基于磷脂酰肌醇 3-激酶（ PI3K）/丝苏氨酸蛋白激酶（ AKT）信号通路探究安罗替尼对 A549细胞增殖、凋亡的影响。将 A549细胞分为对照组、各剂量试验组、安罗替尼组、阳性药物组、抑制剂组和激活剂组。干预 24 h后检测 A549细胞活力、细胞形态、增殖率、凋亡情况及相关蛋白的表达水平。结果显示： 20 μmol/L安罗替尼处理后， A549细胞活力降低；安罗替尼组和阳性药物组较对照组 A549细胞生长受到抑制，细胞增殖率、细胞周期素 D1（Cyclin D1）及 p-PI3K、p-AKT的表达水平降低，细胞凋亡数量和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 -3（Caspase-3）的表达水平升高。抑制剂增强了上述各指标的变化，而激活剂则具有与抑制剂相反的趋势。该研究结果说明，安罗替尼可显著抑制人肺癌 A549细胞的增殖并促进其凋亡，其作用机制可能与抑制 PI3K/AKT通路的信号转导相关。该研究结果进一步说明了安罗替尼作为抗肺癌药物的潜在价值，为抗肺癌药物的研发提供了新的理论基础。

以对氯苯甲酸为配体, 合成了铜配合物{［Cu(pcba)2］2·(MeOH)2}(pcba =对氯苯甲酸, MeOH=甲醇), 经元素分析、IR和X射线单晶衍射表征, 该配合物属于三斜晶系, P1空间群, 晶胞参数为a=6.591 80(10) ,b=10.769 0(2) ,c=12.472 2(2) ,α=90.198 0(10)°,β=104.076(2)°,γ=99.673(2)°,Z=1,Dc=1.593 mg/m3,F(000)=408, 最终结构残差因子R1=0.040 0, wR2=0.114 5。采用紫外和荧光光谱对配合物及其跟人血清蛋白(HSA)相互作用的方式进行研究, 结果表明, 配合物浓度越大, 紫外及荧光强度越低。配合物对HSA的猝灭常数Ksv=5.78×103 L·mol-1, 猝灭速率常数Kq=5.78×1011 L·mol-1·s-1, 配合物对HSA的结合常数Ka=1.38×102 L·mol-1, 结合位点数n=0.592。同时, 本文研究了{［Cu(pcba)2］2·(MeOH)2}对胃癌细胞A549、宫颈癌细胞Hela、肝癌细胞HepG2和人正常肝细胞LO2的抗增殖能力, 发现其对三种癌细胞的增殖抑制效果跟顺铂相当, 对人正常肝细胞LO2的毒性比顺铂小。

迷迭香酸作为一种天然酚酸类化合物目前已被广泛应用于多种癌症的治疗。为探讨迷迭香酸对人宫颈癌的治疗效果，本研究通过细胞增殖、迁移和自噬等试验进行功能验证，并应用蛋白质免疫印迹技术验证了其可能发挥作用的信号通路。研究结果发现：经迷迭香酸处理后，人宫颈癌Hela细胞的增殖能力显著性下降；细胞的迁移能力同样受到抑制，自噬相关蛋白（ATGs）ATG5和Beclin1（酵母ATG6同源物）表达上调，磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）、丝氨酸苏氨酸蛋白激酶（AKT）和雷帕霉素靶蛋白（mTOR）表达下降。这提示，迷迭香酸可能通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路来促进细胞的自噬，并抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移。该研究结果进一步说明了迷迭香酸作为抗癌药物的潜在价值，为抗癌药物的研发提供了一个新的理论。

This study was conducted to understand the cellular proliferative effect of Photobiomodulation Therapy (PBMT) on thawed dental pulp stem cells (DPSCs) stored for 2 years. For this purpose, cells were exposed to PBMT for short period of time to evaluate the most appropriate PBMT parameter for stimulating cellular proliferation that can be used for future tissue engineering therapies. Fully characterized DPSCs were seperated into three groups according to the laser energy densities (5 J/cm² or 7 J/cm²) applied and a group was served as control in which cells did not receive any laser irradiation. The cells in laser-irradiated groups were further divided into two subgroups according to the period of application (24 h and 0 h) and exposed to Gallium– Aluminum–Arsenide diode laser irradiation. Cell viability and the proliferation rate of the cells were analyzed with the 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5 diphenyl tetrazolium bromide (MTT) assay, any PBMT related cellular cytotoxicity were determined by performing a lactate dehydrogenase assay (LDH) and statistical analysis of data were performed. The percentage of proliferation seemed to increase upon laser therapy in both different doses of irradiation (5 J/cm² and 7 J/cm²). DPSCs showed significantly higher proliferation rate upon 7 J/cm² irradiation in both 0 h and 24 h when compared to control groups. However, DPSCs irradiated with 5 J/cm² dose induced relatively lower proliferation rate when compared to 7 J/cm² dose of irradiation. According to the LDH data, PBMT exposure did not show any significant cytotoxicity at both energy densities in all different time periods. PBMT at 7 J/cm² should be an effective parameter to stimulate proliferation of long-term cryopreserved DPSCs in a short term time period. Photobiomodulation therapy may be an upcoming tool for future tissue enngineering and regenerative dentistry applications.

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族在基因表达调控和细胞功能活动中发挥了关键作用, 并且在肿瘤的发生发展中也起着重要作用。最近发现, MAPK家族的一个新成员MAPK4在肺癌的进展中起着重要作用, 然而MAPK4在宫颈癌中的作用尚未见报道。本研究首先通过GSCA在线软件在12个组织类型共65种肿瘤细胞系中分析了MAPK4的mRNA水平。根据分析的结果, 选取了宫颈癌细胞中MAPK4表达最高的HeLa细胞和表达最低的SiHa细胞作为研究模型进行下一步的研究。在HeLa细胞中,干扰MAPK4的表达后, 通过CCK8试验检测了宫颈癌细胞的增殖能力, 发现HeLa细胞的增殖能力显著下降。在SiHa细胞中, 转染MAPK4过表达质粒后检测细胞的增殖能力,发现MAPK4过表达后, SiHa细胞的增殖能力显著上升。最后, 本研究探索了MAPK4诱导宫颈癌细胞增殖的分子机制, 发现在宫颈癌细胞中MAPK4促进了蛋白激酶B(AKT)的活性, 这表明MAPK4可能通过激活AKT促进了宫颈癌细胞的增殖。上述研究结果表明, MAPK4能作为判断宫颈癌增殖潜能的标志物以及宫颈癌治疗的潜在分子靶点。本研究为宫颈癌的发病机制提供了新的见解, 对开发新的靶向药物治疗宫颈癌具有一定的价值。

细胞的正常生长要求保持氧化与抗氧化平衡, 而高糖环境会破坏这种平衡, 使细胞倾向于氧化, 产生大量的氧化中间产物, 对细胞造成氧化应激(OS)损伤, 从而导致炎性因子分泌, 细胞增殖缓慢, 生长受到抑制。光生物调节作用(PBM)成为康复治疗中不可缺少的一种方法, 其一方面可以提高抗氧化物酶的活性, 调节抗氧化体系的平衡, 加速胶原合成,另一方面可促进细胞因子、生长因子的分泌, 减少炎性反应, 维持氧化与抗氧化平衡, 促进细胞增殖。大量的细胞试验、动物试验和临床研究对PBM的具体作用机制和疗效做了深入的研究与探讨。为更好地促进PBM在临床及生命科学领域的运用, 本文对现有的研究成果进行了回顾与梳理, 主要从高糖环境下的细胞损伤变化、PBM修复损伤的机制、PBM的研究进展及展望等方面进行了综述, 阐述了PBM对高糖诱导的细胞OS损伤修复的机制, 更好地推进了光学在生物医学领域的应用。

人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)是一种具有多向分化潜能的干细胞, 具有广阔的应用前景, 但是由于其体外大量增殖和定向分化等问题尚未解决, 制约了其进一步应用。既往研究表明, 大气压冷等离子体(CAP)可促进离体培养的脂肪或骨髓来源MSCs的增殖和分化, 但对hUC-MSCs的影响国内外尚未见报道。因此, 本研究的目标是探讨CAP对hUC-MSCs增殖和成骨分化的影响。在电源频率(17 kHz)和气体流量(4 slpm)保持不变的条件下, 原代培养的hUC-MSCs经不同放电电压下产生的氦(He)等离子体处理后, 在不同时间点收集细胞, 采用CCK-8法检测细胞活力, 微板法检测碱性磷酸酶(ALP)的活性, 茜红素染色检测钙化结节的形成。结果显示, 与对照组相比, 纯氦气组上述指标无明显变化, 而CAP组的细胞活力显著降低, 并且与等离子体放电电压和处理时间呈负相关；CAP处理10 s和30 s后, ALP活性则无明显变化, 而处理60 s后ALP活性显著下降, 同时CAP处理30 s后钙化结节面积无显著变化。以上结果表明, 本试验条件下的CAP处理可抑制hUC-MSCs的增殖, 但对其体外成骨分化无明显影响。

研究紫铆因对人食管鳞癌细胞增殖和存活的影响。通过MTS和软琼脂集落实验检测紫铆因对食管鳞癌增殖的抑制, 生化分析仪检测紫铆因对食管鳞癌糖酵解的影响, 并利用免疫印迹检测紫铆因对食管鳞癌细胞增殖和凋亡激活相关蛋白分子的表达。结果发现紫铆因剂量依赖性抑制KYSE150和Eca109细胞增殖, 下调EGFR信号通路活化, 抑制HK2的表达及糖酵解。一定浓度的紫铆因能诱导食管鳞癌细胞发生凋亡, caspase3和PARP被剪切, Bcl-2和Mcl-1表达下调, 但Bcl-XL未见明显改变。结果证明紫铆因抑制食管鳞癌的增殖, 可能与EGFR信号通路和糖酵解被抑制, 及促存活蛋白Bcl-2和Mcl-1的表达下调有关。

目的：构建pcDNA3.1-Pax6过表达质粒并观察其对胶质瘤U251细胞增殖的影响。方法:以K562细胞cDNA为模版，采用RT-PCR的方法扩增Pax6基因，将扩增产物酶切回收后与同样酶切回收的真核表达载体pcDNA3.1连接、转化，构建pcDNA3.1-Pax6重组质粒，再经菌落PCR、酶切及测序鉴定重组质粒；利用脂质体lipofectamine 2000转染重组质粒至U251细胞。Real-time PCR检测Pax6 mRNA的表达水平，Western blot检测PAX6蛋白的表达，MTT法检测U251细胞增殖。结果：PCR扩增获得长度为1 131 bp的阳性产物，经pcDNA3.1真核表达载体克隆、酶切鉴定及序列分析后，证实真核表达质粒pcDNA3.1-Pax6构建成功；Real-time PCR结果显示，Pax6过表达后的U251细胞Pax6 mRNA表达水平明显高于正常对照组；Western blot结果显示，PAX6蛋白表达亦明显高于正常对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）；MTT结果显示，与正常对照组细胞比较，转染pcDNA3.1-Pax6组的细胞，细胞增殖能力明显降低，差异亦具有统计学意义（P＜0.05）。结论：成功构建人Pax6基因的pcDNA3.1-Pax6重组质粒，过表达Pax6基因抑制U251细胞的增殖。