血管生成素 4(ANG4)是一种新型抗菌肽蛋白, 具有抗菌、抗炎、血管生成、调节机体免疫反应等多种生物学功能, 在机体先天免疫过程中发挥重要的作用。 ANG4在新生小鼠肠道的表达受到多种因素的调节, 如细菌信号和发育过程等。本试验选取细菌细胞壁表面分子的类似物壳寡糖( COS)作为诱导物, 探究其对小鼠肠道 ANG4表达和对肠道形态的影响。实时荧光定量聚合酶链式反应( qRT-PCR)和蛋白质免疫印迹( Western blot)分析表明, COS能增加小鼠肠道 ANG4 mRNA及 ANG4蛋白的表达；形态学观察结果显示, COS使小肠绒毛高度明显增加, 平均隐窝深度均有降低, V/C值增加, 表明 COS可通过诱导 ANG4等抗菌蛋白的表达, 或通过其杀菌和免疫调节作用而不同程度地提高小肠黏膜的完整性。研究结果为 COS以及 ANG4在仔猪肠道疾病防治的应用提供了理

TGF-β信号家族在生物体生命活动中具有多种发育和生理功能。研究该信号家族在生物体内的表达模式具有重要的意义。gbb是TGF-β信号成员bmp7的果蝇同源基因,为了进一步研究gbb对胚胎发育的影响, 本文采用DNA免疫技术制备得到果蝇GBB多克隆抗体。首先提取果蝇总RNA, 反转录得到cDNA文库,以该文库为模板克隆出gbb基因编码区序列, 构建成真核表达质粒pCAGGS-P7/gbb。采用DNA免疫技术免疫BALB/c小鼠, 取心血分离血清制备了GBB多克隆抗体。免疫印迹试验表明制备的GBB多克隆抗体有效,果蝇胚胎免疫荧光分析表明GBB在果蝇胚胎发育0~9 h无明显表达, 9 h之后开始高效表达。

血管生成素4(ANG4)是一种新型的抗菌肽，主要在哺乳动物的肠道组织表达，具有抗菌和促血管生成等功能，在机体对病原体的免疫过程和血管生成过程中发挥着重要的作用。鉴于该蛋白具有多种功能，ANG4在新生断奶仔猪肠道疾病防治方面具有非常广阔的前景。为了了解ANG4在仔猪肠道的表达特点，我们通过蛋白质免疫印迹、荧光定量PCR和免疫组化分析及其在肠道表达的细胞定位，分别确定了仔猪肠道内ANG4的mRNA、蛋白质表达水平以及在肠道表达的细胞定位。结果显示，ANG4的mRNA和蛋白质在仔猪肠道不同部位的变化趋势大致相同，除mRNA 水平在断奶后有一个明显下降外，mRNA和蛋白质表达水平呈现随着周龄的增加而升高的趋势。ANG4蛋白的表达基本都集中于小肠绒毛，腺窝处也有少量表达，主要的表达细胞为肠上皮细胞以及潘氏细胞。

目的: 本文以糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3 beta, Gsk3β)为研究对象, 探讨Gsk3β基因在红鲫胚胎发育及成体组织中的表达模式, 以及在镉金属胁迫下的分子应答初探。方法: 采用RACE克隆技术获得红鲫Gsk3β cDNA全长, 半定量RT-PCR技术和Western Blot技术分析Gsk3β在mRNA水平和蛋白水平的表达情况, 最后通过特定浓度的镉处理分析Gsk3β的表达情况。结果: 通过克隆发现Gsk3β基因全长为2 195 bp, 5′端非编码区(UTR)共692 bp, 3′非编码区有237 bp。编码含421个氨基酸的蛋白质, 蛋白分子量约为46 846.40, 等电点为9.05, 且与斑马鱼和青鳉的亲缘关系最近。Gsk3β基因在胚胎发育和成体组织中呈现不同程度的表达, 在不同组织中, Gsk3β在大脑组织表达最丰富, 其次在眼睛, 肌肉和精巢中表达相对较高, 在卵巢、肝脏、肾脏和皮肤组织表达量相对较低。在不同发育时期, Gsk3β在两细胞期没有表达, 之后在后续的不同时期呈现差异表达, 出膜期表达最强, 其次为肌效期、体节期、神经胚、囊胚期表达次之, 在黑色素期和体色素期蛋白表达较弱。在镉处理后的红鲫肝脏中检测Gsk3β基因的表达, 发现Gsk3β表达下调。结论: Gsk3β基因在红鲫胚胎发育中起着重要作用, 且参与了镉金属胁迫应答, 但其具体的分子机制仍有待进一步研究。

RegIIIγ是一种新型的抗菌肽, 主要在哺乳动物的肠道和皮肤表达, 具有抗菌、抗炎、调节免疫反应和促进细胞增殖等生理功能。为了解猪RegIIIγ在肠道的表达特点, 我们通过荧光定量PCR、蛋白质免疫印迹和免疫组化分别确定了猪RegIIIγ mRNA和蛋白在仔猪肠道的表达水平以及在肠道表达的细胞类型。结果表明RegIIIγ mRNA和蛋白质在十二指肠、空肠和回肠三个部位的表达水平无明显差异; 除mRNA水平在断奶后有一个明显下降外, mRNA和蛋白质表达水平呈现随着周龄的增加而升高的趋势。免疫组化分析表明RegIIIγ蛋白主要在肠粘膜吸收性上皮细胞和Paneth细胞内表达。

目的：本文主要以金鱼中的dvl-3基因为研究对象,研究dvl-3在金鱼不同的组织和胚胎发育时期中可能行使的功能。方法：采用RACE克隆技术获得金鱼dvl-3基因的cDNA全长,再利用半定量RT-PCR技术和蛋白免疫印记（Western blot）技术分析研究dvl-3基因在mRNA水平和蛋白水平上的表达差异。结果：在金鱼不同组织与胚胎发育时期,dvl-3基因在mRNA水平和蛋白水平上具有显著的表达差异性。结论：由此可见散乱蛋白dvl-3在金鱼不同的组织和胚胎发育时期中可能行使不同的功能,但其具体的功能及机制还有待进一步研究。

采用He-Ne激光生物辐照仪(632.8 nm, 5 mW·mm-2)、UV-B(15.55 KJ·m-2·d-1)及二者复合处理拟南芥幼苗后提取微管蛋白, 考马斯亮蓝法测含量和SDS-PAGE凝胶电泳进行初步分析, 并用免疫印迹鉴定微管蛋白。结果表明: 单独UV-B使微管蛋白解聚, He-Ne激光和UV-B复合处理后, 微管蛋白解聚程度减小, 单独He-Ne激光处理促进微管聚合。因此认为He-Ne激光在一定程度上缓解了UV-B对微管蛋白的解聚作用。

采用HeNe激光(5 mW·mm－2)和增强UVB(10.08 kJ·m－2·d－1)辐照‘ML7113’小麦幼苗，6天后提取各处理组小麦幼苗的总蛋白和TaRAN1蛋白，用SDSPAGE对其进行初步检测及Western Blot对目的蛋白进行鉴定，并采用考马斯亮蓝法测量不同处理组的TaRAN1蛋白的含量以做进一步的比较分析.结果表明：增强UVB辐射使小麦TaRAN1蛋白电泳条带加宽颜色加深且含量显著增加；单独HeNe激光处理，蛋白电泳条带较窄颜色较淡且所测的蛋白含量明显减少，表现出了抑制作用；经HeNe激光辐照和UVB辐射复合处理后，蛋白的含量明显低于B组而与对照组相差不明显.说明增强UVB辐射后，小麦TaRAN1蛋白可能参与了植物的抗逆境反应.