在中医经络现代研究的基础上, 探讨光子学在经脉循行路线的客观检测, 循经感传现象的发生及其实质意义, 经络腧穴诊断的客观化以及腧穴双向良性调节作用等研究领域的具体应用。指出中医经络的光子学研究有望借助光子学的学科优势, 从科学的角度对我国经络学说进行诠释和量化, 为经脉腧穴的光学特性提供重要的实验依据, 并有望找到一种非侵入性、无创伤性的诊断技术或监测疗效的有效方法, 同时促进中医经络与现代医学的融合和发展。

根据鲜红斑痣的病理特点, 建立分层模型中包含分立血管的皮肤模型, 以血管为主要研究对象, 用蒙特卡罗的模拟方法模拟在强脉冲光系统治疗鲜红斑痣中, 血管中光能量密度的分布规律。结果显示与单波长激光相比, 强脉冲光照射下血管中光能量的分布更加均匀, 在光束传输方向上能量梯度更平坦; 且血管中能量极大值更小。

探讨新型光敏剂ZnPcH1介导的光动力疗法对K562细胞的杀伤效应及其杀伤机制。应用MTT比色法检测光动力疗法对K562细胞增殖能力的影响; 采用AO/EB荧光染色法、DNA片段化分析、TUNNEL、Annexin-V-FITC/PI双染法等检测ZnPcH1-PDT诱导K562细胞的死亡方式; 以RT-PCR法检测ZnPcH1-PDT作用后不同时间对K562细胞c-myc、人端粒酶逆转录酶蛋白催化亚单位(htert)、survivin、caspase-3 mRNA表达的变化。研究发现MTT比色法结果显示PDT可以抑制K562细胞的增殖, 抑制率随光敏剂浓度的增加而增高; 各凋亡检测结果均显示ZnPcH1-PDT可诱导K562细胞凋亡, 且呈时间依赖性; ZnPcH1-PDT处理K562细胞后c-myc、htert、survivin mRNA表达呈时间依赖性降低, 而caspase-3 mRNA表达呈时间依赖性增强。结果提示PDT能抑制K562细胞增殖, 诱导细胞凋亡。

为研制一种有效的奶牛抗热应激添加剂, 将50头健康荷斯坦奶牛随机分为5组, 对照组饲喂基础日粮, 4个试验组饲喂基础日粮添加不同抗热应激添加剂, 连续饲喂30 d, 测定产奶量、生理及血液指标。结果显示: 中草药组、中草药+纤维素酶组、中草药+缓冲盐组、中草药+缓冲盐+纤维素酶组比对照组产奶量分别提高24.8 %、27.9 %、37.2 %、39.5 %; 中草药剂和缓冲盐可减缓热应激奶牛的体温(P>0.05)、呼吸和心率(P<0.05)的升高, 缓解外周血中白细胞数(WBC)、淋巴细胞数(LYM)、单核细胞数(MXD)、淋巴细胞百分比(LYM %)和单核细胞百分比(MXD %)(P<0.05)的变化; 添加中草药剂组肾上腺皮质醇(Cort)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、三碘甲状腺原氨酸(T3)和甲状腺素(T4)水平基本稳定(P>0.05); 使用中草药添加剂组谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性比对照组下降较慢(P<0.05), 添加中草药加缓冲盐组GSH-Px活性可基本保持稳定(P>0.05)。试验表明中草药剂可明显增强奶牛抗热应激力, 和瘤胃缓冲盐同用效果更好, 和纤维素酶同用作用不明显。

研究了激光照射下猪肝组织传热过程温度场空间分布的动态规律。采用有限元分析法, 利用激光分布公式获得猪肝组织的温度场空间分布, 并采用K型热电偶和热电偶放大器来测量猪肝组织表面和内部温度, 实验测量结果和模拟结果基本吻合, 同时得出血液灌注率和猪肝组织温度的关系。研究结果对于激光临床应用中激光参数的合理选择有一定的指导意义。

纤维素酶产生菌Rhizopus sp.TC1经过N+离子注入、紫外线、5-氟尿嘧啶(5-Fu)等诱变剂诱变, 选育得到突变株Rhizopus sp.TC1653, 发酵终点时滤纸酶活力(FPA)和羧甲基纤维素酶活力(CMC)分别为22.6 IU/g、224.7 IU/g干物质, 较出发菌株分别提高了276.7 ％和214.3 ％。突变株经传10代培养, 任意2代间酶活力差值均在10 %内, 表明该菌株产酶性能稳定, 可作为后继实验出发菌株。突变株在培养基上能够快速生长, 发酵96 h即达到酶活高峰期, 较绿色木霉酶活高峰期提前48 h, 缩短了发酵周期。该实验结果表明, 经N+离子注入等方式诱变选育的突变株具有孢子萌发率高, 同步性好, 代谢速度快等优点。

以棉花幼苗为试材, 分析不同浓度的亚精胺(Spermidine, Spd) (0.01 mmol/L、0.10 mmol/L、0.50 mmol/L和1.00 mmol/L)处理对棉花幼苗生长、生理生态特性的影响, 以弄清Spd增强棉花抗冷性的效果及其生理机制。结果表明, Spd预处理棉花叶片可提高冷胁迫条件下棉花幼苗抗冷性, 具体表现为Spd处理棉花幼苗可增加幼苗体内干物质和含水量, 降低叶片冷害指数、电解质渗漏率和丙二醛(MDA)含量, 增强超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性, 提高抗坏血酸、脯氨酸和可溶性糖含量。表明Spd可以改变冷胁迫条件下棉花幼苗体内生理生化指标, 从而缓解冷胁迫对棉花的伤害, 其中以0.50 mmol/L 的Spd处理效果较理想。

目的: 探索不同剂量的L-酪氨酸对羊驼黑素细胞增殖以及酪氨酸酶mRNA表达的影响。方法: 体外培养正常羊驼皮肤黑素细胞, 显微镜下观察不同剂量的L-酪氨酸(100 μmol/L、200 μmol/L、300 μmol/L、400 μmol/L)对羊驼皮肤黑素细胞增殖的影响, 利用实时荧光定量PCR技术分析不同剂量L-酪氨酸对酪氨酸酶mRNA的表达量的影响。结果: 研究结果显示: 在培养的黑素细胞中添加了不同剂量L-酪氨酸3 d后, 镜检观察, 黑素细胞数量相比较空白对照组有所减少, 酪氨酸酶mRNA表达量增加且显著高于对照组(P<0.05), 在200 μmol/L时, 酪氨酸酶mRNA表达量达到最高峰值。结论: L-酪氨酸能诱导羊驼皮肤黑素细胞酪氨酸酶mRNA表达量增高。

采用家蚕(Bombyx mori)H9品种作为实验动物, 分别用转基因和非转基因大豆粉制作的人工饲料进行饲育。通过饲育试验, 比较分析了不同处理后家蚕的龄期经过时间、全茧量、茧层量、茧层率、蛹体重、疏毛率、死亡率、每龄眠起体重等经济性状指标。同时采用PCR方法对转基因饲料饲育后家蚕组织中外源基因的表达情况进行了检测。结果显示, 含转基因大豆粉的人工饲料对家蚕的生长发育并无显著影响, 且不存在外源基因的污染。

以大豆合丰25为试验材料, 经过航天搭载与60Co-γ辐射的复合诱变处理, 对M2代4个株系的主要农艺性状进行研究。结果表明经过复合诱变后大豆群体株高、底荚高度、主茎节数、单株荚数、单株粒数等主要农艺性状发生不同程度的变化, 存在着与对照达到显著或极显著的株系; 只有1个株系主茎节数存在单株变异率, 其它株系主茎节数单株变异不明显; 株高、底荚高度、单株荚数、单株粒数等农艺性状均有不同程度的单株变异率, 可以为大豆种质创新所利用。

新近研究发现STAT2基因具有致瘤性。前期研究发现: 多种肿瘤组织和细胞系高表达STAT2, 因此为进一步研究STAT2基因在肿瘤发生发展中的功能, 利用RNA基因沉默技术, 降低STAT2基因在宫颈癌HeLa细胞系中的内源表达水平, 采用XTT实验、软琼脂集落形成实验以及裸鼠体内成瘤实验等研究策略, 发现沉默STAT2基因可抑制肿瘤细胞在体外和裸鼠体内的增殖, 提示STAT2基因具促进肿瘤细胞增殖功能。

转录因子AP-2是一个功能重要的基因家族, AP-2α在协同调控脂肪细胞分化成熟, 以及脂肪因子分泌的过程中发挥重要作用。为了阐明其协同调控的机制, 本文采用anti-AP-2α抗体免疫共沉淀技术, 从小鼠前脂肪细胞3T3-L1中分离AP-2α相互作用蛋白, 然后用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱结合数据库查询鉴定AP-2α结合蛋白, 找到了acyl-Coenzyme A dehydrogenase,long-chain、Protein-L-isoaspartate(D-aspartate)O-methyltransferase和T-complex protein 1 subunit epsilon三个与AP-2α相互作用的蛋白。为进一步研究小鼠的前脂肪细胞中AP-2α蛋白聚集及在糖脂代谢调控中可能的作用机制提供了重要依据。

目的: 探讨人类胚胎在早期发育过程中端粒维持的机制。 方法: 利用端粒特异性探针对临床IVF过程中2~8细胞时期停止发育不适合移植的胚胎和来自于囊胚期的人类胚胎干细胞进行荧光原位杂交检测端粒重组。结果: 人类早期胚胎发育中存在端粒交换的结构APB小体, 而来自于囊胚期的胚胎干细胞不再具有这种结构, 胚胎干细胞端粒交换发生频率较低(0.15 %)。 结论: 结合其他实验报道, 提示人类胚胎早期发育过程中出现两种端粒维持机制的并存。

HSP70 蛋白是受热等因素刺激后而诱导产生的蛋白质,是热休克蛋白家族中最重要的一员。采用RT-PCR方法克隆了柞蚕(Antheraea pernyi)热休克蛋白70基因(HSP70)的ORF序列(GenBank登录号: GU945199), 该片段的序列长度为1 905 bp。生物信息学分析表明, 该序列共编码634个氨基酸, 预测蛋白的等电点和分子量大小分别为5.62 kD和69.5 kD。具有HSP70的保守性结构特征, 与天蚕(Antheraea yamamai)、家蚕(Bombyx mor)、甘蓝夜蛾(Mamestra brassicae)、棉铃虫(Heliothis viriplaca)、甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)、烟草夜蛾(Manduca sexta1)、膜翅目寄生蜂(Cotesia rubecula)的同源性分别为95.7 %、78.5 %、76.1 %、77.3 %、76.6 %、74.7 %、65.9 %。根据它们的一级结构构建了系统进化树, 进一步确立了它们之间的亲缘关系。

Bms3a基因可能在家蚕Bombyx mori 抗病或细胞凋亡中有一定的作用。将融合有绿色荧光蛋白的Bms3a基因克隆到杆状病毒转移载体pFastBac1中获得了pFastBac-IE1-Bms3a-EGFP真核表达载体, 利用杆状病毒(Bac-to-Bac)表达系统筛选重组杆状病毒, 以重组病毒感染家蚕BmN细胞和五龄幼虫, 分别在感染24 h和48 h检测到有绿色荧光蛋白的表达, Western blot证明表达的融合蛋白在相对分子量约57 kD处出现特异条带, 与预计的蛋白理论值相符。结果表明BmS3A-EGFP融合蛋白在家蚕细胞BmN及幼虫体中得到高效表达。研究结果为进一步研究BmS3A蛋白的功能奠定了基础。

从家蚕(Bombyx mori L.)5龄幼虫肠道分离鉴定产淀粉酶细菌菌株以用作微生态制剂的研究, 并对该菌α-淀粉酶基因进行克隆、序列分析及在大肠杆菌中原核表达。通过含淀粉NA培养基筛选分离得到产淀粉酶菌, 通过形态学观察及16S rDNA序列分析鉴定其种属, DNS法测定酶活, 并设计了淀粉酶基因引物进行克隆, 构建了DZ-a号菌淀粉酶基因的原核表达载体, 经酶切鉴定后转化到大肠杆菌Transetta(DE3)中并诱导表达。共分离得到2株产淀粉酶细菌菌株, 将其PCR扩增得到的16S rDNA序列分别与GenBank上已有序列进行比对, 均与芽孢杆菌属蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus有99 %的同源性, DZ-a号菌和DZ-h号菌的产酶能力分别为20.5 U/mL和24.2 U/mL。产淀粉酶基因片段测序结果表明两株菌的克隆基因片段长度分别为3 414 bp和3 378 bp, 均包括完整的编码区序列, 可编码586个氨基酸, SDS-PAGE分析得到大小约66 kD的目的蛋白。鉴定该2株菌DZ-a、DZ-h号菌均属于芽孢杆菌属蜡样芽孢杆菌, 克隆测序所得序列为完整的蜡样芽孢杆菌α-淀粉酶基因序列, 并成功表达。为进一步纯化和鉴定目的蛋白及研究其功能奠定了试验基础。

研究鸡白细胞介素-2(chicken interleukin-2, ChIL-2)的免疫佐剂功能, 构建ChIL-2与新城疫病毒F蛋白多抗原表位(NDV-F)的嵌合基因, 以对鸡新城疫疫病进行防治。采用重叠延伸PCR方法通过基因柔性接头将ChIL-2基因和NDV-F多抗原表位基因构建成ChIL-2-linker-NDV-F嵌合基因并克隆入PET-32a载体, 经测序鉴定后, 转化BL21大肠杆菌, IPTG诱导表达6×His融合蛋白, Ni2+亲和柱纯化, 表达产物经SDS-PAGE、Western blot和间接ELISA检测和鉴定。结果表明, 实验成功构建并克隆了ChIL-2-linker-NDV-F嵌合基因, 嵌合基因在大肠杆菌中表达的ChIL-2-linker-NDV-F融合蛋白分子量约为48 kD, 表达量约占菌体蛋白总量的45 %, 纯化后的ChIL-2-linker-NDV-F融合蛋白能与感染NDV的鸡血清发生反应。上述结果证明ChIL-2-linker-NDV-F嵌合基因在原核细胞中能有效表达, 且融合蛋白具有较强的特异性和免疫原性。

利用SCoT和SRAP两种分子标记技术对30份彩色棉与白色棉种质资源, 进行遗传多样性研究。用29对SRAP引物组合和26个SCoT引物分别对供试棉花的基因组DNA进行扩增。SCoT引物共扩增出163条带, 多态性比率为61.96 %, 遗传相似系数GS值变化范围为0.5405~0.9972。SRAP引物组合共扩增条带1 067条, 多态性比率仅为14.1 %, 遗传相似系数GS值变化范围为0.5415~0.9109。两种标记系统得到了相似但并不完全相同的聚类图, 2种标记方法间存在显著相关性(r=0.5518, P＜0.05)。结果表明, SRAP与SCoT标记均适用于棉花种质的遗传多样性分析, 且SCoT的标记指数MI高于SRAP标记, 为SCoT这种新兴的标记技术在棉花育种中的应用提供了重要的依据。

采用醇提法, 分别对毛竹、麻竹、雷竹的竹笋及笋壳进行醇提, 并对醇提物进行抗氧化活性测定。对DPPH·、OH·、O-2 ·自由基的清除作用分别通过分光光度法、邻二氮菲法、邻苯三酚自氧化法进行测定, 相对还原能力、总抗氧化能力的测定则采用普兰士蓝反应法和FRAP法。结果表明: 不同种的竹笋及笋壳的醇提物含量与自由基清除能力、相对还原能力、总抗氧化能力均成正相关。毛竹的竹笋和笋壳在所研究竹种中抗氧化活性最强, 麻竹次之, 雷竹较差, 且毛竹春季的竹笋和笋壳抗氧化活性总体要优于冬季。

为了有效防控羊致病性大肠杆菌病, 以雁门关地区养羊企业和规模专业户为研究对象, 对临床健康羊和腹泻症状羊进行致病性大肠杆菌的分离、培养、生化试验、血清型鉴定、致病性试验以及耐药性研究。结果显示, 从 180头份(临床健康羊的小肠150头份, 腹泻病羊的肛门棉拭子30头份)材料中分离培养出符合羊大肠杆菌生化特性的72株, 其中25株为羊致病性大肠杆菌; 这些致病菌是由O127a: K63(B8)、O125: K70(B15)、O142: K86(B)、O111: K58(B4)、 O114: K90(B)、O119: K69(B14)6个血清型单独或融合组成的9个菌株, 类似结果国内鲜有报道; 耐药性试验表明, 致病菌株对阿米卡星的敏感率为87.5 %, 卡那霉素为75 %, 头孢类药物为50 %～87.5 %, 而对氨苄西林的耐药率为50 %。

利用农杆菌介导方法, 分别将PAPⅡ单基因、PAPⅡ基因和异戊烯基转移酶基因(ipt)共表达的双基因(PAPⅡ-ipt)导入烟草品种K326叶细胞中, 半定量RT-PCR分析了转基因植株中PAPⅡ、ipt和核糖体蛋白大亚基基因(RPL3A)的表达, 并进行了TMV攻毒实验。结果表明: 双基因PAPⅡ-ipt对烟草的转化频率高达45.55 %, 为单基因PAPⅡ的转化频率(13.3 %)的3.4倍; 50 %的转基因植株没有检测到转基因的表达, PAP Ⅱ-ipt表达的转基因植株中RPL3A基因的表达水平为PAP Ⅱ表达植株中的1.25倍, 且生长发育正常, 对TMV病毒的抗性有较大程度的提高。因此, ipt与PAPs基因共表达可作为克服PAPs细胞毒性的有效途径。

从农药厂排污沟污泥中分离到一株能降解毒死蜱的新菌株, 命名为R17, 经生理生化和16S rDNA 序列同源性分析, 鉴定为Sphingopyxis terrae。R17可以利用毒死蜱作为唯一碳源生长, 该菌株的最适生长温度为35 ℃、最适pH为7~8, 在此条件下培养28 h后, 菌落浓度达9.18×108 cfu/mL。研究了该菌株在不同时间, 对不同浓度毒死蜱的降解特性, 结果表明, 当接菌量为9.18×107 cfu/mL时, 在1 d、2 d、3 d和4 d内对10 mg/L的毒死蜱降解率分别达到18.59 %、31.23 %、36.55 %和47.69 %以上; 在2 d内对1 mg/L、5 mg/L和10 mg/L的毒死蜱降解率分别达到50.21 %、43.46 %和31.23 %。

本工作旨在探讨贴壁培养细胞台盼蓝拒染试验的方法, 为其合理应用提出建议。用正常培养及NaN3作致死处理的人视网膜色素上皮细胞株-19, 进行原位贴壁细胞和培养体系上悬液中细胞的台盼蓝拒染实验, 并比较其原位法与计数板法所测活细胞率。与计数板法相似, 随染液浓度增高或染色时间延长, 原位台盼蓝拒染实验的活细胞率检测值逐渐增加。培养体系上悬液中脱落细胞的存活率显著低于贴壁的细胞, NaN3处理使脱落细胞增加。因此, 对于贴壁牢固的培养细胞, 原位台盼蓝染色是检测活细胞率的实用方法。根据细胞从培养表面上消化下来的难易程度和脱落到培养上悬液中的数目多少, 可选用原位染色法或/和计数板法台盼蓝拒染试验, 从而检测贴壁培养细胞的总存活率。

简要概述了血管支架的制备过程。从激光器和加工材料的选择, 支架结构的设计, 激光切割工艺参数的优化, 辅助路径的设置以及血管支架的后序处理等方面探讨了这些因素对血管支架加工质量的影响情况。

拉曼光谱是一种分子振动光谱技术, 具有分子水平的肿瘤检测和诊断能力。胃癌是常见恶性肿瘤, 经常到晚期才得到诊断, 死亡率较高, 而早期胃癌预后较好, 因此胃癌早期检测和诊断显得尤为重要。文章介绍了拉曼光谱用于胃癌早期检测和诊断的应用, 并综述其研究进展, 结果认为拉曼光谱探针与内镜整合, 将实现胃癌活体检测和诊断, 极具临床应用价值。