光谱共焦显微技术研究进展
1 引言
1.1 概述
以电子信息、航空航天等为代表的高技术制造业是国民经济的先导产业,对培育我国国际竞争与合作新优势具有重要意义。在高技术制造业中,质量控制环节在保证产品质量和提高生产效率等方面发挥着至关重要的作用。光谱共焦显微技术是一种非接触式高精度测量技术,随着科技的快速进步,现已发展为各种形式的传感器,不断满足质量控制环节中提出的尺寸测量[1]、缺陷检测[2]和三维形貌扫描[3]等需求,部分应用如
图 1. 光谱共焦传感器应用。(a)工件内径测量;(b)面板间隙测量;(c)晶圆缺陷检测;(d)焊接质量检测
Fig. 1. Chromatic confocal sensor applications. (a) Measurement of the inner diameter of workpieces; (b) panel gap measurement; (c) wafer defect detection; (d) welding quality measurement
图 2. 部分商业级点光谱共焦传感器的性能参数范围
Fig. 2. Range of performance parameters for selected commercial grade spot chromatic confocal sensors
1.2 测量原理
1961年,Marvin Minsky发明了第一台共焦扫描显微镜[5]。其中,“共焦”指的是物体表面焦点和图像平面焦点间的共轭关系,即光学成像系统中的照明点和检测点具有相同的焦距。典型的点光谱共焦系统如
式中:
式中:
图 3. 点光谱共焦系统。(a)点光谱共焦系统原理图;(b)点光谱共焦系统结构图
Fig. 3. Schematic of point chromatic confocal system. (a) Schematic of the system principle; (b) structure of the system
在测量样品的三维轮廓时,点光谱共焦系统由于一次测量仅能得到单个测量点的轴向高度信息,还需要一个高速稳定的二维位移平台[7]。然而,平台的连续移动会产生如振动、定位误差等测量不确定性,严重影响测量结果。针对高检测速度或大检测物体的场景,学者们提出了移动焦点位置或增加每次测量点数等方法,同时通过改善光谱共焦测量系统的关键技术提高系统整体测量性能。
目前,国外对该领域的研究已经较为成熟,而国内相关研究较少,同时国内进行商业级光谱共焦传感器研发的企业虽逐年增多,但产品性能较国外产品仍存在一些差距。因此开展光谱共焦显微技术的综述工作具有一定的学术价值和应用价值。本文首先说明点光谱共焦系统的应用场景和基本原理;然后概括分析宽光谱光源、色散物镜、光谱信号检测及处理等核心技术;同时,论述光谱共焦测量技术的扫描方法;最后,总结光谱共焦测量技术的未来发展方向。
2 光谱共焦显微技术的发展现状
从功能上来说,光谱共焦系统主要由光源部分、共焦光学部分和光谱信号检测部分组成,它们共同决定了共焦扫描检测系统的性能[8]。为了提升整体的检测能力,学者们针对宽光谱光源、色散物镜和光谱信号处理算法等光谱共焦系统的关键技术展开研究。
2.1 宽光谱光源
宽光谱光源是影响共焦系统测量范围的首要因素,也决定了色散物镜的材料和光谱仪的类型,因此光源的选择至关重要。常见的宽光谱光源包括氙灯[9]、卤钨灯[10]、卤素灯[11]、白光LED[12-13]。其中氙灯、卤钨灯和卤素灯的光谱范围较大且分布均匀,但是照射效率低,工作温度较高,需要配备大体积的冷却装置,不利于系统集成和稳定。白光LED具有性能稳定、寿命长、易集成、价格低廉等优点,缺点是光谱带宽窄,限制轴向测量范围。
另外,Shi等[14]最先将飞秒激光耦合到光子晶体光纤中得到超连续光谱光源,不但将光谱范围拓展至350~1750 nm,也大幅提升了照射效率和信噪比,其光路如
图 4. 光谱共焦系统的光源。(a)超连续激光及其波长深度映射图[14];(b)SLD及其波长深度映射[18]
Fig. 4. Light source of chromatic confocal system. (a) Super-continuous laser and its wavelength depth mapping[14]; (b) SLD and its wavelength depth mapping[18]
因为高相干性和高稳定性,飞秒激光可以说是光谱共焦系统的理想光源,但是价格昂贵,光谱连续性较差;SLD具有均匀的光谱密度,虽然其光谱稳定性较差,可通过适当的信号处理和光学设计来改善。目前,白光LED以低成本、高稳定、易集成等优势广泛应用于光谱共焦的科研和商业领域。
图 5. 不同类型的宽光谱光源特性
Fig. 5. Characteristics of various types of broad spectrum light sources
2.2 色散物镜
色散物镜是光谱共焦系统的核心,其光学特性直接决定了系统的测量性能。例如色散物镜的放大倍数决定了系统的视场,数值孔径决定了系统的横向和轴向分辨率,光谱色散范围决定了系统的量程。国内外研究人员分别从理论分析和结构设计上进行了深入研究。早先,Novak等[19]提出了一种设计色散物镜的方法,描述了物镜的纵向色差与波长的线性关系。Zhang等[20]介绍了双胶合透镜的初始结构,并根据色散特性,将双胶合透镜分为L型和S型,推导出L型初始结构更适用于设计色散范围更大的物镜,S型初始结构适用于设计数值孔径较大的物镜。Chen等[21]建立了一个二维光谱信号模型,用于描述光谱共焦系统中的信号强度-波长-位移关系,利用该模型可以深入评估光谱信号,进而提高色散物镜的测量性能。Förster等[22]分别对折射透镜和折衍混合的双胶合透镜进行了系统研究,结果表明,在折射系统中,将阿贝数较低的材料和阿贝数较高的材料组合在一起能够获得较大的轴向色散。对于折衍混合系统,折射部分材料应采用尽可能小的阿贝数。Claus等[23]根据波动光学,探讨了色散物镜的像差和样品表面粗糙度对共焦信号的作用和影响,实验结果表明:色散物镜的像差会引起测量范围1%以上的误差;采用数值孔径NA较小的物镜检测样品形貌会增大系统噪声。并得到了消除噪声的NA约束条件,即
式中:
图 6. 具有不同NA值的物镜关于高度和粗糙度测量结果对比[23]。(a)高度测量结果对比;(b)粗糙度测量结果对比
Fig. 6. Comparison of objective lenses with different NA regarding height and roughness measurements[23]. (a) Comparison of measured height; (b) comparison of measured roughness
同时,国内许多学者[24-30]基于以上理论设计了各类线光谱共焦系统的色散物镜。吴雨晴[24]采用多重结构设计的色散物镜的线扫描宽度可达26 mm,但轴向测量范围仅为1.08 mm。刘若虚[25]利用棱镜和柱透镜进行色散共焦,实现了14.26 mm的视场范围和8.4 mm的扫描宽度。Huang等[29]利用逆向光路设计的色散物镜的线扫描宽度为16 mm,色散线性度优于0.9997。Chen等[30]采用双远心结构设计的色散物镜的视场宽度达到13.88 mm,虽然双远心结构能够提高色散物镜的精确性和稳定性,但是结构复杂,自主设计成本较高,不利于推广。单轴线光谱共焦色散物镜的技术指标对比如
表 1. 单轴线光谱共焦系统的色散物镜相应的横向空间分辨率、轴向空间分辨率、成像范围、线长、DARR和LLRR
Table 1. Lateral spatial resolution, axial spatial resolution, imaging range, line length, DARR, and LLRR of some dispersive objective lenses for single-axis line spectral confocal systems
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2.3 光谱信号检测
光谱共焦系统中,需要从样品表面反射的光谱信号中提取出最大光强及其对应的波长,进而由波长和深度的映射关系得到样品的形貌信息。所以,峰值波长定位算法对系统的测量结果准确性和稳定性有着重大影响。
峰值波长定位算法主要有两类。一种是拟合法,包括抛物线拟合[34]、高斯拟合[35]、Sinc拟合[36]等。拟合算法的精度较高,然而缺点是计算效率低,难以满足高速测量应用对效率的要求。Chen等[37]提出了一种从轴向响应信号中定位峰值的抛物线拟合算法,该算法与半峰全宽无关,比传统拟合算法的准确度提高了约40%,精度提高了10%。后来Chen等[38]又提出了一种补偿拟合差分算法,通过信号差分因子补偿了峰形不对称造成的定位误差。另一种是质心法,由Ruprecht等[39]最先提出,其在计算效率方面具有显著优势,但误差较大,结果波动严重,不适合用于要求高精度结果的系统。Bai等[40]提出了一种改进的质心峰值提取算法,阈值化前,在光谱信号的真实像素中插值若干虚拟像素,提高了稳定性,校准重复性为±0.3 µm,固定位置的标准偏差最佳值为0.009 µm,其算法原理如
图 8. 不同峰值定位算法下各位置的相对步进误差(2 μm步进)[42]
Fig. 8. Relative deviation of each position under different peak wavelength extraction algorithms (2 μm step)[42]
同时,许多学者从其他角度对峰值波长提取算法进行改进。Li等[43]提出了一种基于自适应模态分解的重叠峰值提取算法,用于厚度测量。Liu等[44]提出了一种基于移位、差分、线性拟合、零点和峰值缺省计算的峰值提取算法,与高斯拟合法相比,该算法大大提高了效率,可应用于实时线扫描共焦系统。还有学者将图像处理、机器学习等技术应用到共焦系统的峰值定位。Lu等[45]提出了基于mean-shift聚类理论的峰值定位算法,在保持较高精度的同时提高计算速度70倍以上,不同算法的峰值提取效果对比如
图 9. 不同算法峰值提取误差的期望值和标准差[45]
Fig. 9. Expectation value and standard deviation of the peak extraction errors of different algorithms[45]
表 2. 不同算法峰值提取误差的均方根期望值和标准差
Table 2. RMS expectation and RMS standard deviation of the peak extraction errors of different algorithms
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3 光谱共焦显微技术的扫描方法
光谱共焦显微系统的关键指标包括测量范围、分辨率、线性误差等,研究人员在光谱共焦测量系统的关键技术方面不断创新,大幅提高测量能力。而在实际应用中,检测效率也是非常重要的。高速的扫描和数据采集不但大大减少样品处理时间,有效提高工作效率,还有助于实时监测和及时干预,保证获取数据的可靠性和准确性。为此,学者们将共焦系统与振镜、声光偏转器等设备结合或利用柱透镜、光纤束、微透镜阵列等光学元件提出了多种扫描方法。目前,主要的扫描方法包括单点扫描共焦扫描方法、线光谱共焦扫描方法和并行共焦扫描方法[49]。
3.1 单点扫描共焦扫描方法
3.1.1 基于振镜的共焦扫描方法
振镜由于其设计机理与电流表的原理相似,又称为检流计式扫描振镜,包括伺服系统和反射镜两部分。通过伺服电机带动反射镜来回摆动,实现光束在物体表面上的三维扫描。振镜包括单轴和双轴两类,虽然双轴振镜可以进行二维扫描和定位,但稳定性、集成性、经济性都不如单轴振镜,因此在自动光学检测等实时系统[50-53]中,单轴振镜应用较为广泛。
精度高、控制性好和测量范围广是振镜扫描的优点,但是为了精确控制反射镜的转角,振镜的扫描频率不高。为了提高振镜的扫描速度,Yoo等[50]采用迭代学习控制(ILC)来控制振镜的快速扫描运动,其扫描速度可达412行/s,与商业扫描振镜相比,其均方根误差减少至1/73。Ito等[51]搭建了一个基于振镜的共焦位移传感器,通过无模型强化学习精确控制振镜,实现1 m/s的扫描速度。Mac等[52]开发了一种扩展景深的轴向线扫描共焦显微镜,利用一维振镜实现以20 frame/s的速率进行最大315 μm×315 μm×80 μm的立体扫描,使得生物检测过程中实时立体成像成为可能。Chen等[53]将线光源、成像模块与振镜集成,开发了一种新型线扫描光谱共焦探测器,其光路和系统结构如
图 10. 基于振镜的共焦扫描方法[53]。(a)原理图;(b)系统结构
Fig. 10. Confocal scanning microscopy based on galvanometer[53]. (a) Schematic of the principle; (b) system structure
3.1.2 基于声光偏转器的共焦扫描方法
上文提及的振镜是基于旋转反射镜的原理进行扫描的,属于机械扫描,存在机械惯性,扫描速度和稳定性都比较有限[54]。而声光偏转器(AOD)是基于声光效应的,能在不受机械惯性的情况下实现高速光偏转,扫描速度是传统振镜的10倍以上[55];并且,声光偏转器可以采用逐行模式对样品表面进行整体扫描,也可以只检测待测表面中的个别区域,减少检测时间。Szulzycki等[56]、Bansal等[57]、Duocastella等[33]将共焦系统与声光偏转器相结合,其扫描速率达到40 kHz以上,如
图 11. 基于声光偏转器的共焦扫描方法。(a)单独使用[56];(b)组合使用[58]
Fig. 11. Confocal scanning microscopy based on acousto-optic deflectors. (a) Used alone[56]; (b) used combined[58]
3.2 线光谱共焦扫描方法
线光谱共焦技术是点光谱共焦技术的延伸[27],可看作特殊的多点共焦扫描。将点光谱共焦系统中的针孔都置换为狭缝,光源通过狭缝形成线光源,可以看作无数个点光源的集合,线形光聚焦到待测样品表面,再被反射到线阵探测器上,配合一维位移平台就能实现快速三维检测。显然,线光谱共焦扫描有效提高了检测效率,对比点光谱共焦,相当于增加了一个扫描维度。但是,由于狭缝的尺寸远远大于针孔,杂散光的滤除能力较弱,这就导致在分辨能力方面,线光谱共焦系统表现较差。Han等[61]利用声光偏转器和线阵扫描相机构建的一个线扫描共焦系统,实现了60 frame/s扫描速度,远高于商用共焦显微镜的最大采集速度(<24 frame/s)。2005年,Im等[62]将扫描速度提升至191 frame/s。赵家旺等[63]将线扫描应用到共焦显微镜,利用柱面透镜产生线照明,利用振镜引导聚焦直线,与采集单点图像共焦显微镜相比,图像采集速度提高104倍。Hu等[64]开发了一种新型线扫描光谱共焦传感器,采用分光器件使面阵CMOS获得最大功率的光信号,配合高精度位移装置能够以90 frame/s的扫描速度,每秒32000点生成三维图像。
从结构上,线光谱共焦分为同轴和双轴两种形式,它们的系统结构如
图 12. 线光谱共焦扫描方法。(a)同轴线光谱共焦系统结构;(b)双轴线光谱共焦扫描系统结构
Fig. 12. Line chromatic confocal microscopy. (a) Coaxial chromatic confocal system structure; (b) biaxial chromatic confocal scanning system structure
3.3 并行共焦扫描方法
3.3.1 基于光纤束的共焦扫描方法
光纤束,是将许多长度一定、极细的光导纤维集合成束,两端按一一对应关系紧密排列而成[68-69]。作为传输光信号的一种光纤组合,光纤束能够将光源发出的光分束后形成光能均匀的点阵列光源来实现并行共焦光路,从而对待测样品进行多点同步检测,提高成像速度,其系统结构如
光源、光纤间的距离和光纤耦合都决定了光纤束传输光信号的效果,进而影响共焦系统的精度。Lane等[73]在光纤束共焦系统中引入空间光调制器来提高光利用率。马力等[74]根据光纤束共焦系统理论,结合抽样定理和光纤束中光纤的排列特点,得出光纤束的光纤间距与物镜的放大率决定了系统横向分辨率的结论。Vaishakh[75]利用高斯理论研究了相邻光纤间的耦合效应,发现增加光纤束参数D/R值后可以大大降低相邻光纤造成成像对比度低的影响,其中D是光纤束中相邻光纤的芯距,R为光纤束中一根光纤的纤芯半径。
3.3.2 基于微透镜阵列的共焦扫描方法
微透镜阵列是一种分光器件,能够分割光束并将其聚焦到指定的位置。微透镜阵列具有光能利用率高、阵列排列多样、视场范围较大等特点。微透镜阵列既可以与光源组合产生点列阵光源[76-78],又可以用作色散物镜[79],实现大视场共焦检测。然而,作为物镜使用时,微透镜的工作距离很短。对此,Choi等[80]通过将两个微透镜阵列和一个远心光学系统相结合,克服微透镜阵列焦距很小的限制,搭建的共焦成像系统提供1 mm×1 mm的视场,扫描范围为100 μm,其系统结构如
3.3.3 基于数字微镜装置的共焦扫描方法
1987年,科学家Hornbeck发明了一种电子输入、光学输出的微机电系统,称为数字微镜装置(DMD),它由许多铝制反射镜面组成,每个镜面能够绕其对角线旋转轴偏转±12°,即DMD的微镜都有3种状态,即+12°、0°、-12°。DMD上的每一个微镜都可以通过程序控制,因而很容易实现对光线的分束,以及对分束后的光线粗细、间距等参数的控制,与其他分光器件相比,DMD具有无可比拟的便捷性[83]。Luo等[84]利用DMD制作了一种可编程光源,并将其与基于DMD的共焦装置相结合,该装置的扫描速度比传统的阵列快300倍,其系统光路如
4 总结与展望
光谱共焦显微系统的整体性能主要由光源、色散物镜、光谱信号检测与处理算法决定。
由于自身特性,点光谱共焦测量系统测量效率低,不适用于对较大物体表面形貌的高速检测。因此,研究人员通过结合光学设备或设计光学元件,创新扫描方法,改善测量效果。
表 3. 光谱共焦显微技术的扫描方法对比
Table 3. Comparison of scanning methods for chromatic confocal microscopy
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先进制造技术的进步需要高精度测量技术的支持,而光谱共焦显微技术作为一种迅速发展的高精度测量技术,凭借测量精度高、适应范围广、无损检测、三维成像能力等优势在表面形貌测量、生产实时监测、生物医学成像等领域备受青睐,如玻璃、薄膜等透明材料的厚度测量,流水线产品的密封性和完整性检测,人体组织扫描成像等。同时,伴随工业应用的不断扩展,对高精度测量的需求也不断促进光谱共焦技术的更新和迭代。具体而言,光谱共焦技术的未来发展方向主要有以下几个方面。
1)光谱特性更稳定、更连续的宽光谱光源。如多个不同波段的微型发光二极管按一定规律排列组合,可实现更广泛的光谱范围,通过控制不同发光二极管的电流或亮度来调节各波段的光强,以扩展测量范围;结合偏振技术,通过控制光的偏振方向和相位,减少光谱中的波动和漂移,从而提高光源光谱稳定性。
2)色散物镜设计。利用衍射光学元件、超构光学元件等,实现光线的精确调控和波前修正,进一步提高物镜的分辨率和对比度;引入自聚焦光学元件,实现对焦的自动调节,提高图像的清晰度。
3)多种扫描方法配合。如使用振镜来控制线形光束的扫描方向,振镜的快速扫描能够实现高速的光谱数据采集,提高系统的时间分辨率;微透镜用于分割和聚焦光线,将其投射到光纤束上,通过光纤束传输到光谱仪中进行光谱测量,实现多点同时采集,提高系统的空间分辨率和采样效率。
4)融合人工智能、神经网络等计算机技术优化光谱信号检测与处理算法。通过学习大量的光谱数据,自动提取特征,如可以使用递归神经网络(RNN)来处理时间序列的光谱数据,或使用深度学习模型进行背景去噪、曲线拟合等任务,提高信号检测的准确性和信号处理的鲁棒性;结合神经网络的特征提取和增强,增加光谱数据的信息量和辨识度,提高信号的分辨率和灵敏度。
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