目的: 探讨携带针灸补泻信息的激光联合多部位照射对膝骨关节炎兔血清和关节液中细胞因子的影响。方法: 40只新西兰兔随机分成对照组、模型组、穴位照射组和联合照射组。兔左侧膝关节腔内注入木瓜蛋白酶造成关节炎的病理模型, 穴位照射组和联合照射组分别以低能量激光（输出功率10～20 mW）连续照射犊鼻穴和携带针灸补泻信息的脉冲激光联合照射口咽部及犊鼻穴, 10 min /d, 5 d为1个疗程, 连续3个疗程。采用放射免疫的方法测定血清及关节液中相关细胞因子含量的变化, 常规病理学切片观察膝关节软骨组织形态学变化。结果: 与对照组比较, 模型组血清和关节液中IL-1β及TNF-α含量均显著升高（P<0.01）; 与模型组比较, 穴位照射组和联合照射组血清和关节液中IL-1β及TNF-α含量均下降, 但以联合照射组效果显著（P<0.05）; 穴位照射组和联合照射组之间的IL-1β及TNF-α含量未表现出显著性差异（P>0.05）。结论: 激光联合照射口咽部和犊鼻穴和激光照射犊鼻穴都能减少细胞因子IL-1β及TNF-α的生成, 减轻关节软骨细胞的结构损伤, 起到保护关节软骨、防治骨性关节炎的作用, 但联合多部位照射效果优于单独穴位照射。

基于B型扫描超声诊断仪和线性阵列探测器的快速光声成像系统被搭建, 并用于脑部血液动力学的监测研究。实验中, 小鼠脑部皮层的全景血管网络分布图像通过光声探测器双扫描采集接收的方式被重建出来。然后, 针对小鼠的脑中动脉, 利用阵列电子扫描采集方式, 光声成像实现了局部连续地监测由静脉注射生理盐水和吲哚菁绿引起的脑部血液动力学反应, 成功地利用光声图像记录其光吸收的改变。实验展示了光声快速成像获取脑部功能信号的应用潜力。

目的: 研究高功率微波（HPM）在不同平均功率和不同重复频率条件下长期多次照射对眼组织结构的生物效应, 为我国HPM安全防护提供生物学依据。方法: 采用自行研制的HPM效应模拟源远场平面波（峰值功率密度50 W/cm2）分3个不同平均功率水平, 每天6 min持续照射1个月, 并在照后5个时间点通过眼底镜、裂隙灯观察、组织病理学方法等研究HPM长期照射对动物眼重要部位结构的生物效应。结果: HPM照射后眼角膜、晶状体、眼底等组织结构都出现了不同程度的病理变化, 并呈现出一定的时效和量效关系; 其中角膜病变依剂量不同可分别于照后2月到照后6月恢复正常, 而晶状体病变在观察期内（照后6月）仍未见恢复, 照射后动物眼底动静脉和毛细血管稍有扩张充血, 但未见瘢痕、裂隙、出血等表现。结论: 实验所用剂量范围内的HPM重复照射可以对动物角膜、晶状体、玻璃体等部位造成一定程度的生物效应, 并呈现出一定的量效关系; 在实验的观察期内, 角膜和眼底依照射剂量不同可分别于照后不同期间恢复正常, 但晶状体混浊在观察期末仍未见恢复, 能否发展成微波白内障尚需观察。

研究固气界面上花菁染料J-聚集体的光学性质、形貌特点和形成机制。以花菁染料为研究对象, 在云母基底表面制备花菁染料的超分子J-聚集体, 根据J-聚集体独特的光学性能, 通过紫外吸收光谱, 荧光光谱, 荧光显微镜等对云母界面上的花菁染料聚集体进行光谱测量和形貌表征。结果表明: 云母/空气界面上的花菁染料聚集体在580 nm处出现相对于染料单体红移且狭窄的强吸收峰, 而在583 nm 处出现一个伴随微弱Stokes位移的荧光峰, 这些结果符合吸附在基质上的J-聚集体的光学特征, 同时荧光显微镜观察表明云母基底上分散分布着2~4 μm微晶棒状的聚集体。结果证明: 花菁染料能够在云母/空气界面生成超分子J-聚集体, 其形成机制是通过带正电荷的花菁染料分子与云母基底表面带负电荷的空穴通过外延相互作用形成的。

目的: 研究载脂蛋白A5基因编码区56C>G这一多态性位点与动脉粥样硬化性脑梗死(atherosclerotic cerebral infarction, ACI)及与血脂的关系。方法: 选择170例ACI患者和171例健康人, 应用聚合酶链反应—限制片长多态性的原理, 逐个鉴定每个个体的基因型。结果: 56C>G这一位点多态性在研究人群未被发现。结论: 56C>G位点在研究人群中可能不是一个多态性位点, 可能与ACI及血脂无关联。

应用亚克隆方法构建pEGFP-C3/Eps8真核表达载体, 经测序鉴定后,用脂质体进行胶质瘤U251细胞的转染,应用G418筛选出稳定表达pEGFP-C3/Eps8和pEGFP-C3的细胞系,最后通过Western blot和荧光定位证明Eps8在U251细胞中过量表达。本实验成功建立了稳定转染Eps8的U251细胞系,为进一步研究Eps8基因在胶质瘤中的功能奠定了良好的实验基础。

5-氨基乙酰丙酸（5-aminolevulinate acid, ALA）在农业, 工业, 医药业具有广泛的应用。ALA由5-氨基乙酰丙酸合酶（5-aminolevulinate acid synthase, ALAS）催化产生, 其生物合成受终产物血红素的反馈抑制。本研究克隆一种浑球红细菌的hemA基因, 序列分析其与已报道的基因具有96 %的同源性, 蛋白质编码区域也发生改变, 并利用生物信息学软件进行同源关系的分析。采用大肠杆菌重组技术, 构建表达载体pET28a-hemA, 表达了有活性的浑球红细菌（Rhodobacter sphaeroides）的ALAS, 研究了IPTG诱导和PH对研究ALAS的影响, 同时分析了重组菌株合成ALA的能力, 测定胞外产量。结果表明, 在PH 6.5, 30 mmol/L琥珀酸和60 mmol/L甘氨酸培养条件下, 胞外ALA的最大合成量达到669 mg/L。

利用多对引物, 扩增并测定出大黄鱼16S rRNA基因和18S rRNA基因的部分序列, 其长度分别为1 202 bp和1 275 bp, 16S rRNA基因序列的GC含量为46.12 %, 18S rRNA基因的GC含量为53.00 %。将大黄鱼16S rRNA基因序列与GenBank中15种硬骨鱼类的同源序列结合, 同时将其18S rRNA基因序列与GenBank中9种脊索动物的同源序列相结合, 运用软件获得各自序列间差异百分比, 转换和颠换数值等信息。基于这两种基因序列, 利用NJ法和BI法, 分别构建16种硬骨鱼类和10种脊索动物的分子系统树。18S rRNA构建的系统树包括三大支, 一支为哺乳类、鸟类和爬行类共6个物种, 一支为两栖类的1个物种, 另一支为2种硬骨鱼类。16S rRNA构建的系统树显示大黄鱼所在的石首鱼科与鲈科和盖刺鱼科亲缘关系较近。此外还讨论了这两个基因的序列特征。

人类KLHL31基因是本实验室已克隆的基因, 其蛋白质含有保守的BTB和串连重复的Kelch结构域, 已有报道表明其在人类成体骨骼肌和心肌组织中特异表达。RT-PCR分析表明在C2C12细胞肌原分化过程中过表达KLHL31能够提高肌原分化标志基因MyoD与Myogenin的转录水平; 荧光报告系统分析发现过表达KLHL31能够增强肌原分化相关基因MCK启动子的活性, 表明KLHL31能够促进C2C12细胞的肌原分化。

为了研究hsa-miR-663在肿瘤细胞辐射应答通路中的功能, 人工合成其前体并构建入表达载体pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR-663, 进一步通过BP/LR重组反应将hsa-miR-663表达框转移至诱导型表达载体pT-REx-DEST30中。然后将hsa-miR-663的诱导型载体转染构建的四环素操纵子稳定表达细胞系HeLa-TetR, 通过定量反转录PCR及荧光蛋白的表达检测证实了hsa-miR-663在四环素诱导时表达水平升高。本载体的构建为深入研究hsa-miR-663的功能奠定了基础。

目的: 构建小鼠AQP1基因真核表达质粒并观察其在FRT细胞中的表达。方法: 采用RT-PCR方法从小鼠肾脏组织的总cDNA中扩增出小鼠的AQP1基因, 采用基因重组技术将AQP1的cDNA片段插入真核表达载体pCAGGS, 构建小鼠AQP1的真核表达质粒, 脂质体转染FRT细胞进行表达。结果: 酶切和测序结果证实AQP1真核表达质粒构建成功, 经脂质体转染FRT细胞后, 免疫荧光检测证明AQP1蛋白在真核细胞中成功表达。结论: 成功构建真核表达质粒pCAGGS-AQP1-myc, 并在FRT细胞中得以表达。为进一步研究小鼠AQP1过表达时的功能及机制奠定了实验基础。

从羊驼皮肤cDNA文库中筛选到RPL34的克隆, 经PCR鉴定并测序得知: 一种克隆的大小为270 bp（命名为RPL34 I）, 另一种克隆的大小为470 bp（命名为RPL34 II）。序列分析发现, RPL34 I和II在核苷酸水平上, 5’UTR区不具有同源性, 3’UTR区具有同源性; 在氨基酸水平上, 部分具有高度同源性; 分子进化树分析表明二者具有不同的进化速率。此外, RPL34 I和II对应于不同的转录本。通过以上结果分析, 认为RPL34 I和RPL34 II二者同时在羊驼皮肤中表达, 可能是RPL34的两个剪接体, 发挥不同的生物学功能。

利用小鼠作为模式动物进一步研究人类Lbh（Limb-bud-and-heart）在心脏发育中的功能。提取正常成年小鼠的心脏总RNA, RT-PCR 扩增小鼠Lbh的全长开放阅读框, 构建原核表达重组质粒pGEX4T-1-Lbh。转化大肠杆菌BL21 后, 摇菌培养到OD600为0.5~0.6时, 加IPTG诱导融合蛋白的表达。将纯化的GST-Lbh融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。免疫印迹法检测表明该抗体有较好的特异性, 可用于该基因结构和功能的研究。

应用光镜和透射电镜技术研究山羊精子发生不同阶段各级生精细胞显微、超微结构及山羊精子分化成熟过程。结果表明: 山羊精子发生经历了精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞及变态精子阶段发育成成熟的精子。精原细胞期核呈椭圆形, 染色质凝集成团分布于核质中, 线粒体开始出现; 精母细胞期有高尔基体分布; 精子细胞经过核质浓缩、线粒体迁移等过程发育成成熟精子, 成熟的山羊精子头部细长, 核质高度浓缩, 中段膨大, 线粒体丰富。线粒体、中心粒对精子变态发生起重要作用, 同时观察到头部与中段脱落的畸形精子。

以杜梨砧‘爱宕’和‘喜水’梨1年生幼苗为试材, 采用砂基培养法, 运用CI-340便携式光合测定仪与H-7650透射电子显微镜研究了0、16、80和200 mg·L-1 钙（依次为钙缺乏、钙低量、对照和钙过量）处理下两品种梨叶片净光合速率（Pn）、超微结构的变化及Pn与生理生态因子的相关性。结果表明: 1）钙胁迫处理的‘爱宕’和‘喜水’梨叶片的Pn均显著低于对照; 各钙处理的两品种梨Pn均与PAR呈显著正相关, 但Pn与其他因子的相关性因处理而异。2）与对照相比, 钙过量处理的‘爱宕’叶绿体呈肿胀状, 出现空泡化,‘喜水’叶绿体发生变形、有的离壁向内弯曲; 钙低量处理的‘爱宕’叶绿体扁长, 有的离壁向内弯曲, 质体小球明显增多,‘喜水’叶绿体、线粒体出现明显的空泡化; 钙缺乏处理的两品种梨细胞叶绿体、线粒体空泡化严重, 淀粉粒少或无, 质体小球明显增多, 其中‘喜水’细胞器受损程度较重。可见, 钙胁迫对两品种梨叶片光合特性和超微结构造成了明显的影响, 其影响程度与钙浓度、品种特性有关。

对喜树植株中的内生真菌进行分离纯化, 共得到126株内生菌株。对126株内生菌株进行液体培养, 并对其发酵产物进行抗菌活性测定。发现在供试质量浓度为5 mg/mL时, 126株菌株中有24株喜树内生真菌的发酵液对水稻纹枯病菌、稻瘟病菌以及辣椒疫霉具有不同程度的抑制菌丝生长的活性作用; 其中, 菌株XSY09的发酵液对此三种植物病原菌有明显的抑制作用, 抑制率分别为74.97 %、39.63 %和58.49 %。在0.1 mg/mL的测试浓度下, 菌株XSY09发酵液的乙酸乙酯相对三种植物病原菌均有较好的抑制作用。对该菌株的ITS序列进行测序分析, 初步鉴定XSY09为炭疽菌属（Colletotrichum gloeosporioides）真菌。

以湘西葛根为实验材料, 选取水、甲醇和95 %的乙醇作为提取溶剂, 索氏提取法提取其葛根素。以提取率为指标, 综合提取工艺中加入量、提取时间的影响, 采用正交实验筛选出乙醇提取工艺, 最佳参数为每次加入10倍量、回流提取时间3.5 h。用滤纸片法研究葛根提取液对大肠杆菌等8种常见食品腐败菌的抑菌活性, 结果表明, 各种菌体的抑菌效果为: 大肠杆菌>金黄色葡萄球菌>枯草芽孢杆菌>假丝酵母青霉, 对青霉无抑菌作用。各种菌的抑菌效果与浓度的关系为, 葛根素浓度升高, 抑菌效果增强。

在国内首次建立了两个啤酒花主栽品种（麒麟丰禄, 青岛大花）的节间外植体再生体系。实验表明: 啤酒花无菌苗的节间为适于不定芽再生的外植体; 适宜的再生培养基为MS基本培养基+B5维生素+葡萄糖20 g/L, 附加IAA 0.25 mg/L+TDZ 2 mg/L（麒麟丰禄）或IAA 0.125 mg/L+TDZ 1.5 mg/L（青岛大花）, 以7 g/L琼脂固化, pH5.8; 不定芽再生频率可达57 %（麒麟丰禄）或16 %（青岛大花）。啤酒花再生体系的建立, 为利用植物基因工程技术培育抗病虫害啤酒花新品系奠定了基础。

对一株产低温碱性脂肪酶细菌（Pseudoalteromonas sp.BJ17）的发酵条件进行了优化, 研究各种碳源及氮源对产酶的影响, 应用正交实验优化其发酵培养基组成。结果表明: 最佳培养基组成为淀粉 12 g/L, 蛋白胨 12 g/L, 酵母膏 3 g/L, 酪蛋白 2 g/L。最佳培养温度为25 ℃, 发酵时间 为16 h。

利用激光诱导拉曼光谱技术, 测定了萎缩性胃炎患者、胃癌患者血清的拉曼光谱。采用主成分分析法和判别分析法对拉曼光谱数据进行了分析和处理, 得到辨别胃癌和萎缩性胃炎的准确率为92 %。

目的: 介绍国内外近10年来非剥脱性嫩肤技术治疗皮肤光老化临床研究概况,以期进一步了解非剥脱性嫩肤技术在皮肤光老化中的应用新进展。方法: 应用计算机检索Pubmed和中国生物医学文献数据库1999/2009的相关文章,限定文章语言种类为英文和中文,检索词“photoaging(光老化),laser( 激光),Intense pulsed light(强光),radiofrequency(射频),Light Emitting Diode(发光二极管)”。对资料进行初审,选择临床实验研究文献查找全文。纳入标准: ①有明确诊断标准。②随机对照实验或对照实验。结果: 共收集到相关文献110篇,按上述标准纳入23篇,其余文献均被排除。结论: 非剥脱性嫩肤技术治疗皮肤光老化疗效可靠,具有副作用少,方法简单,安全性高,易被患者接受等优势。但不管单独使用哪种方法治疗皮肤光老化其效果均不是很完美, 必需紧密结合患者疾病的具体情况和非剥脱性嫩肤设备的性能进行个性化的治疗。

测量了杜氏盐藻不同生长期的静态荧光光谱, 得出了杜氏盐藻生长规律曲线。通过与传统的分光光度计法和血球计数板法研究盐藻生长规律的比较发现, 该方法反映的是活盐藻细胞浓度的变化情况, 更能反映盐藻实际生长规律; 不仅操作简便, 灵敏度高, 而且可以实现远距离非接触测量。

以黑丝羽乌骨鸡（BS）为供体, 白来航鸡(WL)为受体, 进行了BCs嵌合体制作技术研究。结果表明: （1）“黑羽”对“白羽”、“丝羽”对“片羽”为完全隐性, 可以在供体与嵌合体测交中, 后代是否出现这些特征作为种系嵌合体判断依据。（2）供体的其它表型, 对受体属于完全或不完全显性, 可以作为体细胞嵌合体判断依据。（3）通过改进嵌合体制作技术,嵌合体雏鸡的出壳率为40 %（29/73）, 其中据羽色判断的嵌合体率为18 %（13/73）; 以黑羽为依据选择体细胞嵌合体雏鸡, 10只饲养至720 d, 其中60 %(6/10)的嵌合体外观基本不变（其余的换羽后褪去黑羽）; 嵌合体鸡与供体测交, 以黑羽、灰羽和丝羽判断, 8只嵌合体鸡的种系传递率分别为2.5 %~71.4 %、5.5 %~14.3 %以及1.7 %~10.5 %。首次利用BS鸡资源, 建立了多表现型嵌合体模型, 为家鸡嵌合体技术深入研究提供了方便的检测方法。

以紫外线和氮离子注入作为诱变手段对曲酸产生菌黄曲霉CICC 2242进行诱变处理, 筛选出一株高产菌株N83。曲酸产量由初始的12.4 g/L提高到19.4 g/L, 提高了56.5 %; 遗传稳定性实验结果表明, N83遗传性状稳定良好。该结果表明氮离子注入诱变是获得高产曲酸的有效途径。

对苦荞辐照突变体黄酮含量和PAL活性以及农艺性状及其它们之间的相关性和显著性的研究得出: 荞麦种子萌发期黄酮含量与PAL活性在同一时期相关性不显著, 呈平行变化关系; 在苦荞高黄酮突变体选育过程中单株粒数、单株粒重、主茎分枝数和株高是重要的参考指标。对苦荞突变体综合特征进行分析得出: 突变体A3和A4、突变体B2和B4、突变体C3和C5的品质综合指标较对照品种有很大的改善, 特别是黄酮含量有明显的提高。

以甘薯( Ipomoea batatas (L.) Lam.) 品种栗子香的胚性悬浮细胞为受体材料, 用根癌农杆菌介导法, 获得了表达除草剂抗性基因bar基因的转HS1基因甘薯植株。共计380个遗传转化的胚性细胞团, 在添加2 mg/L 2,4-D、100 mg/L Carb 和10 mg/L Glu (glufosinate) 的固体MS 培养基上选择培养9周后, 得到了12个Glu抗性愈伤组织。将这些抗性愈伤组织转移到添加1 mg/L ABA、100 mg/L羧苄青霉素 和10 mg/L Glu的固体MS 培养基上, 其中的3个抗性愈伤组织再生出拟转基因植株。PCR鉴定它们为转基因植株。Southern blot 分析表明, HS1基因已整合到基因组中。转基因植株具有稳定的除草剂抗性。结薯观察实验结果表明, 转基因植株结薯正常。

中国淡水湖泊、水库众多, 富营养化问题严重。铜绿微囊藻是中国湖泊、水库及其他水域生态系统发生、形成富营养化危害的主要藻类。目前对铜绿微囊藻的研究主要集中在水华成因、生长的特点、作用机理等, 对其生命活动相关的分子机制研究不多。该文主要从生物节律、毒素合成、藻胆蛋白合成及其调控机制和ATP合成酶等四个方面综述了铜绿微囊藻的分子研究进展, 为今后进一步研究铜绿微囊藻的分子作用机理及其防治具有重要意义。

逆境胁迫严重影响着全世界范围内的作物产量。为减少逆境胁迫损伤, 植物在长期的进化过程中形成了多级别（转录、转录后和翻译、翻译后）的基因表达调控应答机制。最近研究发现, 内源microRNA（miRNA）在植物逆境胁迫应答中具有重要的调节作用。在逆境胁迫发生时, 一些miRNA会表达上调, 而另一些miRNA会表达下调; miRNA正是通过下调胁迫应答过程的负调节子靶基因和上调胁迫应答过程中的正调节子靶基因, 来执行生理调控功能。通过综述miRNA在植物逆境应答中的作用, 以期全面的了解逆境胁迫调控网络。