1 华中科技大学-武汉光电国家研究中心, Britton Chance生物医学光子学研究中心, 湖北 武汉 430074
2 华中科技大学工程科学学院, 生物医学光子学教育部重点实验室, 生物医学工程协同创新中心, 湖北 武汉 430074
生物组织的黏性和弹性在许多疾病发生和发展的过程中会发生改变，因此检测生物组织黏弹性对疾病诊疗具有重要意义。基于此，介绍了基于激光散斑技术的生物组织黏弹性测量方法。从弹性波调制下的激光散斑衬比变化，布朗运动下的光强自相关函数和低频交变应力作用下的散斑位移3个方面，分别介绍生物组织黏弹性激光散斑检测的理论基础和研究现状。
生物医学 黏弹性 激光散斑 光学检测 生物组织
1 华中科技大学生物医学光子学教育部重点实验室,武汉光电国家实验室
2 筹湖北,武汉,430074
β淀粉样肽(amyloid β-peptide,Aβ)在阿尔茨海默病(Alzheimeir's disease,AD)患者脑内的异常产生和积累在AD的发病机理中扮演着重要的角色.β-分泌酶对淀粉样前体蛋白的裂解是Aβ产生的关键步骤,因此抑制β-分泌酶的活性成为AD药物治疗的一个重要策略.为了检测β-分泌酶的活性,应用基因工程技术将β-分泌酶作用底物序列(NFEV)的两端分别与绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的颜色突变体一青色荧光蛋白(cyan fluorescent protein,CFP)和黄色荧光蛋白(yellow fluorescent protein,YFP)相连,构建了一个基于GFP的荧光能量共振转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)探针.荧光光谱分析结果显示,该荧光融合蛋白中CFP和YFP之间存在着较强的FRET.而当与β-分泌酶进行孵育后,FRET逐步降低,证明该探针能被β-分泌酶酶切.SDS-PAGE分析显示探针与β-分泌酶孵育后,荧光融合蛋白由60 kD大小逐渐变成30kD大小的蛋白,表明探针被β-分泌酶酶切成CFP和YFP分子,证实了荧光光谱的结果.这些结果表明,可通过检测探针的FRET效率方便地分析β-分泌酶的活性,为进一步筛选β-分泌酶的抑制剂提供了一个平台.
阿尔茨海默病 β-分泌酶 荧光能量共振转移 绿色荧光蛋白
华中科技大学生物医学光子学教育部重点实验室, 武汉 430074
介绍了在体观测肿瘤内注射吲哚氰绿(ICG),一种激光吸收染剂前后X射线衰减的实验结果。实验采用已种植两周的骨髓瘤细胞(SP2/0),质量为15～20 g的BALB/c小鼠作为动物模型,采用数字X射线成像系统作为监测药物在肿瘤内扩散的机制。系统工作在33 kVp,0.3 mA下,曝光时间4 s,采用1.5×放大倍率。实验研究的是通过灰度值反应出不同区域的X射线衰减,和周围正常组织和图像中没有物体的背景区域相比较,注射ICG前后肿瘤内的灰度值发生了明显的变化。实验证明,使用数字X射线成像系统能够动态、有效、非侵入地监测ICG在肿瘤组织内的扩散,从而达到优化治疗结果的作用。
X射线光学 在体监测 X射线衰减 数字X射线成像 吲哚氰绿
华中科技大学生物医学光子学教育部重点实验室,中国湖北,武汉,430074
利用电穿孔技术将gfp表达质粒转染于SP2/0细胞,通过G418筛选获得稳定表达GFP的小鼠骨髓瘤细胞株SP2/0-GFP细胞.将稳定的转化细胞移植于同系BALB/c小鼠后腿、耳部皮下及腹腔成瘤,每隔一天对小鼠肿瘤成像,跟踪肿瘤的生长过程.结果表明,探测到的GFP荧光强度和发光范围与肿瘤的生长或消亡相关,从而证明可以利用GFP作为肿瘤细胞的标记,结合光学成像技术,对肿?錾す淌凳弊纷?
绿色荧光蛋白(GFP) 电穿孔 肿瘤 在体光学成像 GFP electroporation tumor in vivo optical imaging
