类风湿关节炎(RA)是一类以滑膜增生、滑膜关节损害、活动功能不全为主要特点的慢性全身性自我免疫炎症性病变。目前, 对于RA的治疗包括药物治疗、外科手术治疗和物理疗法。物理疗法中光疗法由于其无侵袭力、无痛等优势, 被用作辅助治疗手段普遍应用于临床。为此, 本研究通过630 nm LED红光探讨了光生物调节法通过促进成纤维样滑膜细胞凋亡, 从而治愈类风湿性关节炎的机理。JC-1染色试验表明, 630 nm LED光照后线粒体膜电位去极化增强, 膜电位降低; 使用CASP3活性检测试剂盒和CASP9活性检测试剂盒进行试验, 证明630?nm LED可以促进MH7A细胞中CASP3和CASP9酶的活性; 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)试验显示, 630?nm LED可以促进瞬时受体电位香草素1(TRPV1)的表达; 蛋白质免疫印迹试验(Western blot)证明, 经过630 nm LED红光照射可以促进MH7A细胞TRPV1蛋白的表达; CCK-8试验表明, 630 nm LED可以显著性抑制MH7A细胞活力, 但不能降低TNF-α刺激下TRPV1拮抗剂处理的MH7A细胞活性; TUNEL试验证实, 630 nm LED照射诱导MH7A细胞凋亡, 但不能诱导TNF-α刺激下TRPV1拮抗剂处理的MH7A细胞凋亡。综上所述, 630 nm LED红光在类风湿性关节炎中通过调控TRPV1促进TNF-α诱导的MH7A细胞凋亡, 这对辅助缓解RA滑膜炎症有一定作用。

通过分析红光/近红外LED光照射治疗(LED光疗)对外周血单核细胞中疼痛相关炎症因子及趋化因子的表达影响, 研究红光/近红外光生物治疗对疼痛的抑制作用。在用人单核细胞THP-1评价红光/红外光的安全剂量的基础上制备健康成年人外周血单核细胞(PBMC), 进行红光/红外光照射处理后, 用荧光定量PCR法检测疼痛相关炎症因子及趋化因子的表达变化。结果显示, 经过红光/近红外LED光疗后, 与对照组相比, PBMC的CXCL12、CXCL13、CX3CL1、CCL4、CCR2、IL-4、IL-6和MMP2基因表达水平明显下调, 表明红光/近红外LED光疗可通过抑制PBMC中疼痛相关趋化因子及炎症因子表达发挥抗疼痛作用。此研究可为疼痛辅助治疗提供新的思路。

M1型巨噬细胞为经典活化型巨噬细胞, 可分泌多种促炎因子和趋化因子促进炎症的发展。我们前期研究已经证明, 630 nm发光二极管(LED)照射能抑制巨噬细胞释放炎症因子, 然而, 630 nm LED对巨噬细胞极化的调控作用及其分子机制尚不清楚。在本研究中, 我们评估了630 nm LED照射对单核细胞(THP-1)来源的M1型巨噬细胞极化的影响, 探讨了其对M1型巨噬细胞极化的作用机制。体外培养THP-1细胞, 用佛波酯(PMA)将其诱导成巨噬细胞。用脂多糖(LPS)和干扰素-γ(IFN-γ)处理巨噬细胞, 使其极化成M1型巨噬细胞, 极化的同时用波长为630?nm、功率密度为40.02?mW/cm2的LED对其进行照射。采用噻唑蓝(MTT)法、细胞计数试剂盒(CCK-8)法和乳酸脱氢酶(LDH)活性检测试剂盒检测细胞活力, 用实时定量PCR法检测M1型巨噬细胞相关因子mRNA的表达水平, 采用免疫印迹和细胞免疫荧光检测M1型巨噬细胞中STAT1的核转位。结果显示, M1型巨噬细胞经630?nm LED照射后, 其活性未受影响, 但M1型巨噬细胞相关因子干扰素调节因子5(IRF5)、趋化因子配体9(CXCL9)、CXL10、CXCL11 mRNA的表达水平显著降低, 并且阻滞转录因子STAT1向核内转移。综上所述, 630?nm LED照射可通过阻滞STAT1核转位抑制M1型巨噬细胞极化, 此研究可能对治疗巨噬细胞极化相关疾病提供新的思路。