对国产锗硅异质结双极晶体管(SiGe HBT)进行了单粒子效应激光微束辐照试验，观测SiGe HBT单粒子效应的敏感区域，测试不同外加电压和不同激光能量下SiGe HBT集电极瞬变电流和电荷收集情况，并结合器件结构对试验结果进行分析。试验结果表明：国产SiGe HBT位于集电极/衬底结内的区域对单粒子效应敏感，波长为1064 nm的激光在能量约为1.5 nJ时诱发SiGe HBT单粒子效应，引起电流瞬变。入射激光能量增强，电流脉冲增大，电荷收集量增加；外加电压增大，电流脉冲的波峰增大；SiGe HBT的单粒子效应与外加电压大小和入射激光能量都相关，电压主要影响瞬变电流的峰值，而电荷收集量主要依赖于入射激光能量。

丙酮酸羧化酶(PEP)是控制油菜蛋白质/油脂含量比例的一个种子的含油量.本研究利用PCR法从甘蓝型油菜花油5号(H045)克隆了PEP基因片段,并与载体pBI121-B构建了反义PEP基因的种子特异性植物表达载体,通过激光微束穿刺法将其转化到甘蓝型油菜中,目前已获得了转基因植株.

本文概述了近年来激光微束在植物外源基因转化上的最新进展,激光微束转化法的关键技术及应用.并对其今后的应用前景作了展望.

本文概述了近年来激光微束在染色体微切割和微分离、分子细胞生物学、去除细胞壁、诱导原生质体融合等方面的应用,并对其今后的应用前景作了展望.

本文从激光的生物效应出发,简要阐述了激光微束与光钳系统的出现历程及其装置构造,系统分析了其作用原理,并介绍了其作为一新技术,在外源基因导入、体外辅助受精、细胞融合和显微操纵染色体与生物大分子等方面的应用状况,同时对其应用前景作一展望.

利用激光微束穿刺法将苏云金芽孢杆菌的毒蛋白(δ-endotoxin)基因导入了油菜,经聚合酶催化链式反应(PCR)和PCRSouthern杂交证明抗虫基因已导入油菜基因组中并能在T1代得到遗传。对转基因植株进行了抗虫性测试,结果表明某些植株具有较好的抗虫性,并且这种抗虫性在T1代仍能保持。实验结果表明抗虫基因已整合进油菜基因组并得到了稳定的遗传。

通过激光微束穿刺法，将β-1,3-葡聚糖酶及几丁质酶基因双价植物表达载体pBLGC导入棉花幼胚。转化一代棉花幼苗用蘸根法进行抗黄萎病筛选，将存活的苗移入病圃进行了卡那霉素(Kan 1%)抗性测定。结果表明，在移栽的29株幼苗中，有9株表现出明显的Kan抗性，对9株抗Kan植株进行了PCR检测，结果显示，其中7株表现为阳性。病圃中的T1代转基因植株在经历了黄萎病发病高峰期后，7株PCR阳性植株表现明显抗病，并已正常开花结铃，其他T1代植株及对照植株全部因后期发病死亡。这初步证明外源基因已整合到棉花基因组中，且使转基因植株对黄萎病表现出一定的抗性。

采用激光微束穿刺法将损伤诱导型启动子控制之下的商陆抗病毒蛋白(PAP)CDNA导入了甘蓝型油菜(BrassicanapusL．)双低品种H165,经庆大霉素筛选,获得了抗性再生植株。PCR扩增检测及Southern杂交分析表明,PAPcDNA连同损伤诱导型启动子已稳定整合至受体基因组,转化效率为1．7％。攻毒实验表明,转基因油菜植株对供试病毒芜菁花叶叶(TuMV)具有较高抵抗能力。

以适当参数的Nd:YAG激光微束切割大麦7H染色体后再利用微细玻璃针挑取了7HS端部片段并放入Eppendorf管中, 建立了一种激光微束与玻璃针结合使用微切割、微分离植物染色体片段的方法, 为今后植物染色体特定区域DNA的微克隆技术提供了一种新的方法。

利用激光微束穿刺法将pBI121质粒DNA导入百脉根。该方法是用高渗缓冲液对百脉根子叶进行预处理,通过激光微束对子叶细胞进行穿刺,然后在卡那霉素培养基上筛选出具抗性的绿色小苗。转化植物在含卡那霉素浓度为100 μg/ml条件下筛选培养三代后,获四株转基因植物,取其中两株进行总DNA PCR扩增分析,皆为阳性。证实GUS基因已导入百脉根中。通过研究建立了激光微束穿刺法转化百脉根的技术体系,从而证明该转化方法操作简便,重复性好,转化频率较高,为高等植物遗传转化提供了一个新途径。