为了研究药品中盐酸肼屈嗪含量检测的新方法, 本文采用共振光散射光谱法以Clark-Lubs缓冲液为介质分析盐酸肼屈嗪与十二烷基苯磺酸钠反应的光散射强度参数关系。研究发现: 在pH 1.4的Clark-Lubs缓冲介质中适量盐酸肼屈嗪与十二烷基苯磺酸钠水溶液发生π-π电荷转移和离子缔合反应, 所得产物的共振光散射最大发射波长在402 nm处, 盐酸肼屈嗪浓度在0.125~1.00 mg·L-1范围内呈线性关系, 相关系数R为0.9998, 检出限为0.035 mg·L-1, 回收率在99.08%~100.8%之间。所拟方法适用于分析常温下盐酸肼屈嗪与光散射强度的参数关系, 可应用于药品中盐酸肼屈嗪含量的测定。

建立了一种用维多利亚蓝B(VBB)简便、 高灵敏、 选择性检测全氟辛烷磺酸(PFOS)的共振光散射(RLS)分析方法。 在pH 6.0的KH2PO4-NaOH缓冲体系下, PFOS通过静电作用与质子化的VBB结合生成离子缔合物, 在277 nm处的散射信号有明显的增强, 增强的散射值(ΔIRLS)与PFOS在一定浓度范围内有良好的线性关系, 其线性方程为ΔIRLS=72.28+336.53c (r=0.996 4), 线性范围为0.05~4.0 μmol·L-1, 检测限为5.0 nmol·L-1。 优化了实验条件, 表征了紫外/可见吸收光谱、 扫描电镜显微成像(SEM), 并探讨了作用机理。 在相同实验条件下, 考察了全氟辛酸(PFOA)及其他几种全氟化合物(PFCs)与VBB的相互作用, 未见散射信号变化, 因此, 本法可实现对PFOS的选择性检测。 该方法成功应用于检测环境水样中的PFOS, 样品加标回收率为91.8%~100.6%, 相对标准偏差RSD≤1.74%。

在pH 7.40缓冲溶液条件下, 以牛血清白蛋白(BSA)为检测对象, 利用共振光散射法分别研究了298, 310, 318 K三个温度下BSA和硫酸粘杆菌素(CS)之间的相互作用机理。 结果证明: 该体系在反应过程中, 主要的猝灭方式为生成新物质的静态猝灭; n值约为1, 表明CS与BSA发生作用时只有一个结合位点; 由热力学参数得知该体系的反应过程是自发进行的, 药物与蛋白质主要是通过静电力结合; Hill系数约等于1, 表现为零协同作用。 将所得实验数据与荧光猝灭法所得数据进行比较, 比较显示: 利用共振光散射法所计算的猝灭参数(Ksv, Kq, n, Ka)与荧光猝灭法所得猝灭参数数值相似, 猝灭结论一致, 验证了该方法的正确性, 说明共振光散射法用于研究蛋白质与药物的相互作用是可行的。 共振光散射法与检测物质本身有无内源荧光无关, 因此也可以用于没有内源荧光物质的研究, 这使小分子与蛋白质相互作用的研究方法得到拓宽。

在模拟人体生理环境下, 利用荧光猝灭法(FQS)、同步荧光法(SYS)、共振光散射法(RLS)及紫外吸收光谱法(UV)分别研究了298 K下牛血清白蛋白与硫酸粘杆菌素、硫酸头孢匹罗、头孢匹胺钠3种药物间的相互作用机理。结果表明: 对于相同的体系, 利用4种方法计算得到的结合常数在同一数量级, 猝灭方式均为生成新物质的静态猝灭, 药物与蛋白作用时均以1∶1的比例结合, Hill系数近似。但对4种方法所得实验数据的综合比较表明, FQS、SYS更适合用于研究蛋白与药物的反应机理。

基于表面活性剂SDBS与奎宁的结合反应发展了一种测定奎宁的双波长共振散射比率法。在B-R缓冲介质中, SDBS与奎宁发生反应, 并于280.0 nm和375.0 nm两处特征波长处导致共振光散射信号大大增强。通过分别测定I280.0、I375.0和I240.0/I245.0来检测奎宁。当SDBS的浓度为4.0×10-5 mol/L时, 以I280.0和I375.0为测定点的单波长共振光散射方法所得到的线性范围和检出限分别为0.16~30 μmol/L 、16.3 nmol/L和0.15~30 μmol/L 、14.9 nmol/L。而用I240.0/I245.0的散射强度之比来测定奎宁时, 其线性范围和检出限分别为0.011~70 μmol/L和1.12 nmol/L。表明双波长共振散射比率法明显优于前者。

在pH 为4.6的HAc-NaAc介质中, 盐酸巴马汀与桑色素通过静电引力发生反应, 得到具有疏水性的离子缔合物, 致使体系在308 nm处的共振光散射信号显著增强。 研究表明, 体系增强的共振光散射信号强度与盐酸巴马汀的浓度在0.08～1.0 μmol·L-1之间具有良好的线性关系, 检测限为8.0 nmol·L-1。 由此建立了用于盐酸巴马汀检测的共振光散射分析方法。 研究了体系的散射光谱和吸收光谱, 通过扫描电镜和动态光散射考察离子缔合物的聚集情况并研究了体系的反应机理, 研究了酸度及离子强度对体系的影响, 最终实验选择pH 4.6的HAc-NaAc缓冲, 不加NaCl控制体系离子强度的情况下信号最佳。 探讨了体系的稳定性, 结果显示本反应体系反应迅速, 5min内散射强度即可达到最大值并至少能稳定120 min。 考察了可能存在的共存物质的影响, 结果发现常见的金属离子, 无机阴离子, 部分糖类及氨基酸不影响对盐酸巴马汀的检测。 该方法具有简单, 快速, 灵敏度高的优点。 该法成功用于实际药片和胶囊中盐酸巴马汀含量的测定, RSD≤3.3%。

近似生理条件下, 采用共振光散射法研究了CdSe/ZnS量子点/TiO2纳米复合物同人血清白蛋白的相互作用, 通过分析影响二者相互作用的纳米复合物浓度、 pH、 NaCl浓度、 反应温度、 检测时间、 共存离子、 表面活性剂、 加样顺序等外源刺激因素, 结果表明: 新形成的复合体系可能加强蛋白质的疏水腔, 使在水溶液中形成的疏水界面趋于集中, 从而导致其共振光散射强度增强; 体系受pH的影响变化非常灵敏; 适当的NaCl浓度可以提高体系的IRLS值灵敏度; 共存离子改变了体系的离子强度, 从而导致体系的ΔIRLS值的改变; 反应时间为5 min时, 体系IRLS值基本稳定; 同一种表面活性剂对于不同的体系的IRLS值的作用不完全一致, 带相反电荷的表面活性剂与纳米复合物有很强的静电作用; 对于与HSA相互作用的多元复合体系, 加样顺序的不同对体系的IRLS值的影响很明显; 体系的IRLS值随温度的改变呈不完全单调增加的趋势。 这些信息为纳米材料与生物大分子的相互作用机制提供理论支撑, 有助于深入了解纳米材料的生物相容性和安全性。

在pH 2.2 BR缓冲介质中, 磷钨杂多酸(PTA)与格拉司琼(GSN)相互作用形成离子缔合物, 不仅引起吸收光谱的变化, 还导致共振散射光谱(RLS)的显著增强并产生新的RLS光谱, 最大RLS峰位于333 nm附近, 其RLS增强程度与格拉司琼浓度成线性关系, 检出限和线性范围分别为12 ng/mL和0.04～3.0 μg/mL。文中研究了反应产物的吸收和RLS光谱特征, 优化反应条件的影响, 据此发展了以磷钨杂多酸为光谱探针的灵敏、简便、快速测定格拉司琼的新方法。将方法用于血清中格拉司琼含量的快速定, 结果满意。讨论了离子缔合反应和RLS增强机理。

应用荧光光谱法、紫外吸收光谱法及共振光散射法，研究了甲钴胺 (Mecobalamin) 与牛血清白蛋白 (BSA) 之间的相互作用。在pH=7.40的三羟甲基胺基甲烷盐酸 (TrisHCl) 缓冲溶液中，随着甲钴胺浓度的增加，BSA的荧光强度、共振散射光强度逐渐减弱。通过计算不同温度(293，303，310 K)下的猝灭常数 (Ksv=5.40×104，6.90×104，8.00×104 L/mol) 及扫描紫外吸收光谱，确定了甲钴胺对牛血清白蛋白的猝灭机理为动态猝灭。测定了该反应的表观结合常数 (KA=1.68×104，4.34×104，7.90×104 L/mol)和结合位点数 (n≈1)。利用热力学参数 (ΔH>0、ΔG<0和ΔS>0) 确定了分子间的作用力性质，作用力主要是疏水作用力，作用过程是自发的。同时应用同步荧光技术研究了甲钴胺对BSA构象的影响。结果表明，甲钴胺没有引起BSA构象的变化。

利用寡聚胸腺嘧啶核苷酸(PolyT)与碳纳米管(CNTs)之间的自发非共价修饰作用形成稳定的CNTs/PolyT纳米复合体系, 采用共振光散射(RLS)和紫外-可见吸收光谱考察了该复合体系与汞离子的相互作用。实验结果表明, 水相中单链PolyT能与CNTs形成稳定而均匀的分散体系, 而单链PolyT极易捕获汞离子生成特异性的T-Hg-T双链结构, 使其从CNTs上解离。此时, CNTs在电解质存在下会发生聚集并容易被离心而下沉, 导致体系的RLS强度(IRLS)发生变化。不同浓度的汞离子能使复合体系的IRLS呈现梯度变化, 并且其它金属离子与CNTs/PolyT的作用非常微弱。由此, 可实现汞离子选择性定性、定量分析。