作者单位
摘要
1 广西师范大学物理与技术学院,广西 桂林 541004
2 广西科学院生物科学与技术研究中心,广西 南宁 530007
3 天津大学精密仪器与光电子工程学院,天津 300072
应用拉曼镊子采集了3个酵母菌株在乙醇发酵不同时段的单细胞光谱,并利用多元曲线分辨-交替最小二乘(MCR-ALS)方法对光谱数据进行挖掘,以提取与特定生物分子相关的光谱曲线,了解不同酵母菌株的乙醇发酵代谢差异与适应机制。结果发现:工业菌株Bp1的发酵性能最好,实验室菌株INVSc1次之,而W303a菌株最差;MCR-ALS可从3个菌株中分别解析得到5个、5个和3个代表不同类型的生物大分子光谱曲线;Bp1菌株会增加麦角甾醇的含量和三酰基甘油的积累,以赋予细胞更高的乙醇耐受性;同时,不同生物大分子在Bp1细胞间的含量相对均一,而INVSc1和W303a菌株的胞间异质性比较大,显示出细胞异质性对菌株的发酵性能和发酵效率有重要的影响。拉曼光谱结合MCR-ALS,可以作为一个简单而强大的工具,用于快速分析酵母细胞在发酵过程中的代谢变化,进一步了解酵母细胞的抗逆机制。
生物光学 拉曼光谱 多元曲线分辨-交替最小二乘法 乙醇发酵 异质性 单细胞分析 
中国激光
2022, 49(15): 1507406
作者单位
摘要
1 广西师范大学物理科学与技术学院,广西 桂林 541004
2 广西科学院生物物理与环境科学研究中心,广西 南宁 530007
微塑料是备受关注的新型环境污染物,在自然环境中发生老化,分解后体积更小,给生态环境带来更大的挑战。应用单粒子拉曼光谱技术监测经紫外线(UV)老化处理后的不同粒径聚苯乙烯(PS)微球,对比处理前后微塑料的形貌和大小,以了解微米级小粒径PS塑料在模拟紫外线照射下的老化动态和老化机理。结果显示,随着辐射时间的增加,PS的拉曼信号强度显著降低,粒径减小,表面破损;粒径越小,受损越严重,而大粒径PS颗粒间的异质性明显增大。UV辐射可能破坏了PS多聚物的稳定结构,造成光谱信号减弱,而且小尺寸的PS微塑料更易于受损,进而分解为更细小的微纳颗粒或碎片。研究结果揭示了PS微塑料在不同粒径与UV处理时间下的老化动态和特征,从单颗粒角度为微塑料在环境中的老化动态提供了新的认识。
光谱学 拉曼光谱 聚苯乙烯 紫外线 老化 单粒子分析 
中国激光
2022, 49(4): 0411002
作者单位
摘要
1 广西师范大学 物理科学与技术学院, 广西 桂林 541004
2 深圳大学 物理与光电工程学院, 广东 深圳 518061
为了提高铝基等离子体传感器的灵敏度和稳定性,提出了一种基于相位调制增敏的表面等离子体共振传感结构:铝膜-石墨烯复合结构.采用Kretschmann传感结构,将铝膜和多层石墨烯依次沉积在高折射率棱镜上.基于传输矩阵原理,模拟计算激发光波长为632.8 nm时,几何结构参数对传感性能的变化规律.研究结果表明,相比于传统的角度调制模式,该传感结构采用相位调制模式,可以实现2个数量级的灵敏度增强.同时,石墨烯薄层的引入不仅能够有效阻止等离子体铝膜被氧化,而且能够产生近83倍的探测灵敏度增强因子.对于界面折射率变化为1.333~1.334 2 RIU,该复合结构的最大差分相位为94.663°,能够产生超高的相位探测灵敏度7.888 5×104°/RIU.该传感结构可为开发低成本、超灵敏的铝基等离子体传感器件提供参考.
表面等离子体 铝-石墨烯复合结构 传输矩阵 超灵敏生物传感 相位调制 Surface plasmon polarition Aluminum-graphene hybrid structure Transfer matrix Ultrasensitive biosensing Phase modulation 
光子学报
2020, 49(7): 0724002
作者单位
摘要
1 广西师范大学物理科学与技术学院, 广西 桂林 541004
2 深圳大学物理与光电工程学院, 广东 深圳 518061
构建了一种新型表面等离子体共振杂化结构:单层石墨烯/少层Ti3C2TxMXene/银膜,采用传输矩阵法验证了二维材料Ti3C2TxMXene用于超灵敏表面等离子体共振传感的可行性。通过优化等离子体银膜厚度和Ti3C2TxMXene层数,该等离子体杂化结构的光子吸收和能量损耗达到有效平衡。理论计算结果表明,当入射光波为632.8 nm时,单层石墨烯/3层Ti3C2TxMXene/35 nm银膜的最优配置传感结构能够产生一个趋近于零的光学反射率(3.48×10 -9)。当传感界面发生0.0012 RIU的微弱折射率变化时,可实现110.55°的最大相位差响应,进而获得高达9.21×10 4(°)/RIU的相位探测灵敏度。相比于传统的基于角度调制的传感结构,该等离子体传感结构能够提高4个数量级的增强因子。 因此,所构建的新型表面等离子体共振杂化结构在超灵敏生化传感领域有良好的应用前景。
材料 表面等离子体共振 相位调制 超灵敏生化传感 
激光与光电子学进展
2020, 57(9): 091601
作者单位
摘要
1 广西师范大学物理科学与技术学院, 广西 桂林 541004
2 广西科学院生物物理实验室, 广西 南宁 530003
3 武汉大学化学与分子科学学院, 湖北 武汉 430072
单细胞光镊拉曼光谱技术测量单个红细胞的血红蛋白浓度,配制不同浓度的血红蛋白溶液后利用拉曼光谱强度与血红蛋白浓度的关系,测量单个红细胞的拉曼光谱,根据公式计算单个红细胞内血红蛋白浓度。测量了70个血红细胞的拉曼光谱,结果显示单个红细胞的血红蛋白浓度为270~500 g/L,其中血红蛋白浓度在350~450 g/L 之间的是成熟的红细胞,占红细胞总数的90%以上,而浓度在300 g/L 以下的可能是网织红细胞,浓度在450 g/L 以上的是老化了的红细胞。这与平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)310~370 g/L 基本一致。表明利用该方法可以对单个红细胞内的血红蛋白浓度进行快速、无损、简单、精确的定量分析,展现了拉曼光谱技术在单细胞分析上的优势。
光谱学 拉曼光谱 血红蛋白 单个红细胞 平均红细胞血红蛋白浓度 
中国激光
2016, 43(1): 0115003
作者单位
摘要
1 广西师范大学物理科学与技术学院, 广西 桂林 541004
2 广西科学院生物物理实验室, 广西 南宁 530007
了解细胞生命活动途径并阐释其功能和分子机制是当前生命科学与物理科学交叉领域面临的重要科学挑战之一,而光学技术的创新与应用,能够通过监测单个细胞生理变化的细节来实现上述目标。细菌芽孢是一种特殊的休眠体,从休眠态转向营养生长的萌发过程是一种特别的细胞生理过程。光学技术和单细胞分析在芽孢萌发研究中的应用与发展,对认识芽孢萌发机理及其异质性发挥了极其重要的作用。就拉曼光谱、微分干涉差显微术、荧光成像和拉曼成像等技术的基本原理及其在细菌芽孢萌发中的应用与进展,前景与存在问题进行了简要述评。
生物光学 芽孢萌发机制 拉曼光谱 微分干涉差显微术 单细胞分析 
激光与光电子学进展
2015, 52(10): 100002
张枝芝 1,2,*林漫漫 2,3张泽森 1徐斌 1,2[ ... ]刘军贤 1
作者单位
摘要
1 广西师范大学 物理科学与技术学院, 广西 桂林 541004
2 广西科学院生物物理实验室, 南宁 530007
3 武汉大学 化学与分子科学学院, 武汉 430072
研究了结晶紫包裹的银包金纳米粒子进入红细胞的实时过程.利用激光光镊喇曼技术每隔20 s通过光镊囚禁红细胞并收集该细胞及邻近溶液的喇曼光谱,抽取光谱中具代表性的特征峰来观察其强度随时间的变化.结果表明:从囚禁的红细胞中收集到的光谱包括了归属红细胞与结晶紫的特征峰.红细胞的光谱特征峰1 001、1 128、1 213 cm-1和结晶紫的光谱特征峰915、1 177、1 389、1 586、1 619 cm-1的强度随着时间增加,表明在红细胞与纳米粒子共培养的过程中,纳米粒子在红细胞中累积,并引起红细胞信号增强.分析红细胞与其邻近溶液的光谱差,发现归属结晶紫的光谱特征峰913、1 179、1 586 cm-1随时间呈类余弦的变化,表明红细胞内的结晶紫包裹的银包金纳米粒子含量先升高后降低再升高.通过计算得到纳米粒子开始进入红细胞的时间范围及进入的速度、被溶酶体降解的速度.研究表明表面增强喇曼技术为研究外物进入细胞提供了新的实验方法和思路.
光谱学 表面增强 喇曼光谱 内吞作用 红细胞 结晶紫 银包金纳米颗粒 Spectroscopy Surface-enhanced Raman spectroscopy Endocytosis Erythrocyte Crystal violet Gold core-silver shell nanoparticles 
光子学报
2015, 44(6): 0630005
作者单位
摘要
1 广西师范大学物理科学与技术学院, 广西 桂林 541004
2 广西大学行健文理学院, 广西 南宁 530004
3 广西科学院生物物理实验室, 广西 南宁 530007
4 河北省科学院生物研究所, 河北 石家庄 050051
应用激光镊子拉曼光谱实时监测杀虫贪铜菌(Cupriavidus necator) H16菌株在特定氮源、不同果糖浓度下生物塑料聚β-羟基丁酸(PHB)的合成过程及其生化动态,以期获知碳源浓度对PHB 合成的影响机制。结果显示:1) 2.0%果糖浓度(质量分数)下的PHB 产量获得最佳发酵效果;2) 发酵启动及发酵前期胞内物质的合成速度基本相同,但果糖浓度影响对数生长期的长短;3) 782、1574、1656和1732 cm-1等峰信号强度变化动态显示,高碳源浓度下核酸物质的拉曼信号长时间维持在较高的水平,这可能是影响细胞合成PHB 的重要因素;4) 单个细胞在1732 cm-1峰处的平均强度与发酵液PHB 总含量线性相关,可用于定量监测发酵过程中PHB 总量动态。发现了C. necator H16 菌株在不同碳源浓度下PHB 合成代谢过程中胞内主要生物大分子的变化动态,为PHB 发酵提供全新的光谱学信息,也为基于单细胞拉曼光谱快速分选高产优良菌株提供实验依据。
光谱学 拉曼光谱 单细胞分析 聚β-羟基丁酸 
中国激光
2015, 42(3): 0315003
作者单位
摘要
1 广西科学院生物物理实验室, 广西 南宁 530007
2 广西师范大学物理科学与技术学院, 广西 桂林 541004
建立了一种利用显微拉曼光谱原位定量技术筛选平板培养基上类胡萝卜素高产突变株的方法。为了消除培养基背景信号对定量结果的影响,采用矢量校正算法对光谱数据进行预处理,得到了不含培养基干扰的菌落净信号。比较了不同光谱收集方式对光谱重现性的影响,发现扫描方式较定点检测能获得重现性更好的菌落净信号。利用共焦显微拉曼光谱分析了平板培养基上红酵母菌落中的类胡萝卜素,并用光镊拉曼光谱法进行验证,两种方法所得类胡萝卜素1512 cm-1拉曼峰值呈现良好的线性关系,说明了共焦显微拉曼光谱定量检测平板培养基上菌落内类胡萝卜素的可行性。用该方法对红酵母诱变菌进行筛选,筛选出两株类胡萝卜素高产菌株。研究结果表明该菌种筛选方法比传统方法更客观、高效。
光谱学 原位定量检测 拉曼光谱 诱变 类胡萝卜素 红酵母 
中国激光
2014, 41(2): 0215002
覃宗定 1,2,*许雪棠 3张枝芝 1,2林漫漫 2,4[ ... ]刘军贤 1
作者单位
摘要
1 广西师范大学物理科学与技术学院, 广西 桂林 541004
2 广西科学院生物物理实验室, 广西 南宁 530007
3 广西大学化学化工学院, 广西 南宁 530004
4 武汉大学化学与分子科学学院, 湖北 武汉 430072
利用拉曼光谱对注射硝酸甘油后的活体裸鼠体内动脉血液进行实时连续无损的分析,每隔10 s获取一个动脉血管内血液的拉曼光谱,光谱分析表明,活体血液的拉曼光谱主要体现在以下几个位置:1548,1618,1654 cm-1(与蛋白质相关)和1125 cm-1(与血糖相关)。通过分析部分特征峰发现注射硝酸甘油后在280~730 s内光谱强度下降,表明体内血液浓度变稀,这可能是由于血管扩张引起的。峰强度在注射硝酸甘油前后的变化为:1548 cm-1峰强度从1965.42降到1273.61,下降了35.2%,1125 cm-1峰强度从411.59降到223.79,下降了46.63%,说明血液中蛋白质、血糖的含量有不同程度的减少,即裸鼠体内血液中的血红蛋白质发生变性、血糖含量明显降低。拉曼光谱活体实时分析技术为研究硝酸甘油代谢机理提供了新的技术和方法。
光谱学 拉曼光谱 硝酸甘油 血液 活体 
光学学报
2014, 34(1): 0130001

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