光动力疗法是效果很好的癌症微创治疗方法, 主要依靠光敏性药物(也称为光敏剂)进行癌细胞杀伤。在光动力治疗中, 光敏剂单态氧产率是影响光动力效果的关键因素。利用纳米金的光学特性来提高光敏剂的单态氧产率为研制新型光敏剂来改进光动力治疗方法提供了一种新的途径。利用绿光LED灯、红光LED灯、氙灯和635 nm连续激光四种光源对混合有光敏剂原卟啉Ⅸ和纳米金的溶液进行光照。用单态氧检测试剂测定了光照后的单态氧产率。

为了研究激光照射后角膜蛋白质化学组成的改变, 探讨激光角膜损伤的发生机制, 将日本大耳白兔随机分为正常对照组和激光损伤组, 选取角膜上皮层和基质层作为研究对象, 通过傅里叶变换红外光谱技术(Fourier transform infrared spectroscopy, FT-IR)对角膜组织酰胺I带中蛋白质二级结构各吸收峰进行定量分析, 观察激光照射后蛋白质分子结构的改变情况。结果显示, 激光照射后出现蛋白质二级结构吸收峰的位移和积分百分比的改变。激光照射可使角膜上皮层和基质层蛋白质构象发生改变, 从而导致蛋白质结构稳定性下降和蛋白质生物功能的破坏。

本研究以褐色高温单孢菌(Thermomonospora fusca)为出发菌株, 通过紫外线和60Co-γ射线联合诱变, 获得了一株纤维素酶高产菌株AV8, CMC酶活力达到0.679 IU/mL, 与出发菌株相比, 其产酶能力提高3.53倍。通过对AV8产纤维素酶的培养条件进行测定, 结果显示: 产纤维素酶最适应温度为55 ℃; 该菌的最适产CMC酶初始PH值为7.0, 最适产FPA酶初始PH值为8.0; 当培养到第7天时, 产CMC酶达到高峰。当培养到第8天时产FPA酶达到高峰。

选用“ML7113”小麦幼苗为材料, 分别采用He-Ne激光(5mW·mm-2)和增强UV-B(10.8 kJ/m-2·d-1)辐射以及两者的复合辐照进行处理, 利用PAM-2100便携式叶绿素荧光仪测定小麦幼苗在不同处理天数(5、6、7、8)下叶绿素荧光特性的变化。结果表明: 增强UV-B辐射后, 随着处理时间的延长, 小麦幼苗的Fo、Fm、Fv/Fm、qP、ФPSⅡ、叶绿素含量的值均逐渐下降, qN值均逐渐升高, 从而不断减弱小麦幼苗的叶绿体荧光特性; 而低剂量的He-Ne激光辐照后能够在一定程度上修复经UV-B辐射后对小麦幼苗叶绿素荧光所造成的损伤。

P38有丝分裂原激活蛋白激酶(MAPK)在肿瘤的发生发展中的作用仍然存在争议。实验结果显示, P38α/β特异性抑制剂SB202190可以显著增加黑色素瘤细胞的倍增时间、降低细胞的微核率, 但对γH2AX foci的形成和克隆存活率并没有明显影响。提示P38α/β可能不影响人黑色素瘤细胞的DNA损伤修复能力及细胞的辐射敏感性, 而是通过提高细胞的增殖速率、增加基因组不稳定性来促进人黑色素瘤细胞的恶性发展。

目的: 研究雌孕激素对ALI大鼠II型肺泡上皮细胞钠通道(epithelial Na+ channel, ENaC)α亚基, 血清脑钠肽(brain natriuretic peptide, BNP)和 肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)表达的影响, 探讨肺泡内液体清除的机制。方法: 雌性未成年SD大鼠30只, 随机分为3组: 对照组(静脉注入生理盐水8 mL/kg)、ALI模型组(静脉注入油酸0.1 mL/kg)、雌孕激素联合组(在油酸注入前12 h、36 h皮下注射1∶1 000雌孕激素混合液0.1 mL)。建模后6 h处死大鼠, 观察肺组织病理改变, 测定肺湿重/干重比值、肺系数, 肺组织匀浆中α-ENaC mRNA及蛋白的表达及血清BNP、TNF-α的表达。结果: 与对照组比较, 模型组出现明显肺水肿、出血及炎性细胞浸润, 肺湿重/干重比值、肺系数及血清中BNP、TNF-α表达增加, 而α-ENaC mRNA及蛋白明显降低(P<0.01); 雌孕激素联合组与ALI模型组比较, 肺水肿、出血及炎性细胞浸润要轻, 肺湿重/干重比值、肺系数、BNP下降, α-ENaC mRNA及蛋白增加(P<0.05)。结论: 雌孕激素联合治疗可上调α-ENaC mRNA及蛋白的表达, 减少BNP表达, 促进肺泡内液体的清除, 为ALI/急性呼吸窘迫综合症(ARDS)的治疗和监控提供新的方法。

具有核苷酸结合位点(nucleotide binding site, NBS)的抗病基因在植物抵抗各种病原菌侵染中起关键作用。对玉米全基因组中具有NBS结构的基因进行鉴定和分析, 并结合水稻、高粱、拟南芥、百脉根、苜蓿和杨树的NBS类基因比较其在数量、复制、染色体定位和亲缘关系上的进化差异。发现玉米NBS类基因数量、复制数和成簇基因数均明显少于其他植物。低复制频率可能导致玉米NBS类基因较少, 并推测可能导致其功能具有多样性。在基因染色体定位上, 除高梁外, 玉米与其他五种植物相似, 呈不均衡分布。此外, 进化树分析表明玉米NBS类基因与高粱的亲缘关系最近, 与拟南芥的最远, 在物种间表现出较高的保守性。结果对掲示玉米NBS基因的进化特点与发掘有益的NBS类抗病基因提供了重要的理论依据。

提取35%VFI组、65%VFI组和自由采食组三个不同营养水平下的绵羊附睾头组织总RNA, 应用Real-Time PCR方法检测附睾头中GPx5 mRNA的表达规律, 利用免疫组化技术对附睾头GPx5进行定位分析。结果表明: GPx5 mRNA在附睾头的表达水平由低到高依次为: 35%VFI组<65%VFI组<自由采食组; 通过细胞免疫荧光分析检测到在附睾头上皮细胞有阳性产物。说明GPx5在不同营养水平下具有表达差异性, 低营养水平显著影响了附睾头GPx5的表达。

Dmc1基因是一个在减数分裂前期Ⅰ表达的基因, 其表达产物为减数分裂时同源染色体配对所必需。本实验根据普通红鲫Dmc1基因编码阅读框(ORF)序列设计引物, 克隆了改良红鲫Dmc1基因(命名为IRCC-Dmc1)的ORF序列并将之插入到cDNA5-FRT/TO载体中, 构建了改良红鲫Dmc1基因表达载体FRT/TO-IRCC-Dmc1-Myc。以FRT/TO-IRCC-Dmc1-Myc质粒转染HEK293T细胞, 蛋白印迹杂交实验检测到改良红鲫Dmc1基因在HEK293T细胞中有着正确的表达。本文为将来进一步研究改良红鲫Dmc1基因的功能打下了基础。

本研究采用PCR-SSP与PCR-SBT方法对正常健康对照组与血吸虫病感染组、血吸虫病性重度肝纤维化病人组和轻度肝纤维化病人组中MICA/B基因进行分型, 并比较各组基因的多态性。结果在血吸虫感染组与健康对照组中共发现13种MICA等位基因和5种MICA-STR基因型, MICA*012: 01(11.58% vs 5.83%)、MICA*017(2.11% vs 0.00%)及MICA*027(3.16% vs 0.97%)在对照人群组较血吸虫病人组中分布频率较高, 但Pc值显示没有统计学意义(Pc>0.05)。MICA-STR型别分析显示, MICA-STR与血吸虫病易感没有相关性, 但MICA*A5基因型的分布频率在重度肝纤维化组显著高于轻度肝纤维化组 (45.10% vs 26.92%, Pc<0.05)。在血吸虫病人组中一共检出10种MICB等位基因。在本研究人群中未发现与日本血吸虫感染显著相关的MICB等位基因。同时MICB等位基因多态性在重度纤维化组、轻度纤维化组、以及正常对照组相互之间均无显著的相关性。研究显示在血吸虫病人组中, MICA和MICB具有连锁不平衡, 其中单倍型MICB*008-MICA*002: 01和MICB*014-MICA*045在血吸虫病人组中显示具有显著的连锁不平衡。

流感病毒M2(基质蛋白2)是A型流感病毒的一个高度保守的蛋白。由于其免疫原性较弱, 本研究采用M2 DNA疫苗初免-蛋白加强的策略来考察M2的免疫保护效果。制备A/Chicken/Jiangsu/07 /2002(H9N2)流感病毒的M2 DNA疫苗以及经大肠杆菌表达的去除M2跨膜区的M2蛋白即sM2。以SPF级BALB/c小鼠为模型, 电击法免疫M2 DNA疫苗, 滴鼻法免疫sM2蛋白, 免疫间隔三周, 并于末次免疫后三周以致死量5LD50流感病毒H9N2攻击小鼠, 通过检测小鼠存活率、体重丢失率、肺部病毒滴度及IgG抗体水平等指标来评价免疫的保护效果。实验结果表明, 基于M2的疫苗采用DNA疫苗初免蛋白加强免疫二次的免疫程序能诱导较高的特异性抗体, 明显减轻小鼠流感病症, 提供完全的保护。

在毕赤酵母发酵生产S-腺苷蛋氨酸(SAM)的诱导阶段, 以不同甘油-甲醇比例的甘油-甲醇混合培养基进行诱导培养, 结果表明以10% (w/v)甘油含量的甘油-甲醇混合培养基进行诱导培养时最有利于SAM的表达, SAM产量达6.09 g/L, 比0%甘油含量条件下的SAM产量提高了20.4%。对诱导方式进行优化, 先以100%甲醇诱导24 h, 然后再连续流加10% (w/v)甘油含量的甘油-甲醇混合培养基, SAM产量可达7.94 g/L, 在此基础上, 进一步改进诱导方式, SAM产量得到进一步的提高, 达到9.80 g/L。

为控制山鸡椒挥发油的质量, 通过水蒸气蒸馏法分离出山鸡椒挥发油, 利用GC-MS建立了山鸡椒挥发油的指纹图谱, 并运用主成分分析和聚类分析对指纹图谱进行模式识别研究。结果显示16批样本图谱共匹配出27个共有峰, 以此27个峰为评价指标, 样本的相似度均大于0.98。对27个共有峰中的18个峰进行了定性, 以此18个峰为评价指标, 方法学考察结果较好, 主成分分析和聚类分析结果基本一致。表明该方法建立的GC-MS指纹图谱具有良好的稳定性和可靠性。同时, 模式识别显示不同产地间和同一产地内的山鸡椒挥发油都存在差异。

Zeste同源染色体2增强子基因(EZH2)在人类乳腺癌中过度表达, 它可以被视为一个检测肿瘤的发展和转移的生物标记物。传统技术检测或定量特异性基因表达存在一些缺点, 因此, 本研究拟开发电致化学发光(ECL)技术来检测和量化EZH2 mRNA的表达量。在本研究中, 用生物素和三(2, 2 - 联吡啶)钌(II)(TBR)分别标记在PCR引物的5′ 末端上, 用作扩增靶基因, 扩增产物用ECL系统进行检测。我们用癌细胞作为模型分析了该方法的有效性和灵敏度, 并且将其应用于25例乳腺癌的临床样本中EZH2基因表达量的检测。检测结果表明, EZH2基因在肿瘤细胞系中过量表达, 而在正常血细胞中则低表达。最重要的是, 在25例临床乳腺癌样品中发现10例样品(40％)的EZH2 mRNA过度表达。此方法提供了一种新的工具来评估EZH2基因在乳腺癌中的表达水平, 且有可能成为一种快速、简便和灵敏的乳腺癌检测和诊断方法。

本文讨论了正常乳房组织与肿瘤组织的微波吸收差异, 从理论上证明了利用微波热声成像技术检测乳腺肿瘤的可能性; 建立了一套三维热声扫描系统, 并利用此系统对模拟肿瘤和真实离体肿瘤进行成像实验。实验结果表明, 三维微波热声成像系统能对乳腺肿瘤高分辨率高对比度成像, 有希望应用于早期乳腺肿瘤检测。

光声治疗是一种利用纳米材料的光声效应选择性破坏癌细胞的方法。本研究采用叶酸作为肿瘤靶向分子, 以聚乙二醇包裹吲哚菁绿形成纳米粒子(ICG-PL-PEG-FA), 利用此纳米粒子在近红外区的光吸收特性, 开展光声治疗研究。实验结果表明, 这种叶酸标记的纳米探针对高表达叶酸的EMT6细胞具有高靶向选择性和靶向光杀伤性。这种基于包含吲哚菁绿纳米探针的光声治疗将有潜力发展为一种安全, 高效的癌症治疗技术。

目的: 研究新型微等离子体射频技术治疗瘢痕的效果。方法: 50例成熟瘢痕患者, 包括31例痤疮疤痕, 19例外伤或手术疤痕。均采用微等离子体射频技术进行功率为70～90Watt 的滑动式或定点式治疗, 每4周治疗一次, 共治疗2～5 次, 通过治疗前及治疗后3个月统一衡量标准对比来进行疗效评估。结果: 成熟瘢痕表现为身体各部位分布形状不规则形状皮肤组织凹陷或轻度增生。通过临床指标评分, 50例患者总有效率为82%。疗效显著18例(36%), 有效22例(44%), 轻微改善11例(22%), 无效9例(18%)。结论: 微等离子体射频技术能显著改善成熟瘢痕的色泽、质地和凸凹程度, 不良反应少, 是治疗成熟瘢痕的有效方法。

目的: 观察分析经尿道前列腺电切(TURP)联合输尿管镜钬激光碎石术治疗前列腺增生症(BPH)合并膀胱结石的效果。方法: 本组61例患者先行膀胱结石钬激光碎石, 然后采用经尿道前列腺电切术(TURP)治疗前列腺增生症。结果: 61例一次性治疗成功, 术后结石无残留, 排尿情况较前明显改善, IPSS评分均分由24.4分降到9.4分, 最大尿流率由7.2 mL／s上升到19.5 mL／s。结论: 钬激光碎石及TURP同期治疗前列腺增生合并膀胱结石是安全有效的方法。