基于表面增强拉曼散射（SERS）的免疫层析检测技术是一种前沿研究技术，主要利用纳米材料制得的SERS标志材料取代传统的胶体金，综合了SERS高通量、高灵敏度和免疫层析简便、快速的双重优势，满足了定量检测的需求。其中，高性能纳米材料是SERS免疫层析技术实现高灵敏度检测的关键，研究人员通过设计和优化纳米材料的粒径、形态、结构等制备出具有强SERS增强性能的SERS基底，以提高检测灵敏度。本文首先介绍了SERS免疫层析技术的基本原理；然后，综述了用于SERS免疫层析技术的几种SERS基底以及SERS免疫层析技术在不同检测物质中的应用；最后，讨论并展望了SERS免疫层析技术未来发展趋势。

为了快速准确地鉴定出 3种不同的马铃薯(Solanum tuberosum L.)病原菌，即致病疫霉(Phytophthora infestans)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)和茄链格孢菌(Alternaria solani)，根据 GenBank中的这 3种病原菌基因序列设计特异引物，从影响多重聚合酶链式反应(PCR)扩增的因素(如退火温度和引物浓度)对反应体系进行优化，建立能够同时检测 3种马铃薯病原菌的多重 PCR方法。结果显示，所建多重 PCR方法的检测限为 40.0 fg/μL，灵敏度较高，且具有良好的特异性。该检测方法实现了同时对 3种马铃薯病原菌的高效、快速的检测，提高了检测效率，降低了检测成本，在马铃薯病害的早期预防、诊断及防控中具有较高的应用潜力。

昆虫嗅觉相关蛋白在其觅食、交配、防御、产卵、信息交流、栖息地选择等行为及生理活动方面起着十分重要的作用。荧光竞争结合试验是目前用于检测昆虫气味结合蛋白(OBPs)和化学感受蛋白(CSPs)与外界环境气味分子结合特性的典型方法。本文对荧光竞争结合试验在昆虫OBPs和CSPs上的相关研究及应用进行综述, 为深入了解昆虫嗅觉识别机制、制定害虫防治和经济昆虫保护策略提供理论参考。

缺磷已成为目前制约作物产量提高的非生物胁迫之一, 筛选作物耐低磷资源, 进行作物耐低磷育种已成为作物科学当前研究的热点之一, 因此植物体内磷含量的及时有效的监测也变得尤为重要。本文通过改良前后的钼锑抗比色法测定谷子新鲜幼嫩叶片和幼嫩根系的组织磷含量, 发现改良后的钼锑抗比色法所测的磷含量在一定范围内有良好的线性关系, 线性方程为y=1.060 3x-0.010 3, 线性相关系数达0.998 1。用该方法对谷子新鲜幼嫩叶片、幼嫩根系、成熟叶片、成熟根系、新鲜幼穗、成熟茎秆及液氮冷冻后的相应组织和谷子籽粒的磷含量以及不同磷浓度处理下(0.005、0.250 mmol/L)的谷子材料的磷含量进行测定, 进一步证实了其具有良好的灵敏度和精密度。该方法所测得的标准偏差较小, 在0~0.015 8范围之内; 相对标准偏差(RSD)的范围在0%~1.81%; 检出限的范围在0~0.047 4 μg/mL, 重复性较好,利用该方法还可有效地筛选具有磷吸收效率差异的谷子品种。改良后的钼锑抗比色法测定结果线性良好, 标准差低, 精密度很理想, 适合植物中低浓度磷的测定, 可为不同谷子材料总磷测定提供依据和参考。

研究建立了一种有别于传统火试金的分离富集方法——小火试金分离富集矿石中的金, 并采用火焰原子吸收光谱仪对金含量进行检测的方法。 在小火试金条件的选择中, 分别对小火试金熔剂比例、 灰吹温度、 保护剂用量进行了讨论, 确定了这三个参数的最佳值分别为: 硼砂-纯碱-黄丹-淀粉比例5∶5∶10∶1, 900 ℃, 10 mg, 将3 g样品经焙烧后, 在最佳小火试金条件下分离富集金, 铅扣经灰吹得到金、 银合金粒, 经稀硝酸溶解后, 加入盐酸将银与金分离, 用火焰原子吸收分光光度计对溶液中的金进行测定, 工作中探讨了原子吸收光谱仪测定金的各种影响因素, 包括仪器参数优化、 线性范围、 干扰离子等。 干扰实验表明其他共存贵金属元素对金的测量不产生影响, 在选定的仪器条件下, 对标准样品及某矿送检的金矿石样本中的金进行测定, 结果与标准值一致, 相对标准偏差(n=11)在0.72%～5.49%之间, 方法回收率在98.82%～99.20%之间。 此方法稳定可靠, 准确度高, 对0.X~XX.0 mg·kg-1的矿石中金含量均适用, 拓展了火焰原子吸收测量金的含量范围, 并且大大降低了传统火试金法对人及环境的伤害和污染, 原子吸收光谱法具有响应快、 灵敏度高、 准确性好等优点, 为进一步研究用此法开展其他贵金属的检测奠定了技术基础。

目的: 制备分泌特异性抗人甲状腺球蛋白(thyroglobulin,Tg)单克隆抗体的杂交瘤细胞株, 为建立高灵敏度的Tg检测方法做准备。方法: 以天然人源甲状腺球蛋白为抗原经皮下免疫BALB/c小鼠, 通过细胞融合制备分泌抗人甲状腺球蛋白单克隆抗体, 并对其进行特异性鉴定, 建立检测Tg的双抗体ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)夹心法。结果: 获得7株可稳定分泌抗人甲状腺球蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株, 经ELISA鉴定, 筛选抗体可与Tg抗原有良好的特异性反应。建立的双抗体夹心ELISA方法敏感性可达1 ng/mL。 结论: 成功制备了抗人Tg单克隆抗体并建立了检测人Tg双抗体夹心ELISA方法, 为进一步研发Tg快速诊断试剂盒提供了原料。

石油的开采、 运输、 泄漏及石油产品使用量的不断增加, 导致了严重的土壤石油污染, 改变了土壤的理化性质, 引起土壤中的微生物大量死亡, 影响植物的正常生长, 并能通过皮肤、 呼吸、 饮食等方式进入人体, 危害健康。 因此, 土壤石油污染的修复刻不容缓, 但修复效果的评价离不开土壤中残留石油的提取和检测, 建立快速高效的石油提取和分析测定方法是非常重要的。 该研究讨论了检测波长、 提取剂种类、 提取剂用量以及超声萃取次数、 萃取时间、 超声萃取功率等影响污染土壤中总石油烃提取的参数和变量, 最终建立了一种超声萃取-酶标仪-微量法提取检测污染土壤中总石油烃的方法。 确定优化的提取和检测条件为: 紫外检测波长为304 nm, 用石油醚作提取剂, 土液比为1∶4, 超声萃取2次, 每次萃取时间为20 min, 超声萃取功率为100 W。 该优化条件下, 土壤石油添加回收率是88.4%～101.6%, 相对标准偏差均小于4.7%, 提取测定结果符合环境分析化学检测要求。 利用酶标仪代替紫外分光光度计进行检测, 能更方便快速的得出结果, 且测定溶液用量少, 可以更好地推广应用于微量石油污染环境样品的定量检测。 此外, 该方法用石油醚和乙醇作为提取和定容试剂, 克服了采用二氯甲烷、 四氯化碳等有机试剂提取而造成溶剂消耗量大、 易产生二次污染、 不利于环境友好发展等缺点, 是一种快速、 高效、 绿色的提取和测定污染土壤中总石油烃的方法。

目的: 高效表达与纯化可溶性重组人PCT蛋白, 制备高灵敏度和高特异性的抗人PCT医用诊断单克隆抗体。 方法: 大肠杆菌表达重组人PCT蛋白后, 利用饱和硫酸铵沉淀和亲和层析方法纯化PCT蛋白后, 经质谱、Western blot和间接 ELISA法进行性质鉴定和分析重组蛋白的表达与免疫反应性; 重组蛋白免疫小鼠, 经细胞融合及筛选制备抗PCT单克隆抗体(mAb)。 结果:在大肠杆菌中高效表达了人PCT蛋白; 重组人PCT蛋白具有良好的免疫反应性与免疫原性; 经筛选获得7株抗PCT单克隆抗体细胞株, 经ELISA鉴定, 筛选抗体可与PCT抗原有良好的特异性反应。 结论: 利用重组人PCT蛋白免疫制备了抗人PCT单克隆抗体, 为进一步研发PCT快速诊断试剂提供了原料。

红外(IR)光谱近年来逐渐展示了它在生物医学领域中的应用,它不但能很好地用于体外酶催化活力分析和酶抑制剂的筛选,尤其可对活细胞进行原位酶活力测定和抑制剂筛选.IR光谱技术可用于生物酶活力的直接检的基本原理是基于单位时间内,反应物或者产物在IR光谱中特征吸收峰的峰位或强度的变化量来反映生物酶的催化效率.本文综述了利用IR光谱技术,对体外部分酶活力值进行分析和测定、以及对酶抑制剂的抑制效应进行评估和筛选;进而将该技术扩展至以活体细胞作为检测模型、开展细胞内生物酶活力值的测定及其抑制剂的筛选.同时,我们也对新近提出的在细胞原位测定酶活力的IR 方法及研究理念作了概述,生理条件下开展对生物酶活性无标记直接检测提供了新方法,并对该技术领域存在的问题及今后的发展趋势作出了展望.