目的:研究探讨5-氨基乙酰丙酸介导的光动力疗法(ALA-PDT)对白血病细胞株HL-60的作用机制。方法: 以白血病细胞株HL-60为实验模型。实验分为2组, 对照组(未处理组)及ALA＋PDT组。利用人全基因组基因表达谱芯片技术研究ALA-PDT后HL-60细胞基因改变情况。 结果: 人全基因组芯片共检测了48 000个基因, 用RT-PCR的方法验证了数据的可靠性, 对芯片结果产生的数据分析发现：ALA-PDT影响了细胞的多种生命进程, 如转录调控, 抑制翻译过程;促进一系列应激反应;上调促凋亡基因的表达, 抑制抗凋亡基因的表达, 促进凋亡的发生。结论: ALA-PDT通过诱导凋亡的方式杀伤HL-60细胞。多种调控机制参与凋亡的发生：c-Abl和PML基因是上调基因网络中的主导基因, 共同参与了凋亡的发生。线粒体途径和TNF途径激活, DEDD2及CDC2L2介导的凋亡通路也占了一定的地位。ERN1、Bcl2、及c-Jun等基因参与其中促进凋亡的发生。

利用表面修饰的方法制备了5-ALA表面修饰的TiO2(5-ALA/TiO2), 并利用傅里叶红外光谱, 拉曼光谱以及紫外-可见光吸收光谱(UV-Vis)对样品进行了表征。利用 Cell Counting Kit-8 (CCK-8)法检测研究5-ALA/TiO2对HL60细胞的灭活效应。结果显示, 5-ALA/TiO2能够显著地抑制HL60细胞的生长, 5-ALA/TiO2对HL60细胞的灭活效率要明显高于5-ALA以及TiO2, 实验中5-ALA/TiO2的灭活效率达到77.9%, 相衬显微镜细胞形态学无损观察表明, 细胞凋亡开始于细胞膜的破裂。同时, 激光显微拉曼光谱检测显示, TiO2纳米粒子能够进入细胞内部, 与细胞发生相互作用。

目的: 本研究观察了5-氨基乙酰丙酸介导的光动力治疗(ALA-PDT)对耐药白血病细胞株HL-60/ADR的杀伤作用及对耐药白血病原代细胞存活率的影响。方法: 以耐药白血病细胞株HL-60/ADR为实验模型, 同时在11例白血病患者原代细胞中进行检测。实验分为4组, 对照组、单纯ALA组、单纯光照组及ALA＋PDT组。用MTT法测定细胞的存活率, 采用阳离子脂质荧光探针JC-1检测线粒体跨膜电位, 用Real-time PCR检测PDT前后HL-60/ADR细胞株中bcl-2基因及多药耐药基因MRP的表达变化。结果: ALA-PDT后HL-60/ADR细胞株线粒体跨膜电位出现快速下降, 0, 2, 4 h时线粒体跨膜电位崩塌的细胞比例分别升高至55.91%±2.60%、64.27%±1.08%、82.17%±0.43%, 与对照组相比皆有显著差异(P＜0.05), 呈时间依赖性。而单纯ALA组和单纯光照组则无明显变化。HL-60/ADR细胞株在ALA-PDT后Bcl-2和MRP基因均呈明显下降趋势。在初发和复发难治急性白血病原代细胞中ALA＋PDT组均显示较强的光动力效应。结论: ALA-PDT诱导的HL-60/ADR细胞的杀伤可能与其影响线粒体跨膜电位有关, 即通过影响线粒体功能促进细胞凋亡。同时表明ALA介导的光动力作用部分是通过在基因转录水平下调抗凋亡基因Bcl-2而促进凋亡的发生, 另一方面通过下调耐药基因MRP的表达而部分逆转耐药。同时ALA-PDT对原代白血病细胞同样有较大的抑制作用。

通过聚二烯丙基二甲基胺盐酸盐和氯金酸制备阳离子纳米金, 将纳米金和5-氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinic acid, 5-ALA)通过静电吸附作用有效结合得到新型光敏剂。 应用共振瑞利散射光谱, 紫外-可见吸收光谱, 透射电镜和激光散射等方法对其进行了表征。 结果表明通过这种方法纳米金与5-ALA可以有效结合。 这种新型光敏剂对提高光动力学疗法临床疗效具有重要指导意义。

观察新型光敏剂5氨基乙酰丙酸（ALA）介导的光动力学疗法（PDT）治疗Fischer 344大鼠9L胶质瘤的效果并探讨其作用机制。20只雄性Fischer 344大鼠颅内种植9L脑胶质瘤细胞后，随机分为对照组、PDT治疗组（40 J/cm2组、80 J/cm2组和120 J/cm2组）。接种9L细胞7天后治疗组接受相应的ALA-PDT治疗。治疗后第7天处死所有动物，通过Hematoxylin-Eosin(H-E)染色法检测颅内肿瘤的生长情况；利用免疫组化法检测肿瘤细胞的增殖活性（Ki67）和TUNEL 法测定肿瘤细胞的凋亡。结果表明利用不同能量的ALA-PDT治疗后大鼠的生存状态明显改善，脑胶质瘤的体积减小，其治疗效果在一定范围内随着能量的增大而增强，但80 J/cm2和120 J/cm2的治疗效果基本相同。通过对肿瘤细胞增殖和凋亡的检测发现，ALA-PDT对细胞的增殖无影响，但可诱导肿瘤细胞的凋亡。ALA-PDT通过诱导肿瘤细胞的凋亡可有效治疗脑胶质瘤。

5-氨基乙酰丙酸（5-aminolevulinate acid, ALA）在农业, 工业, 医药业具有广泛的应用。ALA由5-氨基乙酰丙酸合酶（5-aminolevulinate acid synthase, ALAS）催化产生, 其生物合成受终产物血红素的反馈抑制。本研究克隆一种浑球红细菌的hemA基因, 序列分析其与已报道的基因具有96 %的同源性, 蛋白质编码区域也发生改变, 并利用生物信息学软件进行同源关系的分析。采用大肠杆菌重组技术, 构建表达载体pET28a-hemA, 表达了有活性的浑球红细菌（Rhodobacter sphaeroides）的ALAS, 研究了IPTG诱导和PH对研究ALAS的影响, 同时分析了重组菌株合成ALA的能力, 测定胞外产量。结果表明, 在PH 6.5, 30 mmol/L琥珀酸和60 mmol/L甘氨酸培养条件下, 胞外ALA的最大合成量达到669 mg/L。

目的:本研究观察5-氨基乙酰丙酸介导的光动力疗法(ALA-PDT)对耐药白血病细胞株HL-60/ADR的诱导凋亡作用.方法:以耐药白血病细胞株HL-60/ADR为实验模型.实验分为4组,对照组、单纯ALA组、单纯光照组及ALA+PDT组.用MTT法检测细胞的存活率,瑞特染色观察细胞形态学改变,用双染法检测细胞凋亡率,并用共聚焦激光显微镜观察凋亡细胞的特征.结果:ALA+PDT组光照后瑞特染色可见凋亡改变;MTT法显示细胞存活率明显下降,24h为(48.67±8.14)%,48h进一步降低至(22.23±6.07)%,两者比较差异有统计学意义;流式细胞仪检测显示细胞凋亡率3h、4h和24h分别为(6.35±1.40)%、(8.07±1.87)%和(57.66±7.55)%,与对照组相比差异有统计学意义;LSCM观察AnnexinV-FITC单阳性及AnnexinV-FITC/PI双阳性细胞均具有典型的凋亡特征,而单纯ALA组、单纯光照组及对照组则无上述改变.结论:ALA-PDT能灭活耐药白血病细胞株HL-60/ADR,主要通过诱导凋亡的方式实现的,并呈一定的时间依赖性.

ALA-PDT是一种较新型的肿瘤治疗手段.由于肿瘤细胞对ALA产生的内源性光敏剂原卟啉Ⅸ(PpⅨ)的优先摄取,使肿瘤细胞被选择性地杀伤.目前在白血病领域,ALA-PDT仍限于基础研究.本文将就ALA-PDT在白血病细胞株中的作用机制、白血病耐药、自体移植体外净化中的应用及前景进行综述.