1 安徽农业大学生命科学学院, 安徽 合肥 230036
2 日本三重大学生物资源研究院, 日本 三重县 津市 514-0001
热激蛋白(HSPs)是受热等因素刺激后而诱导产生的蛋白质, 是一类可以调节应激反应并且保护机体防止细胞损伤的蛋白质, 在机体的应激反应中具有重要作用。它们作为一般标志物被广泛应用于环境监测中。CdCl2, Cu2＋, Zn2＋这三种重金属是普遍存在的环境污染物, 对人体和动物的一些主要器官造成损伤。以HeLa细胞(子宫肿瘤细胞)为材料, 采用不同浓度的CdCl2, Cu2＋, Zn2＋三种重金属物质诱导细胞, 并利用免疫荧光染色(IFS), SDS-PAGE, Western blotting和RT-PCR四种手段分别从基因和蛋白质的水平来研究重金属对HSP70表达的影响。结果表明, 三种金属对HSP70表达的影响程度为CdCl2>Zn2＋>Cu2＋, 且HSP70的产生量与重金属的浓度呈正相关。通过研究, 以建立一种对HSPs的表达更有效的检测手段用于以后的研究。
HeLa细胞 重金属 HeLa cells HSP70 HSP70 Heavy metal IFS IFS Western blotting western blotting RT-PCR RT-PCR
军事医学科学院放射医学研究所,中国 北京 100850
目的:观察脉冲Nd:YAG激光照射体外单层培养KB细胞后的形态改变及损伤后HSP70, c-Fos的表达情况,初步探讨较强脉冲激光对细胞的损伤效应及损伤修复机制.方法:建立单层培养细胞的脉冲Nd:YAG激光损伤模型,每个脉冲能量密度为160 J/cm2～186 J/cm2或220 J/cm2～257 J/cm2,分别于照后即刻、2 h和6 h,用台盼蓝染色、TUNEL检测分析该激光对KB细胞的损伤特点,免疫组化法检测HSP70, c-Fos的表达水平.结果:当照射剂量为220 J/cm2～257J/cm2时,照后即刻,光斑中央细胞形态严重破坏,直接坏死;周围细胞形态未发生明显改变.2 h后周围细胞TUNEL着色也增强,呈强阳性.照后6 h光斑中央及周围细胞着色均减弱.TUNEL着色区直径随时间先扩大后缩小.当照射剂量为160 J/cm2～186 J/cm2时,细胞内HSP70、c-Fos表达随时间先显著增强,而后减弱至正常.结论:脉冲Nd:YAG激光在所选剂量下,可以引起单层KB细胞的损伤,包括即刻坏死、延迟性死亡及可逆性损伤.HSP70、c-Fos的高表达说明它们在保护受损细胞、修复激光所致损伤中发挥重要作用.
细胞损伤 Nd:YAG激光 cell injury c-Fos c-Fos HSP70 HSP70 Nd: YAG laser
