近年来, 纳米金粒子对聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)的增效作用倍受关注, 但是其具体的机制仍未明确提出。研究发现在PCR反应中, 纳米粒子的增效作用是存在最佳浓度的, 增加DNA聚合酶或者小牛血清蛋白(BSA)可以消除纳米金粒子导致的抑制。我们认为, 纳米金粒子可能起到了类似于聚合酶β亚基的作用, 提高了DNA聚合酶的延伸能力; 而过量纳米金对PCR的抑制作用可能与纳米金结合单链DNA产生的位阻效应有关。

为了研究在不同方位探测光声信号对光声层析成像的影响, 采用了数值仿真计算, 得出了在有限角度扫描的情况下, 吸收体分布与探测方向呈45度夹角时, 成像效果较好; 在条件允许的情况下, 采用全方位探测扫描, 其成像效果最好。该研究结果对光声成像扫描轨迹的设计、成像效果评估具有较好的参考价值。

采用CO2激光(波长10.6 μm, 功率10 w, 光束长74 cm)辐照拟微绿球藻(Nannochloropsis sp. YW0980), 辐照时间为30 s、60 s、90 s, 通过测定藻色素、多糖、蛋白质及油脂含量, 研究CO2激光对藻的生物学效应。结果表明: 30 s、60 s、90 s辐照条件下, 对拟微绿球藻细胞生长及代谢产物均有一定的促进作用, 其中CO2激光60 s处理组有利于拟微绿球藻的生长及色素的积累, 但30 s剂量下更有利于多糖、蛋白质及油脂含量的积累, 分别比对照组提高了51.05%(胞外多糖), 289.45%(总多糖)、37.05%、172.16%。

巨噬细胞对病原菌的吞噬以及随后的降解在机体免疫防御中起重要作用。近年来, 对增强巨噬细胞吞噬能力的研究越来越被重视。弱激光具有独特的生物组织学作用特征, 从而调节机体多种功能。本文重点探讨了He-Ne 激光(632.8 nm)照射对巨噬细胞吞噬功能的影响及分子信号调控机理。实验结果表明, 弱激光能够通过激活巨噬细胞内Src激酶增强巨噬细胞的吞噬能力。

在纳米量级上探测药物对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的抑制作用对于揭示药物的功效及肿瘤的有效治疗十分重要。通过高分辨率的原子力显微镜研究了不同浓度的高乌甲素培养的HUVEC的形貌特征, 包括整个细胞的形貌和超微结构的表面膜的差异。从形貌学方面探讨了高乌甲素对HUVEC的抑制作用, 可为临床应用高乌甲素提供依据。结果表明, 我们可以通过HUVEC的形貌参数(例如细胞的峰谷差、平均表面粗糙度)来判断药物的功效, 以及评估治疗效果。

以四尾栅藻(Scenedesmus quadricauda)为研究对象, 应用柳树(Salix babylonica)叶浸提液研究了其对四尾栅藻密度、细胞形态、叶绿素含量及光合效率的影响。结果表明: 各浓度柳树叶浸提液处理组四尾栅藻密度均低于对照组, 且较高浓度浸提液处理组藻密度更低。浓度为10 g/L、20 g/L和30 g/L的柳树叶浸提液对四尾栅藻的最大抑制率分别为47.0%、54.6%和62.3%。根据浓度-效应关系方程, 计算出对应的柳叶浸提液96 h对四尾栅藻的半效应浓度(EC50值)为23.32 g/L。加入柳树叶浸提液后, 四尾栅藻细胞边缘变得不规则, 细胞体变透明, 部分细胞溶解。在柳树叶浸提液作用下四尾栅藻叶绿素a含量始终保持在很低的水平。10 g/L、20 g/L和30 g/L处理组叶绿素含量最低分别为173.12 μg/L、124.18 μg/L、37.62 μg/L。实验开始第1 d后各浓度柳树叶浸提液处理组Fv/Fm显著下降(P<0.01), 第2-4 d柳树浸提液浓度效应较为明显, 大致是浸提液浓度越高, 四尾栅藻PSⅡ最大光合效率越低。

目的: 探讨不同光照强度对金果榄植株光合特性和生长的影响。方法: 设置光照强度为自然光强的100%、52.7%、33.2%和15.8% 四种处理, 测定其光合速率等生理指标、叶绿素、生物产量及活性成分含量的变化。结果: 1.低光照强度处理的光合速率均高于 100%自然光照处理, 33.2%处理最高, 显著地高于52.7%处理和15.8%处理; 2.叶片叶绿素总量(Ch1) 、叶绿素 a (Chl a)、叶绿素 b (Chl b)、类胡萝卜素(Car) 含量随光强的减弱而增大; 3.单叶面积随光照强度的减弱而增大, 比叶重(LMA) 则随着生长光强的减弱而减小; 4.33.2%光强下金果榄块根生物量、浸出物和盐酸巴马汀最高。结论: 虽然金果榄有较强的光适应能力, 但光照过强或过弱均对其生长造成不良影响, 主要体现为光合速率降低, 块根生物量积累下降、活性成分减小等。实验结果表明, 33.2%光强是金果榄植株生长的最佳光照强度。

为选育能够高效降解菜粕硫苷(Glucosinolates, Gls)的菌株, 利用能降解硫苷的益生菌黑曲霉CICC-2238进行N+ 注入诱变。经过两次N+ 注入诱变, 在诱变能量为20 keV, 剂量为60×2.5×1013ions/cm2时, 筛选到一株高效降解Gls的菌株H-109。与出发菌相比较, 其Gls的降解率由28.95%提高到49.88%。结果表明, N+ 注入诱变可以用于菜粕硫苷高效降解菌的选育。

目的: 研究高功率微波(HPM)照射后视网膜感光细胞中膜脂质的分子结构改变, 探讨HPM的损伤机制。方法: 通过显微FT-IR技术观察HPM照射前后大鼠视网膜冰冻切片中感光细胞外节的膜脂质分子特征吸收峰的位移与吸收值差异, 分析脂质分子结构的改变情况。结果: HPM照后外节发生了膜脂质分子特征吸收峰的位移, 并出现=C-H基团和C=O基团数量的下降。结论: HPM照射可导致外节膜脂质结构发生改变, 生物膜可能是HPM效应的主要靶点, 脂质过氧化反应是HPM视网膜损伤的重要机制。

应用MTT法检测了靶向性药物索拉非尼(Sorafenib)分别与阿霉素(ADM)、氟尿嘧啶(5-FU)、顺铂(DDP)和紫杉醇(PTX)等4种化疗药物按照不同给药序贯联合作用对肝癌细胞Bel-7402增殖的影响。结果表明, 索拉非尼与4种化疗药物联用对Bel-7402细胞增殖的抑制作用效果均要好于单独用药, 对细胞的IC50明显低于单独用药。联合用药效果受到给药序贯的影响, 索拉非尼先于化疗药物给药, CI值(除与紫杉醇联用)均大于1, 表现为拮抗效应; 索拉非尼后于化疗药物给药, CI值均小于1, 表现为明显的协同效应。研究结果可供肝癌临床治疗参考, 有助于临床降低用药剂量, 减轻药物毒副作用。

目的: 探讨阿魏酸对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠神经行为学和海马胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响, 分析阿魏酸对小鼠脑的保护作用。方法: 海马CA1区注射微量红藻氨酸(KA)建立痴呆模型, 然后对痴呆小鼠用不同剂量的阿魏酸(FA)灌胃治疗。Morris水迷宫实验观察小鼠行为学变化, 免疫组织化学方法观察GFAP的表达。结果: 与假手术组相比, 模型组学习记忆能力明显降低(P<0.01), GFAP阳性细胞表达明显增多(P<0.01); 与模型组相比, 阿魏酸治疗组学习记忆能力均明显提高(P<0.01), GFAP阳性细胞表达均明显减少(P<0.01)。结论: 用不同剂量的阿魏酸治疗拟AD小鼠后, 小鼠学习记忆能力得到明显改善, GFAP表达得到明显抑制, 起到保护脑的作用。

为了研究沉默FNBP1(formin-binding protein 1)基因对细胞体外增殖以及对细胞迁移能力的影响, 设计并构建了3个靶向FNBP1 siRNA干扰载体(Si-1, Si-2, Si-3), 经酶切和DNA测序鉴定后转染人正常的肝细胞HL-7702。RT-PCR和Western blot检测瞬时转染细胞中FNBP1基因的干扰效率, 筛选出特异高效的RNAi靶点。并用G418筛选稳定表达了RNAi的细胞株, 用XTT法检测细胞体外增殖率, 划痕法检测细胞的迁移能力。结果显示: 酶切和测序结果证明干扰质粒构建正确; 转染特异性的干扰质粒(Si-1、Si-2、Si-3)细胞的FNBP1基因表达量与对照组相比均有所降低, 在蛋白质水平表达也明显受到抑制, 且重组干扰质粒Si-2的干扰效应较强。XTT检测结果表明, 构建的沉默FNBP1重组质粒Si-2能显著抑制HL-7702细胞的体外增殖能力, 但并不直接影响HL-7702细胞的迁移能力。

对大杯香菇中20个(品种和辐射选育新株系)的蛋白质营养价值6项评价指标进行了遗传变异分析、相关性分析和主成分分析。结果表明, 变异系数最大的为氨基酸比值系数分, 达到22.70%; 其次为氨基酸评分, 变异系数为18.08%; 其它变异系数较小分别为化学评分、生物价、营养指数和必需氨基酸指数为4.18%、3.76%、3.37%和3.24%; 在相关性上, 化学评分与氨基酸比值系数分呈极显著的正相关, 必需氨基酸指数与生物价、营养指数和氨基酸评分呈极显著和显著正相关, 生物价与营养指数和氨基酸评分呈极显著和显著正相关, 营养指数与氨基酸评分呈显著正相关, 氨基酸比值系数分与氨基酸评分呈极显著正相关; 主成分分析结果表明, 前3个特征根在6个特征根中累计贡献率达96.07%, 也就是前4个主成分对变异的贡献率达96.07%。在蛋白质营养价值六项指标选择上, 首先对变异大的蛋白质营养价值指标进行选择是及其重要的。在辐射选育新株系选择时, 应注意选择大杯香菇氨基酸比值系数分和氨基酸评分均较高的新株系。

应用15N核素示踪技术, 研究了不同氮肥种类对苋菜硝酸盐积累与分配的关系及氮素的去向。结果表明: (1)苋菜可食部分中茎较叶更易富集硝酸盐, 茎中硝酸盐含量为叶中的1.5倍左右, 施用硝态氮肥苋菜叶与茎中的硝酸盐含量都偏高。(2)苋菜硝酸盐主要来源于土壤, 达到80%以上, 而来自肥料部分不足20%。(3)苋菜施用尿素其肥料利用率达到46.27%, 土壤残留氮素达到17.01%, 均高于硫铵与硝酸钠, 尿素损失率为40.32%, 远低于硫铵与硝酸钠, 表明施用尿素有利于土壤氮素储量的保持和提高。

以马哈利樱桃茎段为实验材料, 研究不同浓度硝酸稀土(RENO3)对其组培苗生长发育及生理作用的影响, 结果表明: 在马哈利樱桃茎段培养的分化培养基上添加不同浓度的RENO3(5 mg/L～20 mg/L), 有利于芽分化和组培苗的生长, 提高叶片中超氧化物歧化酶(SOD), 过氧化物酶(POD)活性及叶绿素含量; 其中RENO3浓度为20 mg/L时, 是马哈利樱桃组培苗的最适生长浓度。

用Cd2+浓度0(对照)、25、 50、75 mg/L分别处理9个高羊茅品种种子, 测定供试品种种子发芽势、发芽率、幼苗苗高、根长、鲜重、叶绿素含量、丙二醛含量、质膜透性等8项指标, 比较9个品种耐镉性。结果表明: 与对照相比, 在不同浓度Cd2+胁迫下, 家园的发芽势和发芽率以及麦哲伦鲜重呈先略上升后下降趋势, 其余品种的均呈下降趋势; 9个高羊茅品种幼苗根长、苗高、叶绿素含量均呈下降趋势; 9个高羊茅品种丙二醛含量和质膜透性均呈上升趋势。对测定的8项指标进行综合评价结果显示: 在Cd2+ 25 mg/L胁迫下, 9个品种耐Cd2+性由强到弱的顺序为热浪＞翠碧A＞里园2号＞缤狗＞麦哲伦＞家园＞宇宙星＞回报＞爱瑞3号; 在Cd2+50 mg/L胁迫下, 耐Cd2+性的顺序为热浪＞翠碧A＞缤狗＞麦哲伦＞里园2号＞家园＞宇宙星＞爱瑞3号＞回报; 在Cd2+ 75 mg/L胁迫下, 耐Cd2+性的顺序为热浪＞缤狗＞里园2号＞翠碧A＞家园＞麦哲伦＞爱瑞3号＞宇宙星＞回报。所以, 在治理Cd2+污染土壤时, 要根据污染严重程度, 合理选用高羊茅品种。

本文采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术研究了吡虫啉对不同发育阶段星豹蛛酯酶同工酶活性的影响。结果表明, 星豹蛛酯酶同工酶酶带可分为三个区域, 其中EST-3区的酶带颜色最深, 酶活性最强; EST-1区和EST-2区酶带颜色较浅, 酶活性较弱。星豹蛛不同发育阶段酶带数由多到少的顺序为: 雌成蛛＞卵袋＞雄成蛛＞若蛛, 酶活性由强到弱的顺序为: 雌成蛛＞雄成蛛＞若蛛＞卵袋。农药处理星豹蛛后, 其酯酶同工酶活性受到了不同程度的抑制, 且随着吡虫啉浓度的增大, 同一发育阶段和同一性别的星豹蛛酶带的颜色逐渐变浅, 边缘逐渐变模糊。在体和离体施药方法对酶活性的影响研究结果可知, 在体施药与对照组差异不显著; 离体施药后, 只在EST-3区出现酶带而且颜色较浅, 说明离体施药对星豹蛛酯酶同工酶酶活性的抑制作用较在体更强。研究结果表明, 蜘蛛施用杀虫剂后通过抑制酯酶同工酶对毒物的消化, 从而降低杀虫剂对其毒害作用, 提高耐药能力。本研究结果为探讨蜘蛛对杀虫剂的抗性生化机制, 合理使用杀虫剂以及协调生防与化防的关系具有重要意义。

目的: 通过对长沙汉族人群TGFB1的多态分布规律的研究, 从遗传流行病学的角度探讨TGFB1 SNPs(单核甘酸多态性)与长沙汉族人群脑卒中的关系。方法: 应用PCR、RFLP及DNA直接测序等方法对研究人群进行-509C>T及+869T>C基因分型。研究对象包括: 脑梗死(CI)患者186例,脑出血(CH)患者202例, 正常对照人群160例。结果: 脑梗死组(CI)和脑出血组(CH)分别与对照组比较, -509C>T和+869T>C基因型及等位基因频率分布无统计学差异(P>0.05), 有脑梗死家族史的患者(FCI组)与对照组比较, -509T等位基因携带者及+869C等位基因携带者频率较高(P<0.05), 其中-509T携带者脑梗死的患病风险为对照组的1.557倍, +869C携带者脑梗死的患病风险为对照组的1.45倍。结论: TGFB1-509C>T及+869T>C与有脑梗死家族史的长沙汉族人群脑梗死发病可能相关, 但与有脑出血家族史的长沙汉族人群脑出血发病无关, -509T和+869C等位基因可能是有脑梗死家族史的长沙汉族人群脑梗死发病的危险因子。

利用SRAP分子标记, 从88对引物中筛选出34对引物组合, 分析砀山酥梨母本与授粉品种之间的亲缘关系, 探讨梨授粉品种亲缘关系对砀山酥梨石细胞含量的影响。结果表明: 授粉品种紫酥、鸭梨和马蹄黄与砀山酥梨亲缘关系较远, 授粉品种华山、幸水和圆黄与砀山酥梨亲缘关系较近; 砀山酥梨自然授粉果实石细胞含量为0.61%; 选用紫酥、鸭梨和马蹄黄作授粉树时, 果实石细胞含量分别为0.34%、0.33%、0.36%, 低于自然授粉的砀山酥梨; 选用华山、幸水和圆黄作授粉树时, 果实石细胞含量分别为0.84%、0.70%、0.66%, 高于自然授粉的砀山酥梨。选用与砀山酥梨亲缘关系较远的梨品种作授粉树可减少砀山酥梨石细胞含量, 改善口感。

对饭包草大粒种子萌发过程中胚结构变化、养分运输和消耗的细胞学过程进行了观察。结果显示: 种子萌发时萌发孔盖张开, 胚根、胚芽、胚轴、子叶鞘和子叶柄突破种皮生长, 子叶片呈球状留在胚乳内吸收营养; 透射电镜观察显示胚乳养分运输主要通过传递细胞运输、穿壁运输、胞间通道运输三种方式; 细胞内养分消耗过程是细胞程序性死亡的过程, 多膜小体的形成是细胞程序性死亡和养分消耗的主要形式。

8-甲氧补骨脂素(8-MOP)联合UVA辐射(即光化学疗法PUVA)因诱导皮肤光损伤的副作用, 常被用于实验动物皮肤光损伤模型的构建。为研究维生素C (Vc) 对皮肤光损伤的保护效应, 本研究在Balb/c小鼠背部皮肤涂抹0.1% 8-MOP溶液1 h后进行UVA辐照(10 J/cm2)。然后分别涂抹7.5%、15%和30%浓度的Vc溶液的进行光保护治疗, 利用光学相干层析成像分析皮肤厚度和光信号衰减的变化, 从而评估Vc对皮肤的光保护作用。结果显示, 相对于溶媒组, Vc治疗组皮肤厚度减小, 光衰减系数增加, 其中15%效果尤为明显。结果表明, 局部涂抹Vc溶液具有一定的光损伤保护效应。

随着光动力学疗法(photodynamic therapy, PDT)基础研究的不断深入和临床应用的广泛开展, 根据患者的个体差异寻求高性能的光敏剂和精确量化光动力剂量, 已成为亟待解决的难题, 并日渐成为PDT研究的热点。以ZnS包裹的CdSe量子点(CdSe-ZnS)作为光敏剂, 以人前髓细胞(早幼细胞)株HL60为研究对象利用自行设计的光动力疗法反应室进行了PDT实验研究, 获得了HL60细胞的最佳灭活参数: 量子点浓度为2.0×10-6 mol/L, 光剂量为18 J/cm2。实验结果表明, 在此参数情况下, 对HL60细胞的灭活效率可以达到82.9%。

以红鲫为研究材料, 采用DAPI荧光染料对脱膜的红鲫胚胎进行染色, 在荧光体视显微镜下观察红鲫胚胎早期卵裂到囊胚发育的过程。结果表明, 该染色方法操作便捷, 能更清晰的观察到胚胎发育的外形。值得一提的是: 该方法较光学显微镜观察能清晰的观察到核DNA在细胞中的定位, 如囊胚期能观察到早期卵裂细胞正进行频繁的有丝分裂等。该方法的获得为研究鱼类早期胚胎发育及相关细胞分裂特征提供了有意义的途径。

Foxp4为Fox基因家族的一员, 目前研究发现其与肺、肠、心脏以及中枢神经系统的发育有关。为了在斑马鱼模型中进一步研究该基因的功能, 有必要制备其多克隆抗体。按照巢式PCR原理, 经过两次PCR扩增出亲水性和特异性均好的斑马鱼Foxp4基因片段, 将其克隆入表达载体pGEX4T-1, 转化至大肠杆菌BL21中, 再通过IPTG进行诱导表达GST-Foxp4融合蛋白。融合蛋白先经谷胱甘肽琼脂糖珠亲和纯化, 再经切胶纯化回收, 然后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体, 分别进行Western-blot实验检测抗体效价和特异性。所得结果显示获得了较高效价和特异性好的斑马鱼Foxp4多克隆抗体, 为Foxp4功能的进一步研究奠定了基础。

以甜叶菊为试材, 对影响其RAPD反应体系的7个因子进行优化。结果表明, 20 μL的优化体系包括: 双蒸水13.6 μL, 10×Buffer(含15 mmol/L MgCl2)溶液3 μL, 2.5 mmol/L的dNTPS 1.2 μL, 10 μmol/L的引物1 μL, 20 ng的模板DNA 1 μL, 1 U Taq聚合酶; 热循环程序为: 94 ℃ 预变性4 min, 94 ℃变性30 s, 35 ℃退火30 s, 72 ℃延伸1 min, 40个循环, 最后72 ℃延伸7 min。

本研究对比Q开关翠绿宝石755 nm激光和Q开关Nd: YAG1 064 nm激光治疗太田痣的疗效和差别, 探讨分析原因。分别用Q开关翠绿宝石755 nm激光和Q开关Nd: YAG1 064 nm激光治疗637例太田痣患者, 观察患者治疗前后疗效, 根据色素减轻百分比进行评定。结果表明Q开关翠绿宝石755 nm激光和Q开关Nd: YAG1 064 nm激光均能安全有效的治疗太田痣, Q开关翠绿宝石755 nm激光治疗太田痣297例, 显效率为83.5%, Q开关Nd: YAG1 064 nm激光治疗太田痣340例, 显效率为86.76%, 显效率没有统计学差异。但Q开关翠绿宝石755 nm激光对褐色太田痣疗效较高: 755 nm组褐色显效率为91.62%; 1 064 nm组显效率为77.84%, 统计学差异有显著性, 而Q开关Nd: YAG1 064 nm激光对蓝色太田痣疗效较高: 755 nm组蓝色显效率为80.54%; 1 064 nm组显效率为92.86%, 统计学差异有显著性, 且1 064 nm组术后发生色素沉着较755 nm组少。