Functionalized black phosphorus (BP) nanosheets have been considered as promising nanoagents in cancer therapy due to their excellent photothermal conversion efficiency. However, it is still difficult to visually monitor the dynamic localization of BP nanoagents in cancer cells. In this paper, we systematically studied the second-harmonic generation (SHG) signals originating from exfoliated BP nanosheets. Interestingly, under the excitation of a high frequency pulsed laser at 950 nm, the SHG signals of BP nanosheets in vitro are almost undetectable because of their poor stability. However, the intracellular SHG signals from BP nanosheets could be measured by in vivo optical imaging due to the efficient enrichment of living HeLa cells. Moreover, the SHG signal intensity from BP nanosheets increases with the prolonged incubation time. It can be expected that the BP nanosheets could be a promising intracellular SHG nanoprobe employed for visually in vivo biomedical imaging in practical cancer photothermal therapy (PIT).

目的: 探讨Varp蛋白对人宫颈癌Hela细胞增殖及凋亡的影响。方法: 构建稳定表达Varp蛋白的Hela细胞株, 通过氚标胸腺嘧啶核苷酸(3H-TdR)掺入法及碘化丙啶(PI)染色流式细胞术检测Varp蛋白对Hela细胞增殖、凋亡等方面的影响。结果: 稳定表达Varp蛋白的Hela细胞相对于对照细胞, 其增殖明显下降, 而凋亡明显增加。结论: Varp蛋白在Hela细胞中稳定过表达能够增加细胞凋亡, 抑制细胞增殖。

热激蛋白(HSPs)是受热等因素刺激后而诱导产生的蛋白质, 是一类可以调节应激反应并且保护机体防止细胞损伤的蛋白质, 在机体的应激反应中具有重要作用。它们作为一般标志物被广泛应用于环境监测中。CdCl2, Cu2＋, Zn2＋这三种重金属是普遍存在的环境污染物, 对人体和动物的一些主要器官造成损伤。以HeLa细胞(子宫肿瘤细胞)为材料, 采用不同浓度的CdCl2, Cu2＋, Zn2＋三种重金属物质诱导细胞, 并利用免疫荧光染色(IFS), SDS-PAGE, Western blotting和RT-PCR四种手段分别从基因和蛋白质的水平来研究重金属对HSP70表达的影响。结果表明, 三种金属对HSP70表达的影响程度为CdCl2>Zn2＋>Cu2＋, 且HSP70的产生量与重金属的浓度呈正相关。通过研究, 以建立一种对HSPs的表达更有效的检测手段用于以后的研究。

测定了光敏剂血卟啉单甲醚对人宫颈癌细胞HeLa光敏作用后的傅里叶红外光谱。结果显示: 光敏作用后, HeLa细胞磷酸二酯基团的对称伸缩振动峰1 085 cm-1和不对称伸缩振动峰1 246 cm-1蓝移, 强度下降; 蛋白质酰胺I带1 656 cm-1发生蓝移, 酰胺Ⅱ带1546 cm-1出现红移; CH2对称伸缩振动峰2 858 cm-1, 峰位蓝移2 cm-1, 峰值明显减弱; 细胞的蛋白质和核酸谱峰面积比值D1085/D1546降低。提示细胞中的DNA、蛋白质和磷脂结构受到损伤。结果表明: DNA、蛋白质和磷脂是血卟啉单甲醚光敏作用的主要靶分子。

比较研究了可见波段405, 514, 633和785 nm低强度激光辐照HeLa细胞的促增殖效应。 实验采用100和1 000 J·m-2两种有效能量密度的可见光波辐照细胞， 照射后24, 48, 72 h采用MTT法检测细胞活性。 结果表明， 405, 633, 785 nm激光均能促进HeLa细胞增殖， 且呈波长和时间依赖性； 633 nm激光辐照对细胞促增殖效应最显著； 514 nm激光辐照对HeLa细胞促增殖效应较不明显。 不同光剂量对细胞增殖效应不同， 405, 633, 785 nm激光辐照时能量密度为1 000 J·m-2的辐照组细胞增殖均较100 J·m-2辐照组明显， 而514 nm激光辐照时1 000 J·m-2辐照组与100 J·m-2辐照组细胞增殖的差异不明显。

研究光动力作用诱导人宫颈癌细胞HeLa凋亡的分子机制。利用傅里叶变换红外光谱(FTIR),分析光动力作用后,细胞中的核酸、蛋白质、脂类的谱图变化。结果显示,与对照组相比,表征核酸的3条谱线972,1083和1241 cm-1,峰强减小,峰位发生位移;表征脂质的2923 cm-1 和2957 cm-1 峰,波数增加,峰强度明显减弱;蛋白质二级结构中,无规卷曲和β转角的含量大幅上升,α螺旋和β折叠含量减少。实验结果表明,光动力作用使核酸、蛋白质、脂类受到损伤,从而诱导肿瘤细胞凋亡。

利用离子注入机所产生的低能N+模仿宇宙中低能离子作用于人宫颈癌细胞（HeLa cell）， 探索其对人类细胞的影响及作用机制。 因实验中的低能离子产生和加速要在真空中进行， 细胞在离子注入同时将受到真空的影响， 为此研究人员利用石蜡油保护细胞以防止注入时的水份蒸发。 注入处理完毕后收集细胞， 采用傅里叶变换红外光谱法(FTIR)分析真空和低能N+束注入后细胞中大分子的相对含量、 构型及其构象变化等方面的信息。 结果表明： (1）不同处理后的样品在3 300 cm-1附近吸收谱带存在明显差异。 对照样品的特征峰位为3 300 cm-1， 而其他样品中除了注入5×1014 N+·cm-2外， 红外吸收峰均向长波数方向移动， 真空2×1015 N+·cm-2样品的频移尤为明显至3 420 cm-1处。 (2）与对照样品相比较， 各处理样品的1 378 cm-1处吸收峰峰位均向长波数方向频移。 (3）处理样品相对于对照样品而言， 2 360 cm-1处吸收峰均向长波数方向移动。 该结果说明低能离子注入处理可以引起细胞中核酸、 蛋白的含量和构象变化。

在选用了石蜡油作为细胞耐受真空的保护剂基础上， 分别采集了人宫颈癌细胞（HeLa细胞）经真空和不同剂量低能离子注入后的紫外吸收光谱。 实验结果显示： HeLa细胞在202及260　nm附近均有特征性的吸收峰。 数据的进一步分析发现： （1）HeLa细胞经真空处理后的紫外吸光值随着真空时间的延长而增加， 且真空对细胞紫外吸收光谱的影响大于单纯的石蜡油浸泡影响； （2）真空对于HeLa细胞紫外吸光值的影响远低于低能离子注入的影响； （3）HeLa细胞在注入不同剂量的低能N+后， 紫外吸光值会随着注入剂量的增大而增加。 在上述分析的基础上， 本文又探讨了低能N+束注入对肿瘤细胞的结构、 各成分的组成比例及分子排列的影响， 该研究为深入探索低能离子注入生物样品的作用机理奠定了基础。

为了研究癌细胞自体荧光光谱在细胞周期变化过程中是否发生变化,对同步化培养的宫颈癌细胞(HeLa)在细胞周期各时相(G1期, S期, G2期和M期)样品的自体荧光谱进行了测量。测量结果表明,HeLa细胞在细胞周期变化过程中有自体荧光现象存在, 其特征荧光峰位于360 nm和680 nm处, 且各时相样品的荧光光谱强度各不相同。这些差异说明HeLa细胞在细胞周期变化过程中细胞内荧光物质(含芳香族氨基酸和卟啉)产生了相应的变化从而导致了不同时相的荧光光谱强度的差异。细胞周期各时相的荧光光谱能够反映细胞生长变化过程中芳香族氨基酸和卟啉的变化, 可为采用光谱技术对癌细胞生长周期进行研究提供依据。

目的 探讨He-Ne激光对HeLa细胞Fas、bcl-2、NF-κB基因表达的作用.方法 将HeLa细胞接种于小鼠背部脾区皮下,24h后采用24mW He-Ne激光器照射小鼠脾区(瘤区),然后采用免疫组化方法观测Fas、bcl-2、NF-κB的表达.结果 激光照射组瘤块重量、bcl-2、NF-κB表达明显低于非激光照射组,而Fas表达明显高于非激光照射组,组间比较,差异有显著意义(P＜0.05).结论 He-Ne激光具有促进HeLa细胞调亡信号形成,从而发挥抗肿瘤免疫效应.