以3,4,9,10-苝四甲酸二酐(PTTC)为原料, 采用真空气相沉积-分子自组装法制备了有机纳米材料, 通过扫描电镜、透射电镜、红外光谱、荧光光谱和差热分析表征所得产物。用吐温20增溶PTTC纳米材料, 发现L-赖氨酸对该分散系的荧光具有较强的增敏作用, 据此建立了L-赖氨酸的纳米荧光化学传感新方法。体系的荧光变化与赖氨酸浓度呈线性关系, 线性范围为7.00×10-4～5.40×10-7mol/L, 检出限为8.39×10-8mol/L。进一步研究发现, PTTC纳米结构使赖氨酸的循环伏安图电流差减小, 有望据此制作赖氨酸纳米电化学传感器。
10-苝四甲酸二酐 真空气相沉积—分子自组装法 有机纳米材料 L-赖氨酸 化学传感器 3 3 4 4 9 9 10-perylenetetracarboxylic(PTTC) thermal vacuum evaporation and molecule self-assem organic nanomaterials L-lysine chemical sensor
1 暨南大学材料科学与工程系, 广东 广州 510632
2 暨南大学附属第一医院, 广东 广州 510632
聚赖氨酸是一种重要的聚阳离子, 在生物医药领域具有广泛的应用前景。 但是, 目前其血液相容性的相关报道较少, 特别是通过光谱法研究其与血液中重要蛋白的相互作用。 因此, 通过多种光谱法研究聚赖氨酸与纤维蛋白原的相互作用, 进一步评价其血液相容性具有一定的创新性。 本实验通过荧光、 紫外和圆二色谱研究聚赖氨酸对纤维蛋白原结构的影响。 其中, 聚赖氨酸的正电性随着浓度增大而增大; 复合实验显示, 0.01 mg·mL-1的聚赖氨酸对纤维蛋白原的功能影响较小, 随着浓度增大, 相互作用增强; 荧光光谱显示, 纤维蛋白原在λem=341 nm处出现浓度依赖性的荧光猝灭; 紫外光谱显示, 聚赖氨酸对纤维蛋白原吸收强度（200～240和278 nm处）的影响在0.025 mg·mL-1时较小, 并出现浓度依赖性的减少; 圆二色光谱显示, 随着聚赖氨酸浓度增大, 纤维蛋白原的α-螺旋含量减少, β-折叠、 β-转角和无规卷曲含量增加。 结果表明, 聚赖氨酸会与纤维蛋白原发生静电相互作用, 对其结构造成浓度依赖性的影响。 当浓度为0.01和0.025 mg·mL-1时, 聚赖氨酸对纤维蛋白原结构的影响较小; 而浓度过大时, 影响较大, 势必破坏纤维蛋白原的生理功能。 因此, 研发和应用聚赖氨酸时必须充分考虑浓度因素。 本实验提供了一种简便而系统的方法来研究材料与蛋白的作用,有利于充分评价材料的血液相容性。 此外, 上述研究结果对聚赖氨酸的生物医学应用具有重要的指导意义。
聚赖氨酸 纤维蛋白原 荧光光谱 紫外光谱 圆二色谱 Poly-L-lysine (PLL) Fibrinogen Fluorescence spectroscopy UV Circular dichroism
利用化学方法合成纳米银,调节pH值,加入赖氨酸溶液,通过紫外光谱和动态光散射法研究pH对纳米银及纳米银-赖氨酸体系稳定性的影响,利用表面增强拉曼光谱考察赖氨酸与纳米银的相互作用方式。紫外光谱显示纳米银和纳米银-赖氨酸体系在pH值为5~10时,均具有较强的吸收峰；应用动态光散射测定了不同pH的纳米银及其赖氨酸体系的粒径及强度自相关函数,在pH值为5~10时,粒径分布均匀,DLS自相关曲线平滑,说明纳米银和纳米银-赖氨酸体系稳定性良好；SERS研究了pH为4、7、10时,赖氨酸在银粒子表面的吸附作用,体系出现比较明显的赖氨酸特征峰,当pH为4时,为 δ（NH3+) 的1444 cm-1谱峰和δ（COO-)的1576 cm-1,此时赖氨酸通过氨根和羧酸根共同与银纳米粒子发生相互作用,当pH为10时,NH3+ 发生去质子化,此时赖氨酸只出现COO-的伸缩振动在1576 cm-1处,说明此条件下赖氨酸以羧酸根吸附在银粒子表面。
纳米银 赖氨酸 pH值 表面增强拉曼光谱 动态光散射 silver nanoparticles lysine pH value SERS DLS
1 山东省科学院生物研究所, 山东 济南 250014
2 山东省生物传感器重点实验室, 山东 济南 250014
3 山东省科学院生态研究所, 山东 济南 250014
本研究利用固定化赖氨酸氧化酶和生物传感器, 建立了麦芽汁中赖氨酸含量的测定方法。研究了该方法的线性范围、检出限、最适pH值范围、稳定性及专一性。以大生产麦芽汁为样品, 与其它检测方法进行了比较。结果表明, 生物传感器法测定赖氨酸含量操作简单而准确, 加标回收率为97.41%~103.23%, RSD为2.23%; 线性范围为2~100 mg/100 mL, 检出限为2 mg/100 mL; 稳定性及专一性强, 不受其他氨基酸的干扰, 能够用于氨基酸种类复杂的麦汁赖氨酸的检测。本方法与氨基酸分析仪、DBL、HPLC等方法相比较, 测定结果无显著差异(P＞0.05)。
麦汁 啤酒生产 赖氨酸 生物传感器 wort beer production lysine biosensor
1 深圳大学光电工程学院教育部/广东省光电子器件与系统重点实验室， 广东 深圳 518060
2 深圳大学医学院深圳市生物医学工程重点实验室， 广东 深圳 518060
研究了偶联环状精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-D-苯丙氨酸-赖氨酸[c(RGDfK)]肽段的CdSe/ZnS量子点(QD-RGD)对喉癌血管靶向成像。利用羧基与氨基反应将c(RGDfK)肽段与QD偶联；采用荧光分光光度计对QD-RGD在RMPI1640培养基和小鼠血清溶液中的光谱稳定性进行了检测；利用荧光显微镜检测QD-RGD对Hep-2细胞和MCF-7细胞上整合素αvβ3的靶向性；最后将QD-RGD尾静脉注射到小鼠体内，检测了其对皮脊翼视窗中喉癌血管的靶向性。结果表明QD-RGD的发射光谱在RMPI1640培养基4 h内没有明显变化，在小鼠血清中24 h内发射光谱的荧光强度仅下降了20%；对细胞荧光成像表明QD-RGD能特异性与细胞表面的整合素αvβ3结合；血管成像表明QD-RGD 在注射2 h后聚集在喉癌局部血管，24 h 后QD-RGD从血管中移除。该研究表明QD-RGD能用于活体喉癌肿瘤血管靶向成像，这为喉癌的靶向诊断和靶向治疗研究提供了参考。
医用光学 量子点 环状精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-D-苯丙氨酸-赖氨酸肽段 整合素αvβ3 皮脊翼视窗 肿瘤血管
1 汕头大学医院第一附属医院血液室,中国广东汕头,515041
2 汕头大学医学院中心实验室,中国广东汕头,515031
目的探讨血小板贴壁的简易方法,同时,观察单个血小板激活前后细胞内钙波动及形态变化的规律.方法采用多种粘附剂固定血小板,利用钙荧光探针(Fluo-3/AM)(终浓度10～20μmol)进行染色,在激光扫描共聚焦显微镜检测下加入二磷酸腺苷,观察和分析血小板内Ca2+浓度及形态变化.结果多聚赖氨酸促进血小板贴壁固定的效果最佳;单个血小板激活后细胞内Ca2+浓度为激活前的128%,形态由圆形或椭圆形转为不规则形,有空泡、突起形成.结论多聚赖氨酸是血小板贴壁的理想粘附剂,本方法能简易、快捷地监测血小板激活过程中胞浆内钙离子动态变化及形态改变,有助于血小板功能的深入研究.
激光扫描光聚焦显微镜 多聚赖氨酸 血小板 细胞内钙 laser scanning confocal microscopy polylysine platelets intracellular calcium
