淮北师范大学, 生命科学学院, 资源植物生物学安徽省重点实验室, 安徽 淮北 235000
大豆Lea5基因是LEA基因家族成员之一。为分析大豆Lea5基因的功能, 构建了大豆Lea5基因植物过表达载体pBI121-Lea5。通过农杆菌介导法转化烟草,获得TL-06、TL-09、TL-17和TL-32等4个转大豆Lea5基因烟草株系。RT-PCR分析表明大豆Lea5基因在4个转基因烟草株系的T2代植株均有不同程度的表达。以转基因TL-09和TL-32株系T2代植株为材料, 进行了干旱和盐渍处理, 结果表明, 2个转大豆Lea5基因烟草株系T2代植株对干旱和盐渍的抗性显著强于野生型烟草, 说明大豆Lea5基因可以提高植物抗干旱和盐碱的能力。
大豆Lea5基因 转基因植物 干旱抗性 耐盐性 Soybean Lea5 gene transgenic plant RT-PCR RT-PCR resistance to drought tolerance to salinity
利用激光微束穿刺法将pBI121质粒DNA导入百脉根。该方法是用高渗缓冲液对百脉根子叶进行预处理,通过激光微束对子叶细胞进行穿刺,然后在卡那霉素培养基上筛选出具抗性的绿色小苗。转化植物在含卡那霉素浓度为100 μg/ml条件下筛选培养三代后,获四株转基因植物,取其中两株进行总DNA PCR扩增分析,皆为阳性。证实GUS基因已导入百脉根中。通过研究建立了激光微束穿刺法转化百脉根的技术体系,从而证明该转化方法操作简便,重复性好,转化频率较高,为高等植物遗传转化提供了一个新途径。
激光微束 高渗缓冲液 转基因植物 GUS基因
