉴别诊断研究, 近年来应用前景愈加广阔。 实验研究人胚胎干细胞系（ES）、 急性早幼粒细胞白血病细胞系（NB4）和急性早幼粒细胞白血病患者（M3）白血病细胞的拉曼光谱特征, 建立拉曼光谱非标记鉴别不同分化阶段白血病的方法, 为临床实验研究提供基础。 分别收集胚胎干细胞系（ES）、 急性早幼粒细胞白血病细胞系(NB4)和4例M3患者白血病细胞, 使用Horiba Xplora拉曼光谱仪获取拉曼光谱, 每组或每例患者采集25～30个白血病细胞光谱。 结合应用主成分分析法(PCA)、 判别函数分析(DFA)、 系统聚类分析和偏最小二乘判别分析（PLS-DA）, 对三类细胞的光谱进行分析并建立模型, 进而对三类细胞进行鉴别, 应用交互验证法对模型进行验证。 同时结合细胞超微结构分析三种细胞的拉曼光谱特征。 M3, NB4和ES细胞的拉曼光谱差别显著, 主要表现为M3和NB4细胞光谱中对应核酸、 蛋白质及脂类物质的谱峰明显高于ES细胞, 其生物学机制包含了APL与PI3K/Akt/mTOR通路的密切关系。 PI3K/Akt/mTOR通路在急性早幼粒细胞白血病细胞中存在异常激活, 影响白血病细胞的生物大分子代谢； 鉴别建模的总体分类准确率达100%(181/181), 交互验证的分类准确率达98.9%(179/181), 表明鉴别模型预测能力良好。 拉曼光谱分析显示M3细胞和NB4细胞增殖代谢明显高于ES细胞, 根据PCA-DFA、 聚类分析及PLS-DA建立的拉曼光谱鉴别模型能够准确区分3种不同分化阶段白血病相关细胞, 其结果与电镜结果相符。

本文研究了核壳结构CdS-TiO2纳米颗粒光对HL60细胞光催化灭活作用, 并初步探讨了CdS量子点增强TiO2光催化灭活效率的作用机理。实验利用超声法制备了核壳结构CdS-TiO2纳米颗粒, 使用CCK-8法检测了其对白血病HL60细胞的光催化灭活效果, 并采用活性氧分析和荧光发光光谱等分析手段对CdS量子点增强TiO2光催化灭活效率的作用机理进行了分析。细胞实验结果表明, 在暗室条件下, 随着CdS包裹的TiO2外壳的增厚, 细胞的暗室存活率从28.5%逐渐上升至80%; 在可见光照下, 细胞的存活率显著下降。CdS-TiO2纳米颗粒对HL60细胞的光催化灭活率均超过60%, 其中CdS-TiO2样品0.6对HL60细胞的光催化灭活效率最高, 达到95%。根据荧光光谱和活性氧含量分析的结果推测, 这可能是由于核壳结构的CdS内核与TiO2外壳之间产生了有效的电子转移, 抑制了TiO2的空穴电子的复合, 增强了TiO2外壳的光催化活性, 最终增加了TiO2对HL60细胞的PDT灭活效果。

目的:通过观察高迁移率族蛋白1(HMGB1)、转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)及血红素加氧酶1(HO-1)基因沉默对白血病化疗耐药细胞(K562/A02细胞株)的影响, 探讨该信号通路在白血病化疗耐药中的作用及其可能机制。方法:将HMGB1基因、Nrf2基因及HO-1基因的特异性干扰RNA分别转染阿霉素耐药细胞株K562/A02, 荧光实时定量(RT-PCR)方法检测HMGB1、Nrf2及HO-1的mRNA表达水平, Western blot方法检测HMGB1、Nrf2及HO-1的蛋白表达水平, 免疫荧光方法检测Nrf2的蛋白表达, 并使用CCK-8方法检测转染前后K562/A02细胞株的细胞活性。结果:HMGB1基因、Nrf2基因或HO-1基因沉默的K562/A02细胞活性皆显著低于对照组及空白组(P<0.05), 化疗敏感性恢复。结论:HMGB1高表达导致了白血病细胞株K562/A02对阿霉素的化疗耐药, Nrf2/HO-1信号通路参与了HMGB1诱导的K562/A02细胞的化疗耐药, 其表达上调可恢复K562/A02细胞对阿霉素的敏感性。

为研究TiO₂和CdTe量子点间荧光共振能量转移效率对PDT体外灭活HL60细胞的影响，本文以发射波长为407.8 nm的TiO₂为供体，CdTe为受体，通过TiO₂与CdTe超声混合构建荧光共振能量转移体系，研究了TiO₂和CdTe量子点间荧光共振能量转移；其中体系中TiO₂浓度为200 μg/mL时，通过逐渐增加体系中CdTe浓度来观察供体TiO₂荧光强度变化，根据Forster能量共振转移理论计算体系能量转移效率。之后将体系用于PDT体外灭活HL60细胞的实验研究，采用CCK- 8 法，结合酶联免疫检测仪进行细胞活性检测，得出不同浓度下体系的PDT灭活效率。发现当TiO₂-CdTe体系荧光共振能量转移效率20.21%时，PDT灭活效率为53.75%，而当体系能量转移效率为6.77%时，灭活效率达到了71.54%，实验表明在一定浓度范围内，TiO₂-CdTe混合体系荧光共振能量转移效率低时，PDT灭活效率更高。这可能是由于TiO₂-CdTe之间能量共振转移低时，容易致使TiO₂表面光生电子和空穴复合率降低，提高了二氧化钛的光催化活性，导致灭活效率增高。

光漂白是光动力疗法(Photodynamic therapy, PDT)中的一个伴随过程, 其存在会影响光敏剂的光敏性能并消耗光敏剂。初步探讨了基于量子点CdSe的光动力疗法中两次给药的问题、给药最佳时间间隔、二次给药的最佳作用参数及正常的与药物处理过的白血病HL60细胞表面的超微结构变化。实验表明, 一次给药在量子点浓度为1.0 μmol/L且18 J/cm2的光剂量作用下, PDT效率达到61.0%; 经过48 h后, 进行二次给药, 在量子点浓度为0.75 μmol/L, 18 J/cm2光剂量作用下, PDT效率达到了72.1%, 较一次给药有了较大幅度提升; 扫描电子显微镜(SEM)观察药物作用前后的白血病HL60细胞表面超微结构, 结果显示, 细胞表面发生了一些显著的变化, 由此推测细胞膜可能是量子点CdSe介导的光动力疗法(CdSe-PDT)灭活白血病HL60细胞的一个重要突破口; 最后对量子点CdSe光致毒性的机制进行了初步探讨。

目的: 研究湖南汉族人群MICB等位基因的多态性与白血病的相关性。方法: MICB等位基因分型用PCR-SSP和PCR-SBT的方法。结果: 白血病患者中有13种MICB等位基因被检测出, 其中MICB*005: 02/010基因频率较对照组显著偏低(OR=0.416, P<0.05)。不同类别白血病之间MICB等位基因多态性没有显著差异。结论: MICB*005: 02/010等位基因可能与白血病的保护相关。

本研究拟通过小分子化合物氯化钴(CoCl2)模拟的低氧环境, 探讨雷帕霉素(RPM)对该低氧下人急性髓细胞白血病HL-60细胞的生物学行为的影响。低氧模拟组、低氧雷帕霉素处理组、常氧雷帕霉素处理组HL-60细胞分别采用CoCl2、CoCl2/ RPM、RPM进行处理, 对照组为常氧下常规培养的HL-60细胞, 处理及培养24 h、48 h、72 h后收集细胞, 采用倒置相差显微镜观察细胞生长状况, 常规瑞氏染色后光学显微镜下观察细胞形态; MTT比色法检测各组细胞的活性和增殖能力; Annexin V-FITC/PI 双染法流式细胞术检测细胞凋亡。结果表明, 与对照组细胞形态规则, 胞核呈圆形或椭圆形相比, 低氧模拟组和低氧雷帕霉素处理组细胞密度降低, 生长明显受抑, 细胞胞核呈不规则形或杆状, 染色质粗糙, 伴扭曲折叠等变化。各组间不同时间细胞增殖抑制率差异显著(P<0.05), 低氧模拟组和低氧雷帕霉素处理组增殖抑制率随着处理时间延长而增大, 且低氧雷帕霉素处理组的增殖抑制率大于低氧模拟组。与常氧下的对照组及雷帕霉素处理组比较, 低氧的模拟组和雷帕霉素处理组诱导细胞发生较明显的凋亡, 且后期72 h低氧雷帕霉素处理组凋亡率显著高于模拟低氧处理组。以上结果表明, 模拟低氧环境下, HL-60细胞生长明显受抑制, 且诱导细胞凋亡; 雷帕霉素可增强对低氧对细胞的生长抑制和诱导凋亡作用。