基于磷脂酰肌醇 3-激酶（ PI3K）/丝苏氨酸蛋白激酶（ AKT）信号通路探究安罗替尼对 A549细胞增殖、凋亡的影响。将 A549细胞分为对照组、各剂量试验组、安罗替尼组、阳性药物组、抑制剂组和激活剂组。干预 24 h后检测 A549细胞活力、细胞形态、增殖率、凋亡情况及相关蛋白的表达水平。结果显示： 20 μmol/L安罗替尼处理后， A549细胞活力降低；安罗替尼组和阳性药物组较对照组 A549细胞生长受到抑制，细胞增殖率、细胞周期素 D1（Cyclin D1）及 p-PI3K、p-AKT的表达水平降低，细胞凋亡数量和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 -3（Caspase-3）的表达水平升高。抑制剂增强了上述各指标的变化，而激活剂则具有与抑制剂相反的趋势。该研究结果说明，安罗替尼可显著抑制人肺癌 A549细胞的增殖并促进其凋亡，其作用机制可能与抑制 PI3K/AKT通路的信号转导相关。该研究结果进一步说明了安罗替尼作为抗肺癌药物的潜在价值，为抗肺癌药物的研发提供了新的理论基础。

硫利达嗪作为吩噻嗪类抗精神病类药物，具有诱导肿瘤发生免疫原性死亡（ ICD）、激活特异性免疫反应的潜力。本研究利用 A549和 H1299细胞探讨了硫利达嗪诱导肺腺癌细胞免疫原性死亡及其分子机制。将不同浓度的硫利达嗪与 A549和 H1299细胞共孵育 24 h后，利用四甲基偶氮唑蓝（ MTT）法检测细胞的存活及生长情况，利用流式细胞术分析细胞凋亡率，利用 ATP检测试剂盒检测细胞上清中的 ATP含量，利用免疫荧光法检测细胞表面钙网蛋白（ CRT）的表达，利用蛋白质印迹（ Western blot）法检测凋亡相关蛋白裂解的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶 3（Cleaved caspase 3）、B淋巴细胞瘤 -2（Bcl-2）、Bcl-2相关 X蛋白（ Bax）、细胞色素 C（Cyt C）的表达水平。结果表明，硫利达嗪能够显著抑制 A549和 H1299细胞的增殖，促进细胞凋亡，细胞增殖抑制及凋亡呈浓度依赖性。 ATP分泌量增加及细胞表面 CRT的表达水平上调，表明上述细胞发生了免疫原性死亡。而 Bcl-2表达水平下降， Bax和 Cyt C以及 Cleaved caspase 3表达水平上调，进一步证明了硫利达嗪可诱导肿瘤细胞凋亡。上述结果表明，硫利达嗪可通过线粒体应激信号通路诱导肺腺癌细胞发生免疫原性死亡，从而抑制肿瘤细胞的增殖。

程序性死亡受体 1（PD-1）/程序性死亡配体 1（PD-L1）信号通路主要参与免疫负调控作用，且在许多类型的肿瘤的恶性发展中具有关键作用。 PD-L1的高表达可促进肝细胞癌（ HCC）的侵袭，提高肿瘤复发的风险。另外， PD-L1常作为免疫检查点的阻断靶点，主要通过单抗将其中和，引发抗肿瘤免疫反应。因此， PD-L1是 HCC免疫治疗中极具潜力的靶点之一。本文主要探究纳米级功能化氧化石墨烯（ GO-PEI-PEG）携带 PD-L1 siRNA对肝癌细胞的恶性生物学行为的影响。研究结果显示，将 GO-PEI-PEG/PD-L1 siRNA转染至 MHCC97H细胞后，细胞的增殖和迁移均被抑制，细胞周期阻滞在 G1期，且细胞凋亡的数目增多。进一步研究发现， GO-PEI-PEG/PD-L1 siRNA对 MHCC97H细胞的抑制作用是通过阻碍 AKT信号通路激活实现的。这些试验结果表明， GO-PEI-PEG具备优秀的递送性能，携带 PD-L1 siRNA可有效干扰 PD-L1表达，进而抑制肝癌细胞的恶性生物学行为，这为治疗 HCC提供了更安全、有效的递送新策略。

同龄的黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)呈现明显的两性生长差异，即雄性个体的体长、体重皆大于雌性个体。而mTOR信号通路在细胞生长、发育以及蛋白合成过程中起重要作用。为了了解黄颡鱼两性差异的营养生长机制与mTOR信号通路之间的关联性，本试验首先在生理生化特性方面对雌、雄黄颡鱼的肌肉营养成分进行了比较分析。结果表明，在雌、雄黄颡鱼的比较分析中，除了两者的水分、粗蛋白、粗脂肪含量差别不大以外，在矿物元素、氨基酸组成、蛋白的氨基酸组成和脂肪酸组成等方面，雌性黄颡鱼肌肉的营养品质相对雄性更优。针对mTOR信号通路主要基因开展实时荧光定量PCR分析，结果显示，除性腺组织外，AKT1、AKT2、AKT3、mTOR、S6KA、S6KB、4E-BP1基因在雄性黄颡鱼的肌肉、肝、肾和心脏组织中的表达均显著高于雌性，这可能与雌雄黄颡鱼生长差异有关。本研究为进一步探索黄颡鱼两性生长差异的分子机制奠定了试验基础。

Wnt/β-catenin信号通路的正常表达是调控正常细胞生长、分化的重要通路, 对Wnt/β-catenin信号通路中靶点的研究也是当前肿瘤靶向治疗的热点。本文旨在探究低强度激光(LLLI)通过Wnt/β-catenin信号通路对RKO结直肠癌细胞的影响。利用632.8 nm波长的红外激光照射RKO细胞, 应用半定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法筛选梯度低强度激光对RKO细胞Wnt/β-catenin信号通路中的APC、β-catenin、DVL基因表达的影响。RT-PCR结果显示: 15 J/cm2能量密度的低强度激光可以降低RKO细胞中β-catenin基因的表达, 可以增强APC及DVL基因的表达, 且有随能量密度的递增而递增的趋势, 差异有统计学意义。通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法及蛋白质印迹(Western blot)法检测15 J/cm2能量密度的低强度激光照射后的RKO细胞相关指标的变化。qRT-PCR结果显示, Wnt5A、LRP5、TCF-4的基因表达均有不同程度的降低, 差异有统计学意义。Western blot结果显示, β-catenin蛋白表达的下降相对于空白对照组的差异有统计学意义。qRT-PCR及Western blot的结果表明, 15 J/cm2能量密度的低强度激光短时间照射仍能对RKO细胞Wnt/β-catenin信号通路的过度表达起抑制作用。活细胞/死细胞试剂盒染色观察15 J/cm2能量密度的低强度激光照射下, 试验组RKO死细胞较对照组多。综上所述, 15 J/cm2能量密度的低强度激光照射能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路过度表达以延缓RKO结直肠癌细胞的增殖, 有剂量依赖性及时间累积效应, 并可能额外激活细胞凋亡途径导致细胞凋亡。本研究可为结直肠癌的治疗提供一种新的思路。

在鱼类中关于转化生长因子β -激活激酶1(TAK1)在天然免疫反应中的功能研究较少。为了探究TAK1在斑马鱼天然免疫中的功能, 本文克隆并获得了一种斑马鱼tak1剪接异构体(Drtak1), 其开放阅读框含有1 737个核苷酸, 编码578个氨基酸, 其中包括N端的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶结构域和C端的卷曲螺旋结构部。通过免疫荧光试验, 证实DrTAK1是一种胞质蛋白。双荧光素酶报告试验显现在EPC细胞中单转DrTAK1不能诱导IFN的产生, 但与IRF7共转时能显著提高其诱导干扰素启动子表达的能力。本文研究结果首次在斑马鱼中发现TAK1能正向调控IRF7介导的天然免疫反应, 为后续DrTAK1功能研究奠定了基础。

通过microRNA芯片技术在小鼠GC-1 spg细胞中筛选发现microRNA-199a-3p (miR-199a-3p) 受转化生长因子TGF-β1调节。为了进一步探讨二者的关系,通过基因克隆与载体构建技术、双荧光素酶报告基因检测及定量PCR实验,发现miR-199a-3p靶向识别肿瘤转移抑制基因2（Nme2）的3′非编码区（UTR）序列,且正向调控Nme2的表达。利用TGF-β1处理GC-1 spg细胞后,结果显示Nme2和miR-199a-3p在mRNA水平的表达均显著上调;进一步将miR-199a-3p和TGF-β1双重作用于GC-1 spg细胞后,结果表明Nme2的表达会明显增强,而且在TGF-β1通路中,miR-199a-3p被抑制的部分功能可能会被Nme2补偿。综上,miR-199a-3p对Nme2基因具有直接靶向识别和调控作用,且在参与TGF-β1信号通路的生物学效应中,二者在功能上相互关联。

目的: 系统性研究经典Tgfβ信号通路各成员, 在人类早期结直肠癌组织中, 转录水平上的表达差异, 以探索Tgfβ信号通路在人类结直肠癌发生中作用机制。方法: 利用生物信息学手段, 在GEO数据库中下载符合纳入标准的早期人类结直肠癌芯片结果, 通过UltralEdit软件实现探针号和基因名的转换以建立全转录本表达数据表; 通过KEGG信号通路图谱选择Tgfβ信号经典通路待测分子, 统计学分析各待测分子在正常组癌症组中的表达差异。结果: 在GEO数据库中下载和获得符合纳入标准的早期人类结直肠癌结直肠癌芯片12组基因芯片结果, 对Tgfβ信号通路及其旁路共27个进行表达差异分析, 其中表达水平上调的分子4个, 下调的基因3个, 具有或接近显著性意义。结论: 在直肠癌发生过程中, Smads分子的表达下降阻断经典的Tgfβ信号的抗肿瘤作用, 同时配体分子和受体分子的广泛上调可能刺激旁路分子的激活从而导致肿瘤的发生。

低能量激光照射(low level laser irradiation, LLLI)是一种生物物理学刺激, 对多种细胞具有光生物调节作用, 可以促进骨组织和软组织的愈合, 已经引起口腔种植工作者的重视。本文综述了LLLI在口腔种植中的应用, 并简述了低能量激光照射的光生物调节作用可能的分子学机制, 最后提出了低能量激光照射的研究展望, 为未来低能量激光照射在口腔种植临床的应用奠定基础。