近年来应用光动力技术治疗胃癌取得了可喜的进步, 它对各个时期的胃癌均有比较满意的临床效果。本文通过对国内外近年来用光动力技术治疗胃癌方面的文献进行综述, 系统阐述光动力运用于胃癌治疗这一项技术的原理、机制, 光敏剂、光源及临床效果等方面, 并总结了这项技术在治疗胃癌方面的优点和相关问题。

临床研究表明波长308 nm准分子激光治疗白癜风皮肤病效果明显。治疗效果与病人的性别、年龄、病程没有明显关联, 但与皮肤类型、皮损部位、治疗频度和疗程等有明显关联。在一定剂量范围内随治疗剂量和治疗时间增加治疗效果越来越明显, 呈线性变化。而皮损部位的影响, 疗效从明显到不明显的顺序是: 面部, 颈部和头皮, 生殖器, 四肢, 躯干, 手脚或肢端关节。皮肤类型对治疗效果影响明显。另外, 在一定的观察时间内发现308 nm准分子激光疗效明显高于NB UVB。

低功率激光(632.8 nm)照射(Low-power laser irradiation, LPLI)生物组织作为一种无损伤的物理疗法, 可以加速细胞生长、血管再生及伤口愈合等过程。一氧化氮(Nitric oxide, NO)是伤口愈合的关键因素之一, 其促进炎性细胞的趋化, 增强胶原的合成和沉积, 刺激细胞增殖和新生血管生成。我们研究发现LPLI可以促进NO的产生, 并且抑制细胞外调节蛋白激酶(Extracellular signal-regulated protein kinases, ERK) 的活性阻碍了NO的产生, 证明LPLI通过活化ERK调控NO的生成。这一研究将为低功率激光照射加速伤口愈合在临床上的应用奠定基础。

目的: 探讨血卟啉单甲醚(HMME)介导的光动力疗法(HMME-PDT)对HL60细胞的作用及PDT前后HL60细胞表面超微结构的变化。方法: CCK-8法检测光敏剂浓度和光照剂量对HL60细胞抑制率的影响, 荧光分光光度计监测PDT过程中光敏剂荧光强度随时间的变化, Fluo 3-AM荧光探针检测不同浓度HMME作用后HL60细胞内Ca2+变化, 原子力显微镜观测PDT作用前后不同扫描范围HL60细胞表面的超微结构图。结果: 细胞灭活率呈光敏剂浓度-光剂量依赖关系, 当HMME为50 μg/mL, 光照剂量为24 J/cm2时, 灭活效率达到70%; 随着光照时间的增加, 光敏剂的荧光强度不断减弱, 下降速率也逐渐变慢; 随HMME作用浓度增加, 钙离子浓度显著升高; HMME-PDT作用后HL60细胞表面结构出现明显变化。结论: HMME-PDT能有效灭活HL60细胞, 光敏剂浓度和光剂量是影响PDT疗效的重要因素, PDT过程中伴随有光漂白现象的发生, 细胞凋亡和钙离子浓度增加呈正相关, PDT作用前后细胞出现明显萎缩, 细胞膜粗糙度增加。

离子通道蛋白作为神经系统的重要组成部分, 在早期神经细胞发育中的作用却没有被研究过。基于神经发育在果蝇与小鼠间的保守性, 果蝇幼虫大脑视觉中心可作为很好的模型来筛选参与神经干细胞行为调节的基因。文章通过体内RNA干扰和失活突变体来研究重要的钙离子通道和钾离子通道蛋白对神经干细胞的调节作用。结果表明, 这些蛋白表达水平降低和shaker蛋白完全失活均对果蝇幼虫大脑神经干细胞的发育无影响。

通过PCR扩增技术, 从DNA和mRNA水平上鉴定出拟南芥GEF14基因的T-DNA插入纯合突变体gef14-1。不同浓度ABA处理拟南芥野生型(Col-0)及gef14-1的7 d龄幼苗, 采用实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR, Q-PCR)方法, 分析小G蛋白ROP10的表达模式, 结果表明gef14-1在不同浓度ABA处理下的ROP10的表达模式与Col-0中的一致; 表型分析结果显示gef14-1与野生型并无明显区别。推测GEF14不参与ROP10介导的ABA信号转导途径或其调控与其他GEFs存在功能冗余。

雌激素在生殖系统、认知记忆系统、骨骼和神经的发育及其功能维持等多种生理功能中扮演了重要的作用。雌激素可以通过结合到核雌激素受体Erα 、Erβ来完成其生理功能。最近通过ER敲除鼠和选择性的抑制剂研究表明 Erα在海马中具有重要作用。 Erα在海马中的表达是否具有年龄和性别差异的研究较少, 该文研究了 Erα在不同年龄、不同性别的小鼠海马中的表达, 并进一步比较了 Erα在卵巢去除小鼠和对照小鼠中的表达差异。研究结果揭示了Erα在海马中的表达具有年龄和性别差异, 暗示了 Erα的表达受到外周雌激素水平的调控。这些结果为进一步研究雌激素和 Erα在海马组织中基因表达的调控过程以及相关疾病的临床治疗提供参考。

Dmc1(disrupted meiotic cDNA)基因是一个在减数分裂前期Ⅰ表达的特异基因, 其产物是减数分裂前期Ⅰ同源染色体配对所必需的。根据据酵母菌、小鼠以及人的DMC1中保守的氨基酸基序设计简并引物, PCR扩增克隆获得了第四代雌核发育二倍体鲫鲤(G4)Dmc1基因部分cDNA序列。在此基础上, 通过RACE获得了G4Dmc1基因全长cDNA序列, 长度为1 369 bp, 其中开放阅读框为1 029 bp, 编码含342个氨基酸的蛋白质。同时, 系统进化分析表明, 在进化过程中Dmc1基因在鱼类中保持着高度保守的进化特征。RT-PCR结果表明, Dmc1基因只在G4性腺中表达, 在其他组织中不表达。通过实时荧光定量PCR, 对Dmc1基因在G4和普通鲤鱼的早期卵巢的表达进行分析, 发现G4表达比鲤鱼高。由此可见, 雌核发育二倍体鲫鲤Dmc1基因也是减数分裂特异基因, 而且其高表达暗示雌核发育二倍体鲫鲤具有正常的减数分裂过程并且其早期性腺存在着多倍体卵原细胞。

目的: 利用siRNA 表达载体构建抑制人类成肌发育候选基因ASB12表达的pSUPER RNAi 载体(pSUPER-ASB12), 筛选构建C2C12-pSUPER-ASB12稳定表达细胞系。方法: 化学合成一对编码短发夹RNA序列的、靶向成肌发育候选基因ASB12的寡核苷酸链60个碱基, 退火, 克隆到经BglⅡ、XhoⅠ双酶切的pSUPER 质粒上, 构建重组RNAi质粒(pSUPER-ASB12)。通过酶切鉴定及测序分析检测构建效果。将正确构建的质粒转染小鼠骨骼肌细胞C2C12, 通过G418筛选, 免疫荧光检测, RT-PCR 分析, 建立稳定表达pSUPER-ASB12的细胞系C2C12-pSUPER-ASB12。结果: pSUPER-ASB12载体经酶切鉴定及测序分析, 结果表明60个碱基成功插入到预计位点, 并且序列完全一致。C2C12-pSUPER-ASB12稳定表达细胞系可表达绿色荧光蛋白, RT-PCR检测结果显示C2C12-pSUPER-ASB12细胞中ASB12表达量明显降低。结论: 靶向ASB12的pSUPER RNAi 载体和C2C12-pSUPER-ASB12稳定表达细胞系构建成功, 为进一步从分子水平探讨ASB12在成肌发育中的功能奠定了基础。

硫胺素在植物应对环境胁迫刺激及植物免疫方面发挥的作用越来越受到人们的关注。本文主要研究了硫胺素对线粒体氧化还原状态的调节作用。研究发现硫胺素可以提高线粒体的氧化状态, 这一效应具有浓度依赖性, 当硫胺素浓度高于1 mmol/L时较为明显。此外, 硫胺素还可增强植物细胞线粒体丙酮酸脱氢酶(PDH)的活性。并且在应对铝、镉胁迫时, 硫胺素预处理组能较快促进活性氧的迸发。线粒体氧化状态的提高对细胞应对胁迫因子刺激, 较快释放活性氧从而激活下游信号具有重要意义。

利用生物信息学方法获得拟南芥全基因组中12个GHMP基因家族成员。通过实时定量PCR技术研究这12个基因在不同组织中的表达, 结果显示它们具有组织表达特异性。构建了拟南芥中GHMP基因家族成员的系统进化树。启动子区调控元件分析表明, 大多数GHMP成员包含有光响应、生物钟及其它逆境胁迫响应的相关元件, 预测这些GHMP基因家族成员可能参与了植物的光信号、生物钟及相关的逆境胁迫信号转导途径。

水稻条纹叶枯病严重威胁着我国的水稻生产, 该病由水稻条纹病毒(Rice stripe virus, RSV)引起。目前, 对水稻与RSV互作机制的认识还较少, 这是制定有效措施来对RSV进行防控的一大障碍。代谢组学是新近发展起来的一种研究手段, 它通过考察生物体系包括细胞、组织或整个生物体在受到刺激或扰动后, 在代谢水平上的应答, 来研究一系列的生物现象。运用代谢组学对水稻与RSV的互作进行了初步探索。GC-MS分析表明, RSV的侵染能显著影响水稻的代谢谱, 且在代谢组水平上, 不同抗感性的水稻对RSV的响应存在着差异。与NIST质谱数据库中的信息比较, 从武育粳3号健康植株中鉴定到内源性代谢物12种、武育粳3号发病植株中11种、KT95-418健康植株中9种、KT95-418发病植株中14种。

通过测定叶片中叶绿素含量、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、脯氨酸含量及质膜透性, 研究了不同浓度铜胁迫对芦竹幼苗植株的生理指标及富集能力的影响。结果表明: 随铜处理浓度的增大, 叶片中叶绿素含量、POD、SOD和CAT活性均呈先升高后降低的趋势, 当铜处理浓度在100 mg·kg-1时, 叶绿素含量、CAT活性达到最大值, 而POD、SOD活性在200 mg·kg-1处理时达到最大值。MDA含量、脯氨酸含量及质膜透性均随铜浓度增大而升高, 当铜处理浓度在800 mg·kg-1时, 叶片中的MDA含量、脯氨酸含量及质膜透性达到最大值。检测芦竹中铜含量的分布规律为根(地下部分)＞茎、叶(地上部分), 当铜处理浓度未达800 mg·kg-1时, 转运系数小于1, 富集系数大于1。结果表明芦竹对铜污染土壤具有一定耐受力。

研究组前期的全基因组关联研究发现PHACTR3基因与骨折关联, 为了检测该基因与骨密度的关联关系, 采用精细定位关联研究来检测PHACTR3基因内及其附近的SNPs与骨密度的关系。首先在中国样本(1 627个不相关的汉族样本)和美国样本(2 286个不相关高加索样本)中对PHACTR3基因的140个SNPs进行基因分型, 然后采用Plink软件检测PHACTR3基因与腰椎和髋部骨密度的关联关系。发现研究组以前报道的与骨折关联的SNPs rs1555364和rs6064822与腰椎和髋部骨密度关联(P=4.89×10-2-1.26×10-2)。另外还发现位于PHACTR3基因内含子中3个SNPs位点 (rs6027138, rs1182531 和rs1182532)与中国人群和白人腰椎骨密度均显著关联, 将中国人与白人样本合并起来进行荟萃分析(Meta-analysis), 得到合并P值为1.40×10-3到4.00×10-4, 另外发现rs6064820与髋部BMD相关联, 合并P值为6.70×10-3。本研究进一步证实了PHACTR3基因在骨密度变异中的作用, 对骨质疏松发病机制的认识提供了新的理论依据。

目的: 总结分析湖南省长株潭地区儿童烧伤的流行病学特征。方法: 采用分层随机抽样法抽取湖南省长株潭地区3所医院, 收集其2010年1月至2010年12月间收治的0-14岁烧伤患儿病历资料, 并对烧伤患儿或其家长进行问卷调查。结果: 各年龄段患儿烧伤构成比依次为0-3岁(62.1%)、4-6岁(24.2%)以及7-14岁(13.6%)。致伤原因构成比依次为热液烧伤(56.1%)、火焰烧伤(31.8%)、其他原因烧伤(12.1%)。83.3%的烧伤发生在室内, 客厅为最主要的烧伤发生场所占47.3%。75.8%的患儿烧伤发生在白天(6∶00-18∶00)。62.5%的患儿烧伤发生在夏、秋两季(6月-11月)。结论: 在长株潭地区, 婴幼儿时期(0-3岁)为儿童烧伤的易发年龄段; 热液/热蒸汽造成的烧烫伤是儿童烧伤最常见的类型; 室内特别是客厅为儿童烧伤最容易发生的地点。白天和夏、秋两季为儿童烧伤的好发时段和季节。

目的: 探索激光辅助体外制作小鼠嵌合体胚胎的方法。方法: 激光辅助去除不同发育阶段体外受精胚胎的透明带, 随机组合卵裂球体外培养, 观察胚胎融合情况。结果: 没有透明带的卵裂球体外能够“自发”融合, 并且融合胚胎在体外培养环境中, 能够发育至囊胚期, 显微镜观察其形态基本与二倍体胚胎无差别。结论: 激光辅助方法获得裸露的卵裂球能够在体外培养环境制作嵌合体胚胎。

应用羟脯氨酸法测定了牛蛙皮胶原蛋白含量, 通过正交实验对牛蛙皮胶原蛋白酸法提取条件进行了优化, 并结合MTT法测定了胶原蛋白对细胞生长和粘附性的影响。结果显示, 牛蛙皮胶原蛋白的含量约为45.1%; 温度条件对提取率影响最大, 其次依次为酸种、时间和浓度, 最优组合为乙酸、1.5 mol/L、37 ℃、24 h; 在低浓度时, 牛蛙皮胶原蛋白对正常人类肝细胞的生长和粘附性无显著影响, 当浓度升高到一定值时, 对细胞生长和粘附性有显著促进作用。