1 北京师范大学生命科学学院,中国,北京,100875
2 新疆农业大学农学院,中国新疆,乌鲁木齐,830052
3 甘肃亚盛集团博士后科研工作站北京分站,中国,北京,100101
本文概述了近年来激光微束在染色体微切割和微分离、分子细胞生物学、去除细胞壁、诱导原生质体融合等方面的应用,并对其今后的应用前景作了展望.
激光微束 染色体微切割 分子细胞生物学 原生质体融合 laser microbeam chromosome microdissection molecular cell biology protoplast fusion
利用激光微束穿刺法将苏云金芽孢杆菌的毒蛋白(δ-endotoxin)基因导入了油菜,经聚合酶催化链式反应(PCR)和PCRSouthern杂交证明抗虫基因已导入油菜基因组中并能在T1代得到遗传。对转基因植株进行了抗虫性测试,结果表明某些植株具有较好的抗虫性,并且这种抗虫性在T1代仍能保持。实验结果表明抗虫基因已整合进油菜基因组并得到了稳定的遗传。
激光微束穿刺 抗虫基因 油菜 转基因植株 T1代
以适当参数的Nd:YAG激光微束切割大麦7H染色体后再利用微细玻璃针挑取了7HS端部片段并放入Eppendorf管中, 建立了一种激光微束与玻璃针结合使用微切割、微分离植物染色体片段的方法, 为今后植物染色体特定区域DNA的微克隆技术提供了一种新的方法。
大麦 染色体微切割 Nd:YAG激光微束
利用激光微束穿刺法将pBI121质粒DNA导入百脉根。该方法是用高渗缓冲液对百脉根子叶进行预处理,通过激光微束对子叶细胞进行穿刺,然后在卡那霉素培养基上筛选出具抗性的绿色小苗。转化植物在含卡那霉素浓度为100 μg/ml条件下筛选培养三代后,获四株转基因植物,取其中两株进行总DNA PCR扩增分析,皆为阳性。证实GUS基因已导入百脉根中。通过研究建立了激光微束穿刺法转化百脉根的技术体系,从而证明该转化方法操作简便,重复性好,转化频率较高,为高等植物遗传转化提供了一个新途径。
激光微束 高渗缓冲液 转基因植物 GUS基因
本实验对新型光敏剂——竹红菌素加激光辐照对体外培养细胞PTK2和HeLa的杀伤力进行了研究,同时还对竹红菌素的吸收光谱和高效液相色谱分析(HPLC)层析结果进行了分析。结果表明竹红菌素可能是一种有效的光动力学反应的光敏剂。
激光显微照射 人宫颈癌细胞株(HeLa) 血卟啉衍生物(HPD) 竹红菌素 长鼻(鼠菐)肾上皮细胞株
利用YW-1型氩离子激光显微仪对PTK1、PTK2和人红血球细胞进行显微照射,最小有效损伤光斑仅0.5微米。细胞化学分析表明,在不用任何活性染料敏化细胞的情况下,激光照射能够破坏核仁内的DNA和RNA。
