目的: 探讨 ALA-PDT抑制角质形成细胞(KC)增殖的可行性和最佳效果。方法: 新鲜包皮组织经两次酶消化法进行KC分离与培养, 分设对照组、单纯ALA组、单纯照光组及0.1 mmol/L、0.6 mmol/L、1.2 mmol/L、1.8 mmol/L、3.6 mmol/L ALA五个浓度组, 经0.5 h、1 h、3 h、5 h四个避光孵育时间后PDT。酶标仪检测PDT后KC存活率、FCM检测KC中PpⅨ荧光强度, 确定ALA最佳药物浓度和最佳用药时间; 吖啶橙染色和Annexin V/PI双染法检测KC凋亡率和生长周期的影响。结果: 0.6 mmol/L ALA(用药1 h)-PDT组为最佳药物浓度和最佳用药孵育时间, 显示PpⅨ荧光强度表达与KC凋亡率最高, 能明显抑制S期与G2期的细胞增殖, 使细胞增殖指数降至最低。结论: 0.6 mmol/L ALA(用药孵育1 h)-PDT能明显抑制KC增殖, 更有效地促进正常KC凋亡。

目的：本文通过不同浓度的ALA与不同用药时间对体外培养的人角质形成细胞(KC)PDT的生物效应研究，观察PpⅨ荧光强度及KC凋亡和生长周期的影响，优化ALA最佳药物浓度和用药时间，探讨ALA-PDT抑制银屑病KC异常增生的可行性和最佳效果。方法：将新鲜包皮组织经两次酶消化法进行KC分离与培养，分设KC对照组、单纯ALA组、单纯照光组及0.1、0.6、1.2、1.8、3.6mmol/L ALA五个浓度组，经0.5、1、3、5h四个避光孵育时间后PDT。FCM、酶标仪、荧光显微镜检测KC中PpⅨ荧光强度，确定ALA最佳药物浓度和最佳用药时间；Hoechst33342 / PI双染法和Annexin V / PI双染法检测KC凋亡率和对生长周期的影响。结果： 0.6mmol/L ALA(用药1h)-PDT组为最佳药物浓度和最佳用药时间， 显示PpⅨ荧光强度表达与KC凋亡率最高，能明显抑制S期与G2期的细胞增值，使细胞增殖指数降为最低，与其他各组相比差异显著(P<0.05)。结论： 0.6mmol/L ALA(用药1h)-PDT能明显抑制KC增殖，优化后的ALA-PDT更迅速有效地促进人KC凋亡。