目的：通过采用局部不同封包时间的 ALA-PDT治疗豚鼠耳背部寻常型银屑病模型, 研究其生物效应并优化治疗参数。方法：豚鼠耳背部涂抹心得安建立寻常型银屑病模型；荧光分光光度计分别检测皮损经 ALA封包 1、3、15h后组织中 PpIX的含量；肉眼观察各组皮损治疗后不同时间段的愈合情况, HE染色观察组织病理学改变, 免疫组化法染色观察表皮细胞增殖(PCNA)及 CD4+和 CD8+T淋巴细胞浸润情况。结果：皮损中 PpIX含量随 ALA封包时间的延长而升高, 15h组＞3h组＞1h组；封包后 PpIX的生成速率 3h组＞1h组＞15h组；皮损痊愈所需时间：15h组＜3h组＜1h组。皮损中的 PCNA、CD4+及 CD8+阳性表达率：15h组＜3h组＜1h组。结论：局部 ALA-PDT治疗豚鼠耳背部寻常型银屑病模型有显著疗效。ALA封包时间的长短与局部皮损中 PpIX生成量成正相关；与皮损痊愈所需的时间成负相关；3h组 PpIX生成速率最快且无副作用, 为最佳封包时间。ALA-PDT可抑制表皮细胞的过度增殖, 减少 CD4+CD8+T淋巴细胞的浸润, 其作用效果与 ALA封包时间成正相关。

目的: 探讨 ALA-PDT抑制角质形成细胞(KC)增殖的可行性和最佳效果。方法: 新鲜包皮组织经两次酶消化法进行KC分离与培养, 分设对照组、单纯ALA组、单纯照光组及0.1 mmol/L、0.6 mmol/L、1.2 mmol/L、1.8 mmol/L、3.6 mmol/L ALA五个浓度组, 经0.5 h、1 h、3 h、5 h四个避光孵育时间后PDT。酶标仪检测PDT后KC存活率、FCM检测KC中PpⅨ荧光强度, 确定ALA最佳药物浓度和最佳用药时间; 吖啶橙染色和Annexin V/PI双染法检测KC凋亡率和生长周期的影响。结果: 0.6 mmol/L ALA(用药1 h)-PDT组为最佳药物浓度和最佳用药孵育时间, 显示PpⅨ荧光强度表达与KC凋亡率最高, 能明显抑制S期与G2期的细胞增殖, 使细胞增殖指数降至最低。结论: 0.6 mmol/L ALA(用药孵育1 h)-PDT能明显抑制KC增殖, 更有效地促进正常KC凋亡。

目的: 通过研究 ALA-PDT对体外培养的 PBMCs的生物效应，探讨 ALA-PDT对银屑病的免疫功能的影响、治疗的可行性及优化参数。方法: 将健康人及银屑病患者新鲜外周血分别进行 PBMCs分离与培养，分设空白对照组、单纯 ALA组、单纯照光组以及不同 ALA浓度与不同用药孵育时间组进行 PDT。Annexin V/PI双染法、MTT法检测 PBMCs存活率，以确定 ALA最佳药物浓度和最佳用药孵育时间；TEM观察 PBMCs细胞超微结构的变化；RT-PCR检测 PBMCs表达 Th1、Th2相关细胞因子的水平。结果: 0.6 mmol/L ALA避光孵育 1h后 PDT组 PBMCs存活率最低 (P＜0.05)；ALA-PDT后 PBMCs结构呈现典型凋亡改变；银屑病患者 PBMCs的 IFN-酌、TNF-琢 mRNA表达量与健康人相比显著升高，ALA-PDT后表达量显著下降、IL-4 mRNA表达量较健康人显著降低，经 ALA-PDT后显著升高(P约0.05)；IL-10mRNA表达量较健康人略有减低，经 ALA-PDT后有所升高，但无统计学意义。结论: 0.6 mmol/L ALA避光作孵育 1h后 PDT可明显促进 PBMCs凋亡，银屑病患者 PBMCs经 ALA-PDT后由 Th1优势应答向 Th1/Th2平衡方向转变。

目的：本文通过不同浓度的ALA与不同用药时间对体外培养的人角质形成细胞(KC)PDT的生物效应研究，观察PpⅨ荧光强度及KC凋亡和生长周期的影响，优化ALA最佳药物浓度和用药时间，探讨ALA-PDT抑制银屑病KC异常增生的可行性和最佳效果。方法：将新鲜包皮组织经两次酶消化法进行KC分离与培养，分设KC对照组、单纯ALA组、单纯照光组及0.1、0.6、1.2、1.8、3.6mmol/L ALA五个浓度组，经0.5、1、3、5h四个避光孵育时间后PDT。FCM、酶标仪、荧光显微镜检测KC中PpⅨ荧光强度，确定ALA最佳药物浓度和最佳用药时间；Hoechst33342 / PI双染法和Annexin V / PI双染法检测KC凋亡率和对生长周期的影响。结果： 0.6mmol/L ALA(用药1h)-PDT组为最佳药物浓度和最佳用药时间， 显示PpⅨ荧光强度表达与KC凋亡率最高，能明显抑制S期与G2期的细胞增值，使细胞增殖指数降为最低，与其他各组相比差异显著(P<0.05)。结论： 0.6mmol/L ALA(用药1h)-PDT能明显抑制KC增殖，优化后的ALA-PDT更迅速有效地促进人KC凋亡。

通过临床研究，ALA—PDT治疗顽固性银屑病作为光疗的一种新方法已获得肯定疗效。研究分析了ALA—PDT疗效与银屑病皮损厚度、皮肤温度、药物封包时间、给药浓度、治疗次数、光源波长、照光剂量与不良反应等相关因素的影响，论述其临床疗效的差异性并对其进行评估，为进一步优化治疗方案提供理论依据。

本文综述了ALA-PDT通过诱导T淋巴细胞的凋亡与损伤，抑制炎性细胞因子治疗银屑病的机制研究，以及不同浓度的ALA局部用药与不同照光剂量对银屑病临床疗效评估与影响。

局部外敷ALA和静脉注射小剂量HPD联合用药后进行激光光敏诊断和光动力学治疗,探讨这种联合用药光动力学疗法治疗皮肤恶性肿瘤的疗效。并与常规HPD-PDT及激光气化肿瘤合并ALA-PDT治疗作临床疗效对比。方法:30例患者,45处皮肤损害。采用ALA-PDT与小剂量HPD-PDT联合的方案进行治疗。光敏药物剂量:8%ALA 霜剂外敷,1.5mg/kg HPD静脉用药,波长630nm半导体激光照射(功率密度250mW/cm2,照射时间20分钟/光斑)。同时在PDT治疗过程中,及以后的随访中均以激光光敏诊断技术指导治疗及判断避光时间。并与常规HPD(5mg/kg)-PDT治疗皮肤恶性肿瘤43例及三周前激光气化肿瘤加20%ALA霜剂外敷光动力学治疗29例作疗效比较。结果:ALA联合小剂量HPD激光光动力学治疗组,除一例鳞癌II级患者及一例恶性黑色素瘤患者出现复发外,其余患者对联合治疗的效果均佳,随访6～24月,均获得了痊愈,近期痊愈率93.33%,显效率6.67%,皮肤避光时间减少到10～14天。HPD-PDT治疗皮肤恶性肿瘤组43例,40例达近期痊愈,近期痊愈率91.43%,3例显效,显效率8.57%(显效3例,2例为色素型基底细胞癌,1例为直肠癌肛周复发)。激光气化肿瘤加ALA-PDT治疗组29例,26例一次治疗痊愈,近期痊愈率89.66%,3例显效,显效率10.34%(显效3例,2例鳞癌II级经二次治疗痊愈,1例汗管癌7周复发改用手术治疗)。结论:1.ALA联合小剂量HPD的光动力学疗法对于诊断和治疗皮肤恶性肿瘤有较佳的疗效。两种光敏剂的联合使用,使皮肤避光时间由原来常规剂量HPD-PDT所必需的4~5周缩短到2周左右,并改善了ALA-PDT作用深度浅(2mm)的弊端。2.光敏诊断是一种简便、快捷、灵敏、非创伤性的肿瘤诊断方法,对于提高肿瘤的早期诊断率有很大意义,又能作为判断避光时间的辅助手段。3.光动力学治疗是一种对肿瘤组织杀伤具有高度选择性的微创技术,病人对整个治疗过程的耐受性好,更适合于年老体弱或对皮肤美观有特殊需求的患者。

目的:研究ALA、HPD及ALA联合HPD光动力学治疗C6胶质瘤细胞瘤基因P16及P53变化.方法:以不同剂量ALA(20μg/ml、40μg/ml、60μg/ml、80μg/ml、160μg/ml)、HPD(1μg/ml、2μg/ml、3μg/ml、4μg/ml、5μg/ml)及不同剂量组合ALA联合HPD光动力学治疗C6胶质瘤细胞,以流式细胞仪测试基因P16及基因P53的变化.结果:本实验中未作PDT治疗的对照组,肿瘤细胞生长良好,可见P16值小于6.59%.P53值小于4%.而PDT治疗组随着光敏剂剂量的加大P16及P53基因值逐渐上升,是未作PDT治疗组的3-4倍,且两光敏剂混合组,P16及P53基因值大于单纯ALA或HPD-PDT治疗组.HPD1μg/ml联合ALA60μg/ml,HPD2μg/ml联合ALA40μg/ml就能达到HPD5μg/ml PDT治疗组P16基因及P53基因水平.结论:推测PDT疗法激活了P16基因及p53基因功能,促使肿瘤细胞凋亡及坏死.联合疗法HPD1μg/ml联合ALA60μg/ml,HPD2μg/ml联合ALA40μg/ml光动力学治疗能达到HPD常规剂量5μg/ml PDT的效果,这样可明显提高ALA-PDT疗效及减少HPD-PDT的皮肤光毒反应.

目的:通过细胞学水平研究不同剂量ALA光动力学治疗对C6胶质瘤细胞细胞凋亡的影响.方法:以不同剂量的ALA(10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml、80μg/ml、160μg/ml)与C6胶质瘤细胞一起培养,随后以630nm半导体激光200mW/cm2,照射肿瘤细胞,照射20分钟,及与不用光敏剂单照激光、单用光敏剂不照光、不用光敏剂不照激光空白对照组比较.以流式细胞仪及倒置微镜、电镜观察促使肿瘤细胞凋亡或死亡的差别,寻找促使肿瘤细胞凋亡或死亡的最小合适剂量.结果:对照组没有细胞凋亡,ALA-PDT组随着剂量的增加细胞凋亡数增加.尤其晚期凋亡数明显增加,用药剂量增加至40μg/cc才能达到活细胞少于50%,即使剂量增加到160μg/cc,还是有19.7423的活细胞存在.结论:单纯用ALA激光PDT治疗不能达到完全将肿瘤细胞杀灭,ALA40mg/kg激光光动力学治疗才能得到明显的治疗效果.

目的:本研究主要观察相同条件的5-氨基乙酰丙酸的光动力疗法(ALA-PDT)对不同种类的白血病细胞株生存率的影响,以及细胞死亡类型的差异.方法: 选择5种白血病细胞(K562、HL60、U937、MOLT-4和6T-CEM)进行比较.用MTT法检测细胞的存活率,用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞不同死亡类型的比例.结果: 不同细胞对相同条件的ALA-PDT的敏感程度不同,依次为U937＜MOLT-4＜6T-CEM＜K562＜HL60,在ALA和光照共同作用下细胞的存活率明显低于单一因素作用引起的细胞存?盥?不同细胞的死亡类型不同,其中MOLT-4和U937细胞以早期凋亡为主,K562和HL60细胞以晚期凋亡为主,而6T-CEM细胞以坏死为主.结论: ALA-PDT能够灭活白血病细胞,不同种类的细胞对其敏感度不同.