1 解放军总医院第五医学中心肿瘤医学部肿瘤内科，北京 100071
2 解放军医学院，北京 100853
近红外光免疫治疗（NIR-PIT）是一种结合抗体和光吸收剂IRDye700DX的新型肿瘤疗法，它既能够激活局部免疫效应，又能够增强肿瘤靶向性，已在不同肿瘤类型的治疗中显示出巨大的应用潜力。大量研究已经证实肿瘤微环境是导致肿瘤不断发展的重要原因，因此NIR-PIT中的光免疫偶联物靶点也已经扩展至肿瘤微环境中非肿瘤细胞的表面蛋白中。利用NIR-PIT局部消除肿瘤微环境中某些具有特定标志物的免疫抑制细胞、血管或肿瘤成纤维细胞，将解除免疫抑制，最大效率发挥机体的正常免疫功能，取得最佳的疗效。主要综述了NIR-PIT的治疗策略和靶向肿瘤微环境的最新研究进展。
医用光学 恶性肿瘤 近红外光免疫疗法 抗体-光吸收剂偶联物 免疫治疗 近红外光
1 1.中国科学院 上海硅酸盐研究所, 高性能陶瓷与超微结构国家重点实验室, 上海 200050
2 2.中国科学院大学 材料科学与光电技术学院, 北京 100049
3 3.上海交通大学 医学院附属仁济医院, 上海市肿瘤研究所 癌基因与相关基因国家重点实验室, 上海 200032
4 4.上海市疾病预防控制中心, 上海 200336
新型冠状病毒肺炎(Corona Virus Disease 2019, COVID-19)疫情大流行引起全球对此重大突发公共卫生事件的高度关注。新型冠状病毒(SARS-CoV-2)经过多次突变, 出现传染速度加快、免疫逃逸、隐匿性传播等特性, 令防控形势至今仍异常严峻。对患者的早发现、早隔离仍然是目前最有效的防控措施。因此, 迫切需要快速、高灵敏的检测手段来甄别此病毒, 以便及早识别感染者。本文简要介绍了SARS-CoV-2的一般特征, 并针对核酸、抗体、抗原及病原体作为检测靶标的不同检测手段及最新进展进行分类概述; 对一些光学、电学、磁学以及可视化的新型纳米传感器在SARS-CoV-2检测技术上的应用进行了分析。鉴于纳米技术的应用在提高检测灵敏度、特异性以及准确率上具有优势, 本文详细介绍了新型纳米传感器在SARS-CoV-2检测中的研究进展, 包括表面增强拉曼基生物传感器、电化学生物传感器、磁纳米生物传感器以及比色生物传感器等, 并探讨了纳米材料在新型生物传感器构建中的作用和挑战, 为纳米材料研究人员开发各种类型的冠状病毒传感技术提供思路。
SARS-CoV-2 检测方法 核酸 抗体 抗原 纳米材料 生物传感器 综述 SARS-CoV-2 detection method nucleic acid antibody antigen nanomaterial biosensor review
1 太原科技大学, 山西省精密测量与在线检测装备工程研究中心, 应用科学学院, 山西 太原 030024
2 山西瑞豪生物科技有限公司, 山西 太原 030025
目前, 核酸检测已成为了我国新型冠状病毒感染确诊的“金标准”, 然而核酸检测在检测过程中受到病程、 标本采集、 检测过程、 检测试剂等因素的影响, 容易出现检测结果“假阴性”而漏诊的情况。 检测血清中的新型冠状病毒特异性IgM和IgG抗体已作为新冠病毒检测的辅助手段, 可以用来弥补核酸检测的“假阴性”短板, 提高检测阳性率。 论文介绍了一种成本低的便携式新冠IgM和IgG抗体定量检测仪。 检测仪由CPU信号处理模块、 光源驱动模块、 多光谱探测模块、 电源模块、 显示存储和通信模块等组成。 采用荧光免疫层析技术使待测样本中的IgM和IgG抗体与量子点相结合, 并将其截留在试纸条的T线。 方波调制后的光源驱动模块驱动紫外LED, 其出射紫外光通过一种屋脊形的光学系统垂直照射在免疫荧光层析试纸条的T线和C线上, 量子点标记物被光源激发辐射出红色荧光, 红色荧光透过窄带滤光片后被多光谱探测模块所捕获； 多光谱信号在CPU中进行FFT变换得到其频谱特征量, 利用信号波段和参考波段的特征量的比值进行归一化处理消除背景和环境干扰信号计算得到荧光强度, 根据标定系数, 从而确定IgM和IgG抗体的含量。 最终检测结果显示到UI界面上同时上传到服务器数据库中, 可通过计算机端进行远程查询实现数据共享和信息化管理。 采用正常人血清样本作为测量试剂, 进行了重复性实验, 实验表明, CV值在0～8.30%之间, 其中T线的CV值仅为3.45%。 将含有IgG与IgM抗体的溶液, 利用梯度稀释法得到一系列不同质量浓度的样品溶液进行线性度实验, 采用线性度最小二乘法对检测结果进行曲线拟合, 拟合系数为0.997 5。 最后, 通过新冠疫苗血清抗体检测的实验表明, 检测仪的阳性检出率为75%。 该检测仪结构精巧、 功耗低、 操作简便、 性能良好, 可作为辅助手段有效提高新型冠状病毒感染的阳性检出率。
新型冠状病毒 多光谱探测 光谱分析 量子点 抗体定量检测 SARS-Cov-2 Multi-spectral detection Spectral analysis Quantum dots Antibody quantitative detection 光谱学与光谱分析
2023, 43(4): 1012
1 南京中医药大学附属医院 核医学科 南京 210029
2 东南大学 临床医学院 南京 210009
为了研究131I标记贝伐单抗偶联载紫杉醇超顺磁性氧化铁纳米粒（131I - Bevacizumab - Paclitaxel -Superparamagnetic Iron Oxide Nanoparticles，131I-BEV-PTX-SPIONs）的制备和生物学分布。将30只成瘤裸鼠分为单靶向组及双靶向组，再按时间点2 h、6 h、12 h、24 h及48 h分为5个亚组，每亚组各3只，尾静脉注射131I-BEV-PTX-SPIONs后，进行生物学分布及单光子发射计算机断层成像术（Single-Photon Emission Computed Tomography，SPECT）显像。131I-BEV-PTX-SPIONs的粒径约220 nm，分散性尚可；131I标记率为81.4%；放射性化学纯度（Radiochemical Purity，RCP）＞99%；在PB缓冲液中稳定性良好；在体外PTX（Paclitaxel）缓释性能良好；与A549细胞有较好的亲和力。体内生物学分布结果：随着时间的延长，肿瘤组织的放射性计数相对增高，12 h达高峰；T/NT（Target to Nontarget）比值逐渐升高，48 h达7.80±0.50。6 h、12 h、24 h、48 h时，双靶向组的肿瘤组织放射性计数及T/NT比值均高于单靶向组，差异均具有统计学意义（P<0.05），且差异性随着时间延长越来越显著。SPECT显像结果：2 h肿瘤部位即有放射性聚集，且随着时间的延长，放射性聚集增加并持续稳定，T/NT比值持续上升。初步研究结果显示，131I-BEV-PTX-SPIONs具有用于肺癌诊疗的潜质，值得进一步研究。
超顺磁性氧化铁纳米粒 紫杉醇 核素131I 贝伐抗体 荷瘤裸鼠 肺癌 Superparamagnetic iron oxide nanoparticles Paclitaxel 131I Bevacizumab Tumor bearing nude mice Lung cancer
1 湖南师范大学医学院, 长沙 410013
2 湖南师范大学免疫诊断试剂湖南省工程研究中心, 长沙 410013
3 湖南师范大学附属第一医院(湖南省人民医院)临床检验科, 长沙 410005
4 湖南省株洲市妇幼保健院产科, 株洲 412008
用KLH偶联合成细胞角蛋白7(CK7)优势表位多肽片段(C14)免疫小鼠, 经细胞融合技术制备CK7单克隆抗体(mAb), 并收集临床组织进行免疫组化鉴定。C14多肽作为抗原具有良好的免疫反应性。本研究共获得了3株能稳定分泌抗CK7抗体的单克隆细胞株, 选择亲和力较好的7A8单克隆抗体进行免疫组化鉴定, 结果表明, 本研究筛选的7A8单克隆抗体的质量浓度为0.49 μg/mL时, 与收集的临床标本均有良好的特异性反应, 低于医院常用CK7检测试剂盒中抗体质量浓度2～5?μg/mL, 表现出较高的灵敏度。本研究筛选的7A8单克隆抗体为研发CK7快速诊断试剂提供了关键的原材料。
细胞角蛋白7(CK7) 免疫组化 单克隆抗体(mAb) 免疫反应性 检测试剂盒 cytokeratin 7 (CK7) immunohistochemistry monoclonal antibodies (mAbs) immunoreactivity detection kit
1 吉林大学化学学院超分子结构与材料国家重点实验室，吉林 长春 130012
2 吉林大学药学院，吉林 长春 130021
3 中国科学院长春光学精密机械与物理研究所应用光学国家重点实验室，吉林 长春 130033
4 吉林大学物理学院，吉林 长春 130012
5 吉林大学化学学院理论化学研究所，吉林 长春 130012
基于双输出皮秒脉冲激光器和激光扫描显微镜平台，构建了一套可实现双光子和多种四波混频（FWM）效应的多模式成像系统，可实现光谱采集和良好的成像功能。等离激元材料可以提高FWM信号，在FWM成像下具有超高的成像对比度。以5 nm金纳米粒子作为成像探针，利用等离激元增强FWM成像追踪了其在小鼠肝脏和肾脏组织内的代谢残留。该研究为体内蛋白类药物的代谢评价应用提供可能。
激光与光电子学进展
2022, 59(6): 0617024
湖南师范大学生命科学学院心脏发育研究中心, 长沙 410081
黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)的心脏发育调控基因与人类的相关基因具有高度同源性。Lbe基因是果蝇心脏发育的重要调控基因。为了深入研究Lbe基因在心脏发育中的调控功能, 采用DNA免疫技术制备了抗果蝇Lbe蛋白的多克隆抗体。通过PCR扩增Lbe基因序列, 将该序列与真核表达载体pCAGGS-P7同源重组, 以该同源重组载体免疫4周龄小鼠, 获得含有抗Lbe多克隆抗体的血清。蛋白质印迹(Western blot)和胚胎抗体染色结果表明, 该抗体的特异性较好。该抗体为随后的Lbe功能的研究奠定了基础。
果蝇 心脏发育 DNA免疫 多克隆抗体 Drosophila heart development Ladybird early Lbe DNA immunization polyclonal antibody
1 上海理工大学 上海市介入医疗器械工程研究中心, 上海 200093
2 上海萨迦生物科技有限公司, 上海 201203
肝癌的发病率和死亡率逐年上升, 寻找提高肝癌早期筛查和诊断的有效方法是降低死亡率的重要途径, 通过定量检测血清中甲胎蛋白( AFP)是实现肝癌早期筛查和诊断的重要辅助手段。常用的AFP检测方法具有成本高、检测时间长、不适于大规模人群的筛查等缺点, 本文采用基于激光共聚焦原理的生物芯片扫描仪和近红外荧光标记抗体芯片相结合的方法, 实现AFP的定量检测, 并与常用的罗氏电化学发光免疫分析方法检测患者样本中AFP含量进行比较, 结果表明, 二者之间具有高度相关性。
近红外荧光标记 抗体芯片 共聚焦 定量检测 Near-infrared fluorescent labeling antibody chip AFP AFP confocal quantitative detection
湖南师范大学生命科学学院心脏发育研究中心, 长沙 410081
研究果蝇的心脏发育基因表达调控机制, 其相应靶点的抗体必不可少。但目前市场上缺乏此类商用抗体, 因此本研究选择果蝇心脏发育中的标记基因Svp(Seven-up), 并采用DNA免疫技术来快速制备其抗体。首先通过聚合酶链式反应(PCR)扩增出Svp基因编码区部分序列, 然后将其连接到真核表达载体pCAGGS-P7上, 再将重组质粒pCAGGS-P7-Svp直接注射进小鼠体内, 使外源基因在活体内表达, 产生的抗原激活了小鼠的特异性细胞免疫和体液免疫, 从而分泌相应的抗体, 取小鼠的血清收集获得抗体。最后用蛋白质印迹(Western blot)和胚胎免疫荧光技术检测Svp抗体的效价和特异性。结果表明, 制备的Svp多克隆抗体具有高效价和特异性, 为后续的果蝇心脏发育研究奠定了基础。
果蝇 心脏发育 DNA疫苗 多克隆抗体 Svp Svp Drosophila cardiac development DNA vaccine polyclonal antibody
1 湖南省免疫诊断试剂工程研究中心, 长沙410006
2 湖南师范大学医学院, 长沙410006
3 湖南师范大学医学院, 长沙410006,
人巨细胞病毒(HCMV)是全球范围内普遍感染的一种疱疹病毒, 也是引起胎儿先天性畸形和器官移植受者死亡最常见的病原体。有研究表明,gH蛋白是HCMV主要的中和性抗原, 特异性抗gH抗体具有中和HCMV及阻断病毒在细胞间传播的潜力。本研究以含人巨细胞病毒临床株Toledo全基因组的细菌人工染色体(BAC)为模板, 扩增去除信号肽和跨膜区的gH基因片段, 并将其插入表达载体构建pET32a′-gH重组表达质粒, 将序列鉴定正确的重组质粒转化进入表达菌株TransB, 诱导重组蛋白表达。用纯化的重组gH蛋白免疫8周龄BALB/c雄鼠, 经杂交瘤技术获得5株稳定分泌抗gH单克隆抗体的细胞株, 分别命名为8A9、8B4、8C4、8D9、8D12。所获5株单克隆抗体对gH蛋白均具有良好的反应性, 其中8A9、8B4、8D9和8D12具有一定的病毒捕获能力, 且8D9和8D12的捕获能力较强。本研究获得了具有自主知识产权的抗gH单克隆抗体, 抗体具有良好的病毒捕获能力。在此基础上, 我们将进一步鉴定其是否为中和抗体, 为今后开发治疗HCMV感染的中和抗体奠定基础。
人巨细胞病毒 gH糖蛋白 单克隆抗体 病毒捕获 human cytomegalovirus gH protein monoclonal antibody virus capture
