作者单位
摘要
1 内蒙古科技大学化学与化工学院, 内蒙古 包头 014010
2 中国石油大学(华东)化学工程学院, 山东 青岛 266580
3 清华大学生命科学学院, 北京 100084
通过荧光光谱法、 紫外-可见吸收光谱法、 三维荧光光谱法、 圆二色谱法(CD)、 同步荧光光谱法和分子对接模拟法等方法研究了CTC(金霉素)和PEP(胃蛋白霉)之间相互作用的机制。 通过在不同温度下进行荧光强度测定, 确定了CTC与PEP相互作用及相关的猝灭机制。 通过实验结果计算出CTC与PEP的结合常数KA(298, 303和308 K) 为4.345×107, 2.836×107和1.734×107 L·mol-1 以及结合位点数n为1.618, 1.587和1.555。 n值接近于1, 这意味着在PEP与CTC之间只有一个结合位点。 基于热力学分析, 计算得298 K的热力学参数: ΔH(-70.13 kJ·mol-1), ΔG(-43.57 kJ·mol-1)和ΔS(-89.00 J·(mol·K)-1)。 由ΔH<0和ΔS<0可知范德华力和氢键是CTC和PEP之间的主要作用力, 由ΔG<0可知该反应自发进行。 根据Frster’s偶极-偶极非辐射能量转移理论, 计算得结合距离r=3.240 nm, 证明CTC与PEP之间存在非辐射能量转移。 分子对接模拟表明, CTC与PEP的结合位置在PEP的活性中心凹槽内, CTC与PEP的氨基酸残基VAL30, SER35, TYR189, THR74, THR77, GLY78和LEU112之间存在范德华力; CTC和GLU13, GLY217, ASP32, ASP215和GLY76等残基之间存在氢键作用力; CTC还与PEP的氨基酸残基TYR75存在疏水作用力。 各种作用力使CTC和PEP形成稳定的复合物。 通过紫外-可见吸收光谱、 同步荧光光谱和三维荧光光谱等技术分析, 可知CTC使PEP中的色氨酸(Trp)氨基酸残基周围环境极性增强, 疏水性减弱, 亲水性增强, 导致PEP二级结构发生改变。 圆二色谱图则表明CTC改变了PEP的部分二级结构, PEP中的α-螺旋结构的含量从11.6%增加到21.0%, β-折叠结构的含量从47.3%降至28.2%, β-转角(β-Turn)结构的含量从19.6%增加到24.2%, 无规则结构(Random coil)的含量从27.6%增加到34.2%, 表明CTC对PEP发生了相互作用, 改变了PEP周围的微环境, 导致PEP的二级结构发生变化。 本研究结果有助于了解CTC与PEP的结合机理, 为CTC的合理使用提供了重要依据。
盐酸金霉素 胃蛋白酶 多光谱法 分子对接模拟法 Chlortetracycline hydrochloride Pepsin Multi-spectroscopy Molecular docking 
光谱学与光谱分析
2020, 40(8): 2518
作者单位
摘要
江西农业大学工学院/生物光电及应用重点实验室, 江西 南昌 330045
鸡蛋清中残留的金霉素(CTC)易进入人体内蓄积,从而对人体的健康产生损害。研究表明,银胶能作为表面基底来修饰金霉素与Eu(III)的配合物,进而使配合物的荧光强度得到显著性的增强。本研究应用银胶表面增强Eu(III)的荧光来检测鸡蛋清中金霉素的残留量,分别分析了不同胶体、银胶的加入量、Eu(III)的加入量、反应时间等因素对荧光强度的影响,并确定了最佳的实验条件,在最佳条件下建立了以617 nm 处的荧光特征峰强度(Y)与鸡蛋清中金霉素含量(X)之间的标定曲线。结果表明:鸡蛋清中金霉素浓度范围在1.5~29.5 mg/L 时,鸡蛋清中金霉素含量与荧光强度之间呈现良好的线性关系,线性方程为Y=5.2265X+24.033,决定系数R2 为0.9043,实测值与预测值之间的R2=0.9182。可见用银胶表面增强Eu(III)的荧光来快速检测鸡蛋清中金霉素的残留量是可行的。
光谱学 金霉素 荧光 银胶 
激光与光电子学进展
2014, 51(10): 103002

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