基于羧基量子点的荧光猝灭效应,提出了一种检测神经生长因子(NGF)的新方法。研究结果表明,在pH7.5的缓冲溶液中,NGF抗原与羧基量子点标记的NGF抗体发生特异性结合,能使羧基量子点的荧光发生猝灭。在1~20 ng·mL ^-1范围内,荧光猝灭程度与NGF抗原质量浓度呈良好的线性关系,线性系数为0.9696,检测下限为1 ng·mL ^-1。所提检测方法具有良好的抗干扰特性,在诊断检测方面具有巨大的应用潜力。

为探讨神经生长因子(Nerve growth factor, NGF)在雄鸡睾丸组织中的表达情况。分别取20 w、24 w、28 w、35 w龄雄鸡睾丸组织, 一部分经冻存处理后采用Trizol试剂提取Total RNA。根据GenBank中已公布的原鸡NGF基因序列, 利用Primer 5.0设计合成特异性引物, 通过两步法RT-PCR扩增出NGF基因片段, 然后利用实时荧光定量PCR以β-actin为内参基因进行相对定量分析。另一部分经冻存处理后用RIPA组织裂解液提取总蛋白进行Western blot分析。结果显示两步法RT-PCR扩增出的NGF基因片段经电泳检测为219 bp, 符合预期片段大小, 与GenBank中登录的鸡NGF基因比对, 同源性达99%; NGF基因在不同周龄雄鸡睾丸组织中的mRNA表达水平表现为: 性成熟发育期(20 w-28 w)雄鸡睾丸组织NGF mRNA的表达量随鸡龄的增加呈上升趋势, 且28 w达到高峰, 成年期(35 w)有所下降。Western blot检测到NGF的蛋白表达量随各发育阶段呈增加趋势, 在20 w龄前, 蛋白表达量处于较低水平, 在进入睾丸迅速发育期 (20 w-28 w) 后, 表达量大幅度增加, 在35 w基本达到峰值。提示 NGF mRNA 的表达随着睾丸组织的发生、发育呈现一定的变化规律, 且NGF在睾丸组织的发育及精子的发生等阶段起到重要的调节作用, 从而为后续研究NGF在禽类生殖系统中的作用提供一定的理论依据。